Proteína de Bence-Jones

A urina de uma pessoa saudável não contém a proteína de Bence-Jones, que é representada por cadeias leves de imunoglobulinas que são detectadas como resultado da formação de processos tumorais malignos.

Testes laboratoriais para a presença de proteínas específicas de baixo peso molecular são necessários para diagnosticar uma série de condições patológicas (na maioria das vezes problemas com o sistema imunológico β), bem como para determinar a eficácia da terapia utilizada.

Em excesso, a proteína de Bence-Jones é produzida pelos plasmócitos, transportada pela corrente sanguínea e excretada pela urina. É esta última propriedade dos corpos proteicos que permite suspeitar das seguintes doenças ao examinar a urina:

• mieloma;
• osteossarcoma;
• plasmocitoma;
• leucemia linfocítica crônica;
• linfogranulomatose;
• amiloidose primária;
• macroglobulinemia;
• gamopatia monoclonal diapática.

A conexão entre a liberação de uma proteína específica e a subsequente disfunção renal causada pelo efeito tóxico dos corpos proteicos nas estruturas epiteliais dos túbulos renais, que por sua vez causa o fenômeno da distrofia, síndrome de Fanconi e amiloidose renal, foi clinicamente confirmada.

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Proteína de Bence Jones na urina

A presença de proteínas na urina é chamada de proteinúria. A proteinúria pré-renal é entendida como a presença de grandes quantidades de proteínas de baixo peso molecular na urina. Nesse caso, não há danos ao filtro e aos túbulos renais, e a função renal normal não é capaz de garantir a reabsorção dos corpos proteicos. A proteinúria extrarrenal (falsa), ou seja, que ocorre sem comprometimento da função renal, indica a presença de um processo infeccioso ou maligno no organismo. A proteinúria é observada em 60 a 90% dos casos de pacientes com mieloma. Cerca de 20% das condições patológicas são mieloma de Bence-Jones.

A proteína de Bence-Jones na urina é diferenciada devido a alterações humorais no sistema imune β. O aparecimento de corpos proteicos está associado à patologia do mieloma, hemoblastoses paraproteinêmicas, endoteliose, macroglobulinemia de Waldenstrom, leucemia linfática e osteossarcomas. A detecção da proteína de Bence-Jones na urina é uma importante etapa diagnóstica e prognóstica. Devido ao seu baixo peso molecular, a proteína de Bence-Jones é excretada na urina, danificando o epitélio dos túbulos renais, o que pode levar ao desenvolvimento de insuficiência renal, que pode levar à morte. A classificação oportuna da proteína de acordo com o tipo também é importante: a proteína λ tem um efeito nefrotóxico maior do que a κ.

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Ensaio de proteína de Bence Jones

A presença de corpos proteicos diferentes do soro na urina indica leucemia linfática, osteossarcoma ou mieloma (processos tumorais da medula óssea). A proteína de Bence-Jones, quando o filtrado urinário é aquecido a 45-60 °C, precipita como um sedimento turvo que se deposita nas paredes do tubo de ensaio. Um novo aumento da temperatura até a ebulição dissolve a turbidez separada.

O ensaio quantitativo para proteína de Bence Jones é realizado da seguinte forma:

• usando parte de água e parte de ácido nítrico como reagente;
• colocar ácido nítrico (0,5-1 ml) em um tubo de ensaio com camadas do mesmo nível de urina a ser testada;
• avaliação do resultado após 2 minutos (o aparecimento de um anel fino na borda do meio líquido indica a presença de 0,033% de corpos proteicos).

A observação de um anel filiforme requer a diluição da urina com água na proporção de 1:1. O aparecimento de um anel espesso indica a necessidade de misturar parte da urina com três partes de água e, no caso de um anel compacto, uma porção de urina é diluída com sete porções de água. Além disso, a diluição continua até que o sedimento característico apareça no 2º ou 3º minuto do teste.

A quantidade de proteína contida é calculada multiplicando 0,033% pelo valor da diluição. Por exemplo, se a urina foi diluída 10 vezes, o anel de corpos proteicos apareceu ao final do 3º minuto de estudo. A porcentagem de inclusão de proteína é calculada da seguinte forma: 0,033 x 10 = 0,33.

Se não houver sedimento, o grau de turbidez é avaliado - traços de turbidez pronunciados, fracos ou quase imperceptíveis.

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Secreção de proteína de Bence Jones

Dependendo do tipo de imunoglobulina secretada, é feita uma distinção entre:

• patologias da cadeia leve (secreção de proteína de Bence Jones);
• glomerulopatia (secreção de outras imunoglobulinas).

Várias combinações de danos renais também são possíveis. Como demonstra a prática, a nefropatia é consequência de patologia linfoproliferativa (mieloma múltiplo, leucemia linfocítica crônica, doença de Waldenstrom, etc.).

Quando liberadas na corrente sanguínea, como todas as proteínas com peso molecular de até 40 kDa, as cadeias leves contornam o filtro renal e, em seguida, se decompõem em oligopeptídeos e aminoácidos através dos lisossomos. O excesso de cadeias leves provoca disfunção da reação de catabolismo e possível liberação de enzimas lisossomais, o que acarreta necrose do tecido tubular. Os corpos proteicos levam à incapacidade de reabsorção e, quando as cadeias leves monoclonais se combinam com a proteína de Tamm-Horsfall, formam-se cilindros proteicos nos túbulos distais.

Proteína de Bence Jones na doença do mieloma

O mieloma múltiplo é uma condição patológica na qual o corpo produz cadeias leves de imunoglobulina em vez de cadeias completas. O diagnóstico e o monitoramento da doença são realizados por meio de exames laboratoriais de urina, que mostram a quantidade de corpos proteicos. A especificação do subtipo de mieloma é baseada na análise do soro sanguíneo. Os sinais clínicos da doença incluem: síndrome da dor óssea, disfunção urinária, hematomas de origem desconhecida e retenção de líquidos no corpo.

A proteína de Bence Jones no mieloma é detectada com base em testes padrão que mostram o conteúdo quantitativo de corpos proteicos e avaliam o grau de dano renal. A identificação da proteína na urina explica o dano ao epitélio com esclerose do estroma renal, que com o tempo resulta em insuficiência renal – uma causa comum de morte por dano ao mieloma (a proteína de Bence Jones obstrui completamente os túbulos, impedindo a micção).

Dados estatísticos indicam que o mieloma é diferenciado em homens com mais de 60 anos, com histórico de predisposição genética, portadores de obesidade e imunossupressão, além de terem sido expostos a substâncias tóxicas e radioativas.

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Determinação da proteína de Bence Jones

Para diferenciar uma proteína específica, é realizado um estudo laboratorial da porção média da urina matinal (é necessário um volume de pelo menos 50 ml). A presença da proteína de Bence-Jones com a determinação do componente quantitativo é possível pelo método de imunofixação. A separação das proteínas ocorre por eletroforese com subsequente imunofixação utilizando soros especiais. Quando a proteína é ligada a anticorpos de cadeias leves e pesadas de imunoglobulinas, formam-se imunocomplexos, que são avaliados por coloração.

Deve-se observar que mesmo a concentração mínima de proteína é detectada devido à reação de precipitação com ácido sulfossalicílico. A proteína de Bence-Jones é determinada pela combinação de urina filtrada (4 ml) com tampão acetato (1 ml). O aquecimento subsequente a 60 °C em banho-maria e a manutenção por 15 minutos com uma amostra positiva produzem um sedimento característico. Este método é considerado o mais confiável. Um ambiente excessivamente ácido ou alcalino e a baixa densidade relativa da urina podem afetar negativamente os resultados da análise.

Métodos de pesquisa nos quais a proteína de Bence-Jones é dissolvida por aquecimento a 100 °C ou precipitada novamente após o resfriamento não são confiáveis, visto que nem todos os elementos proteicos apresentam as características correspondentes. No entanto, o uso de papel indicador é completamente inadequado para a detecção da proteína de Bence-Jones.

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