Microscópio intravital confocal da córnea

A microscopia confocal da córnea é um dos métodos modernos de investigação; permite realizar o monitoramento intravital do estado da córnea com visualização de tecidos no nível celular e microestrutural.

Este método, devido ao design original do microscópio e sua alta resolução, permite a visualização de tecidos corneanos vivos , para medir a espessura de cada uma de suas camadas e avaliar o grau de distúrbios morfológicos.

O objetivo do microscópio confocal da córnea

Caracterizar as alterações morfológicas na córnea, decorrentes de várias doenças inflamatórias e distróficas, bem como das intervenções cirúrgicas e dos efeitos da CR.

Os dados morfológicos são necessários para avaliar a gravidade do processo patológico, a eficácia do tratamento e determinar as táticas de manejo do paciente.

Indicações para o procedimento

• Doenças inflamatórias da córnea ( queratite ).
• Doenças distróficas da córnea ( queratocônio, distrofia de Fuchs, etc.).
• Síndrome de "olho seco".
• Condições após intervenções cirúrgicas na córnea (através do transplante corneano, operações keratorefrativas).
• Condições associadas ao uso de lentes de contato.

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Preparação

Este estudo é possível sem o uso de anestésicos. Uma gota de líquido de imersão é colocada na lente da lente do microscópio confocal. Isso elimina o contato direto da lente com a córnea e minimiza o risco de danos epiteliais.

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Técnica microscopia confocal da córnea

O estudo é realizado em um microscópio confocal ConfoScan 4 (Nider) com um aumento de 500 vezes. O dispositivo permite que você examine a córnea em toda a sua espessura.

O tamanho da zona investigada é de 440 × 330 μm, a espessura da camada de varredura é de 5 μm. Uma lente com uma gota de gel é trazida para a córnea para tocar e ajustar de modo que a espessura da camada de líquido de imersão seja de 2 mm. O design do dispositivo permite que você examine a córnea na zona central e suas áreas paracentrais.

Contra-indicações para o procedimento

A contra-indicação relativa marcou irritação do olho no contexto de um processo inflamatório agudo.

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Desempenho normal

Imagem morfológica normal da córnea

O epitélio anterior consiste em 5-6 camadas de células. A espessura média de todo o epitélio é de aproximadamente 50 μm. De acordo com a estrutura morfológica, as seguintes camadas são distinguidas (de dentro para fora): basal, subulate e superficial.

• A camada mais interna (basal) é representada por pequenas células cilíndricas densas sem núcleo visível. As bordas das células basais são claras, brilhantes.
• A camada do meio consiste em 2-3 camadas de células em forma de espinha (com asas) com invaginações profundas, nas quais são construídas as conseqüências das células vizinhas. Microscópicamente, os limites celulares são bem distinguíveis e os núcleos podem não ser definidos ou ficarem distorcidos.
• A camada superficial do epitélio é representada por uma ou duas camadas de células poligonais com limites claros e uma densidade homogênea. Os núcleos são geralmente mais brilhantes do que o citoplasma, em que também se pode distinguir um anel escuro próximo ao núcleo.

Entre as células da camada superficial distinguem-se entre escuro e leve. O aumento da reflectividade das células epiteliais indica uma diminuição no nível de metabolismo nelas e o início de sua desquamação.

A membrana Bowman é uma estrutura transparente que não reflete a luz, por isso é impossível visualizá-la quando a microscopia confocal é realizada.

O plexo do nervo sub-basico está localizado sob a membrana Bowman. Normalmente, as fibras nervosas parecem tiras brilhantes em paralelo em um fundo escuro, contatando-se. Reflectividade (reflectividade) pode ser desigual no comprimento da fibra.

O estroma da córnea ocupa 80 a 90% da espessura da córnea e consiste de um componente celular e extracelular. Os elementos celulares básicos do estroma são queratócitos; constituem aproximadamente 5% do volume.

Um padrão microscópico típico do estroma inclui vários corpos irregulares irregulares (núcleos de queratócitos) que se encontram na espessura de uma matriz transparente de cinza escuro ou preto. Normalmente, a visualização de estruturas extracelulares é impossível devido à sua transparência. O estroma pode ser dividido condicionalmente em subcamadas: anterior (localizado diretamente sob a membrana Bowman e constitui 10% da espessura do estroma), anterior, média e posterior.

A densidade média dos queratócitos é maior no estroma anterior, gradualmente o número diminui para as camadas posteriores. A densidade das células do estroma anterior é quase o dobro das células do estroma posterior (se a densidade das células do estroma anterior for 100%, então a densidade das células do estroma posterior é de cerca de 53,7%). No estroma anterior, os núcleos de queratócitos possuem forma redonda em forma de feijão e no oval posterior e mais alongados.

Os núcleos de queratócitos podem diferir em brilho. A capacidade diferente de refletir a luz depende do seu estado metabólico. As células mais brilhantes são consideradas como queratócitos ativados ("células de estresse"), cujas atividades visam a manutenção da homeostase interna da córnea. Na norma e no campo de visão, existem células ativadas únicas.

As fibras nervosas no estroma anterior da córnea são visualizadas como bandas homogêneas brilhantes, muitas vezes formando bifurcações.

A membrana decemet é normalmente transparente e não é visualizada por microscopia confocal.

O epitélio posterior é uma monocamada de células planas hexagonais ou poligonais com uma superfície uniformemente leve contra um fundo de fronteiras intercelulares escuras distintas.

O dispositivo oferece a possibilidade de cálculo manual ou automático da densidade celular, da sua área e do coeficiente de variabilidade.

Mudanças patológicas na estrutura da córnea

O ceratocone é caracterizado por mudanças significativas no epitélio anterior e estroma da córnea.

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