Análise microscópica de escarro

O exame microscópico de espécimes de escarro corados nativos e fixos permite um estudo detalhado da sua composição celular e, em certa medida, reflete a natureza do processo patológico nos pulmões e bronquios, sua atividade, para revelar várias formações fibrosas e cristalinas, que também possuem importante significado diagnóstico e, finalmente, flora microbiana do trato respiratório (bacterioscopia).

Ao microscópio use preparações nativas e pintadas de um escarro. Para estudar a flora microbiana (bacterioscopia), os esfregaços de escarro são geralmente corados por Romanovsky-Giemsa, de acordo com Gram, e para a detecção de Mycobacterium tuberculosis, mas Cilu-Nielsen.

Elementos celulares e fibras elásticas

Dos elementos celulares que podem ser detectados no escarro de pacientes com pneumonia, células epiteliais, macrófagos alveolares, leucócitos e eritrócitos são de importância diagnóstica.

Células epiteliais. O epitélio plano da cavidade oral, nasofaringe, dobras vocais e epiglota não é de importância diagnóstica, embora a detecção de um grande número de células do epitélio plano, em regra, indique uma baixa qualidade da amostra de escarro entregue ao laboratório e contendo uma importante mistura de saliva.

Em pacientes com pneumonia, o escarro é considerado adequado para investigação se, com uma microscopia com um pequeno aumento, o número de células epiteliais não exceda 10 no campo de visão. Um número maior de células epiteliais indica uma predominância inaceitável de conteúdo orofaríngeo na amostra biológica.

Os macrófagos alveolares, que em pequenas quantidades também podem ser encontrados em qualquer escarro, são grandes células de origem reticulohistocítica com um núcleo grande de localização excêntrica e abundantes inclusões no citoplasma. Estas inclusões podem consistir em macrófagos absorvidos pelas partículas de poeira mais pequenas (células de poeira), leucócitos e semelhantes. O número de macrófagos alveolares aumenta com processos inflamatórios no parênquima pulmonar e nas vias aéreas, incluindo pneumonia.

Células de epitélio cilíndrico ciliado que revestem a mucosa da laringe, traquéia e brônquios. Parecem células alongadas, ampliadas em uma extremidade, onde o núcleo e os cílios estão localizados. As células do epitélio ciliado cilíndrico são encontradas em qualquer escarro, no entanto seu aumento indica danos à mucosa brônquica e à traqueia (bronquite aguda e crônica, bronquiectasias, traqueíte, laringite).

Os leucócitos em pequenas quantidades (2-5 no campo de visão) são encontrados em qualquer escarro. Quando a inflamação do tecido pulmonar ou mucosa brônquica e traqueia, especialmente quando supuração (gangrena, abscesso pulmonar, bronquiectasias), seu número é significativamente aumentado.

Ao colorir as preparações de escarro de acordo com Romanovsky-Giemsa, é possível diferenciar leucócitos individuais, que às vezes possuem um importante valor diagnóstico. Assim, com inflamação pronunciada do tecido pulmonar ou mucosa brônquica, tanto o número total de leucócitos neutrofílicos quanto o número de suas formas degenerativas com a fragmentação dos núcleos e a destruição do citoplasma aumentam.

Um aumento no número de formas degenerativas de leucócitos é o sinal mais importante da atividade do processo inflamatório e do curso mais grave da doença.

Eritrócitos. Os eritrócitos simples podem ser detectados praticamente e qualquer escarro. Observa-se um aumento significativo quando a permeabilidade vascular é prejudicada em pacientes com pneumonia, com destruição do tecido pulmonar ou brônquico, estagnação em um pequeno círculo de circulação, infarto pulmonar, etc. Em uma grande quantidade de glóbulos vermelhos no escarro são encontrados durante a hemoptise de qualquer gênese.

Fibras elásticas. Um outro elemento de fibras plásticas de escarro que aparecem no escarro quando a destruição do tecido pulmonar (abscesso pulmonar, tuberculose, câncer de pulmão desintegrante, etc.) também deve ser mencionada. As fibras elásticas são apresentadas em escarros sob a forma de filamentos finos de dois contornos, crimpados com divisão dicotômica nas extremidades. O aparecimento de fibras elásticas no escarro em pacientes com pneumonia grave indica a ocorrência de uma das complicações da doença - abscesso do tecido pulmonar. Em alguns casos, na formação do abscesso pulmonar, as fibras elásticas no escarro podem ser detectadas mesmo um pouco mais cedo do que as correspondentes alterações radiográficas.

Muitas vezes, com pneumonia crouposa, tuberculose, actinomicose, bronquite fibrinosa em preparações de escarpo, fibras finas de fibrina podem ser detectadas.

Os sinais de um processo inflamatório ativo nos pulmões são:

1. a natureza do escarro (mucopurulento ou purulento);
2. aumento do número de neutrófilos no escarro, incluindo suas formas degenerativas;
3. um aumento no número de macrófagos alveolares (de clusters únicos de várias células no campo de visão e mais);

A aparência no escarro das fibras elásticas indica a destruição do tecido pulmonar e a formação do abscesso pulmonar.

As conclusões finais sobre a presença eo grau de atividade da inflamação e destruição do tecido pulmonar são formadas somente quando comparadas com o quadro clínico da doença e os resultados de outros métodos laboratoriais e instrumentais de investigação.

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Flora microbiana

A microscopia de esfregaço, corada de acordo com o Gram e o estudo da flora microbiana (bacterioscopia) em uma parte de pacientes com pneumonia permite, tentativamente, estabelecer o agente causal mais provável da infecção pulmonar. Este método simples de diagnóstico exato do patógeno não é suficientemente preciso e deve ser usado apenas em combinação com outros métodos (microbiológicos, imunológicos) de exame de escarro. A microscopia de imersão de esfregaços corados é às vezes muito útil para seleção de emergência e administração de terapia antibiótica adequada. No entanto, deve-se ter em mente a possibilidade de contaminação do conteúdo brônquico da microflora do trato respiratório superior e da cavidade oral, especialmente quando a coleta de escarro está incorreta.

Portanto, o escarro é considerado adequado para investigação posterior (bacterioscopia e exame microbiológico) apenas se satisfizer as seguintes condições:

• A coloração de Gram no escarro revela um grande número de neutrófilos (mais de 25 no campo de visão com uma pequena ampliação do microscópio);
• O número de células epiteliais, mais característico do conteúdo da orofaringe, não excede 10;
• na preparação há uma predominância de microorganismos do mesmo tipo morfológico.

No Gram da expectoração num esfregaço, por vezes, ser suficiente para identificar pneumococos grama, estreptococos, estafilococos e grupo de bactérias gram-negativas -. Klebsiellu, varinha Pfeiffer, E. Coli e outras bactérias gram-positivas Neste caso tornam-se azuis, e Gram - vermelho.

Patógenos bacterianos de pneumonia

Gram-positivo	Gram-negativo
Pneumococcus Streptococcus pneumoniae. Estreptococos Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans. Estafilococos: Staphylococcus aureus, Staphylococcus haemolyticus.	Klebsiella  (Klebsiella pneumoniae) Hemophilus influenzae (Pfeiffer) Haemophilius influenzae Pseudomonas aeruginosa  (Pseudomonas aeruginosa) Legionnella (Legionella Pneumophilia) E. Coli (Escherichia coli)

Pré escarro é a forma mais fácil de verificação patógeno pneumonia e tem um valor definido para a selecção da terapia de antibiótico óptima. Por exemplo, quando a detecção de esfregaços corados por Gram, diplococos grompolozhitelnyh (pneumococos) ou estafilococos, em vez de antibióticos de largo espectro, que aumentam o risco de selecção e propagação de microorganismos aitibiotikorezistentnyh possível atribuir a terapia-alvo, activa contra estafilococos, ou pneumococos. Em outros casos, a detecção da flora dominante nos esfregaços Gram pode indicar pas que causa pneumonia Enterobacteriaceae são gram-negativas (Klebsiella, E. Coli, etc), o que requer uma terapia-alvo correspondente destino.

No entanto, a conclusão tentativa do agente causador probabilidade de infecção pulmonar por microscopia pode ser feito pas única base aumento significativo de bactérias na expectoração, em uma concentração de 10 ⁶ - 10 ⁷  células microbianas / ml ou mais (LL Vishnjakova). As baixas concentrações de microorganismos (<10 ³  m.ks / ml) são características da microflora que a acompanha. Se a concentração de corpos microbianos varia de 10 ⁴  a 10 ⁶  m.ks / ml, isso não exclui o papel etiológico deste microorganismo na ocorrência de infecção pulmonar, mas não prova.

Também deve ser lembrado que patógenos intracelulares "atípicos" (micoplasma,  legionela, clamídia, rickettsia) não mancham Gramm. Nestes casos, a suspeita de ter uma infecção "atípica" pode ocorrer se os esfregaços apresentarem uma dissociação entre um grande número de neutrófilos e um número extremamente pequeno de células microbianas.

Infelizmente, o método de bacterioscopia geralmente é bastante baixo em sensibilidade e especificidade. O valor não preditivo, mesmo para pneumococos bem visualizados, atinge apenas 50%. Isso significa que, na metade dos casos, o método dá resultados falsos positivos. Isto é devido a várias razões, uma das quais é o facto de que cerca de 1/3 dos pacientes antes da hospitalização receberam os antibióticos, o que reduz grandemente a eficácia de escarro. Além disso, mesmo no caso de resultados positivos do estudo, indicando uma concentração suficientemente alta no esfregaço "típicos" patógenos bacterianos (por exemplo, pneumocócica), não pode excluir completamente a presença de co-infecção "atípicos" agentes patogénicos intracelulares (micoplasma, Chlamydia, Legionella).

O método de bacterioscopia de esfregaços, corados por Gram, em alguns casos ajuda a verificar o agente causal da pneumonia, embora geralmente tenha um valor preditivo muito baixo. Os patógenos intracelulares atípicos (micoplasma, legionella, clamídia, rickettsia) não são verificados pelo método de bacterioscopia, uma vez que não mancham Gramm.

Deve-se mencionar a possibilidade de diagnóstico microscópico em pacientes com pneumonia de infecção pulmonar por fungos. O mais relevante para pacientes que recebem tratamento a longo prazo com antibióticos de amplo espectro é a detecção de escarro de Candida albicans na forma de células semelhantes a fermento e micélio ramificado por microscopia de preparações de escarro nativas ou coradas. Eles indicam uma mudança na microflora do conteúdo traqueobrônquico, que ocorre sob a influência do tratamento antibiótico, o que requer uma correção substancial da terapia.

Em alguns casos, em pacientes com pneumonia, é necessário diferenciar a doença pulmonar existente com a tuberculose. Para o efeito, é utilizada a cor do esfregaço de esquisto de acordo com Tsiol-Nielsen, o que, em alguns casos, permite identificar a micobacteria tuberculosa, embora o resultado negativo desse estudo não signifique que o paciente não tenha tuberculose. Ao colher escarro de acordo com Tsil-Nielsen, mycobacterium tuberculosis é de cor vermelha e todos os outros elementos de escarro são azuis. As micobactérias tuberculosas têm aparência de fezes, varas retas ou ligeiramente curvas de diferentes comprimentos com espessamentos separados. Eles estão localizados na preparação em grupos ou individualmente. O valor de diagnóstico é a detecção na preparação de micobactérias e tuberculose única.

Para aumentar a eficácia da detecção microscópica de micobactérias tuberculose, use uma série de métodos adicionais. O mais comum é o chamado método de flotação, em que o escarro homogeneizado é agitado com tolueno, xileno ou gasolina, cujas gotículas aparecem e capturam micobactérias. Após a determinação do escarro, a camada superior é pipetada no slide. Em seguida, a droga é fixada e manchada por Tsilyu-Nielsen. Existem outros métodos de acumulação (eletroforese) e microscopia de bactérias de tuberculose (microscopia de luminescência).

O exame microscópico (análise) do muco permite detectar muco, elementos celulares, formações fibrosas e cristalinas, fungos, bactérias e parasitas.

Células

• Os macrófagos alveolares são células de origem reticulogistocitária. Um grande número de macrófagos no escarro é detectado em processos crônicos e na fase de resolução de processos agudos no sistema broncopulmonar. Os macrófagos alveolares contendo hemosiderina ("células de defeitos cardíacos") são detectados com infarto leve, hemorragia e estagnação em um pequeno círculo de circulação sanguínea. Os macrófagos com gotículas lipídicas são um sinal de processo obstrutivo nos brônquios e bronquíolos.
• As células Xantom (macrófagos gordurosos) são encontradas em abscessos, actinomicose e equinococoses dos pulmões.
• As células do epitélio cilíndrico ciliado são células da mucosa da laringe, traquéia e brônquios; Eles são encontrados em bronquite, traqueíte, asma brônquica, neoplasias malignas dos pulmões.
• O epitélio plano é detectado quando a saliva entra no escarro, não tem significância diagnóstica.
• Leucócitos em uma ou outra quantidade estão presentes em qualquer escarro. Um grande número de neutrófilos são detectados em escarro mucopurulento e purulento. Os eosinófilos são ricos em escarro em asma brônquica, pneumonia eosinofílica, lesões pulmonares de glote e infarto pulmonar. Eosinófilos podem aparecer em escarro para tuberculose e câncer de pulmão. Os linfócitos em grande número são encontrados na tosse convulsa e, mais raramente, na tuberculose.
• Eritrócitos. A detecção de glóbulos vermelhos simples no escarro não é de importância diagnóstica. Se o sangue fresco estiver presente no escarro, os eritrócitos inalterados são determinados, mas se o sangue que esteve no tracto respiratório por um longo tempo se desfolha com escarro, então, os glóbulos vermelhos lixiviados são encontrados.
• As células de tumores malignos são encontradas em neoplasmas malignos.

Fibras

• As fibras elásticas aparecem na decadência do tecido pulmonar, que é acompanhada pela destruição da camada epitelial e pela liberação de fibras elásticas; Eles são encontrados em tuberculose, abscesso, equinococoses, neoplasmas nos pulmões.
• As fibras coronais são detectadas em doenças pulmonares crônicas, como a tuberculose cavernosa.
• As fibras elásticas calcinadas são fibras elásticas impregnadas com sais de cálcio. A detecção deles no escarro é característica da quebra da petrichite tuberculosa.

Espirais, cristais

• As espirais de Kurshman são formadas no estado espástico dos brônquios e a presença de muco neles. Durante um impulso de tosse, o muco viscoso é liberado para o lúmen de um brônquio maior, torcendo em espiral. As espirais de Kurshman aparecem com asma brônquica, bronquite, tumores pulmonares, compressão de brônquios.
• Os cristais de Charcot-Leiden são os produtos da decadência dos eosinófilos. Geralmente aparecem em esporões contendo eosinófilos; são características de asma brônquica, condições alérgicas, infiltrados eosinofílicos nos pulmões, flukes pulmonares.
• Os cristais de colesterol aparecem com abcessos, equinococoses pulmonares, neoplasmas nos pulmões.
• Os cristais de hematoidina são característicos do abcesso e gangrena do pulmão.
• Os drusos de actinomicetos são detectados na actinomicose dos pulmões.
• Elementos de equinococos aparecem com equinococoses dos pulmões.
• Cortiça Dietrich - pedaços de cor cinza amarelada, com um cheiro desagradável. Eles consistem em detritos, bactérias, ácidos graxos, gotículas de gordura. Eles são típicos para um abscesso de pulmão e bronquiectasias.
• O tetrad de Ehrlich consiste em quatro elementos: detritos calcificados, fibras elásticas calcificadas, cristais de colesterol e mycobacterium tuberculosis. Aparece na decadência do foco tuberculoso primário calcificado.

O micélio e as células fúngicas emergentes aparecem em lesões fúngicas do sistema broncopulmonar.

Pneumocystis ocorre com a pneumonia por pneumocystis.

As esférulas de fungos são detectadas na coccidioidomicose dos pulmões.

As larvas de ascarídeos são detectadas com ascariasis.

As larvas do ugrista intestinal são identificadas com a solidiloididíase.

Os ovos do acidente pulmonar são identificados com paragonimosis.

Elementos encontrados no escarro na asma brônquica. Quando a asma brônquica é geralmente separada por uma pequena quantidade de escarro mucoso e viscoso. Macroscopicamente você pode ver a espiral de Kurshman. Quando a pesquisa microscópica é característica da presença de eosinófilos, epitélio cilíndrico, existem cristais de Charcot-Leiden.