Análise ao sangue para deteção de anticorpos contra o vírus Epstein-Barr e PCR: como passar, normas

Por herpes, estamos acostumados a entender erupções cutâneas dolorosas e desagradáveis na face, na região dos lábios, que posteriormente formam crostas marrons. Infelizmente, esta é apenas uma das faces do vírus do herpes, que pode ocorrer em humanos em oito formas. O que normalmente chamamos de herpes é o vírus tipo 1, ou vírus herpes simplex. O vírus tipo 2 causa herpes genital, o tipo 3 causa catapora e herpes zoster, o tipo 4 causa mononucleose infecciosa e várias outras patologias bastante perigosas, etc. Esta lista poderia ser continuada, mas vamos nos concentrar no vírus do herpes tipo 4, também conhecido como vírus Epstein-Barr. Vamos tentar descobrir o que é o vírus do herpes tipo 4, por que ele é perigoso, quando e por que um teste para o vírus Epstein-Barr é realizado e o que os resultados dos exames laboratoriais indicam.

O que é o vírus do herpes tipo 4?

O herpesvírus tipo 4, como uma das variedades de infecção por herpesvírus, foi descrito há 53 anos pelo virologista inglês Michael Epstein. Em seu trabalho no projeto, o professor contou com a colaboração de sua aluna de pós-graduação Yvonne Barr. É a essas pessoas que o vírus deve seu nome. No entanto, 15 anos após sua descoberta, seu nome científico foi alterado para herpesvírus humano 4, e há um ano o vírus passou a ser chamado de gamavírus humano tipo 4.

Mas o que é o vírus Epstein-Barr? Como qualquer outro vírus, o vírion (partícula viral) do herpesvírus tipo 4 consiste em material genético (neste caso, DNA fita dupla) e uma cápsula proteica (capsídeo) que o envolve. Além disso, o vírus é envolto por uma membrana que o ajuda a penetrar facilmente nas células do hospedeiro.

Qualquer vírus é uma forma não celular, que é um fator infeccioso e não pode se desenvolver e se reproduzir fora das células de um organismo vivo. O habitat favorito do vírus do herpes tipo 4 são consideradas as células epiteliais da nasofaringe. Eles também não desdenham os leucócitos, dando preferência a uma de suas variedades, os linfócitos B. São as células B que participam ativamente no fornecimento de defesa imunológica do corpo. Quando em contato com um antígeno, que no nosso caso é o vírus do herpes tipo 4 (ou melhor, seus antígenos), os linfócitos B produzem anticorpos (proteínas de imunoglobulina). Eles podem ser detectados no sangue do paciente por meio da realização de uma análise para o vírus Epstein-Barr (EBV).

O vírus do herpes tipo 4 possui 4 antígenos que aparecem em uma sequência estritamente definida:

• O EA é um antígeno precoce que aparece no estágio inicial da doença, quando as partículas virais estão em fase de síntese (infecção aguda primária ou reativação de um vírus latente quando a imunidade está reduzida),
• O VCA é um antígeno do capsídeo que está contido na capa proteica e também pertence aos precoces, pois clinicamente a doença pode nem se manifestar nesse período,
• MA – antígeno de membrana, aparece quando o vírion já foi formado,
• EBNA – antígeno nuclear (polipeptídico ou nuclear) é um dos antígenos tardios, cujos anticorpos podem ser detectados até mesmo vários meses após a doença e permanecer no sangue por toda a vida.

O vírus do herpes tipo 4 é muito insidioso. Como o vírus é inativo fora de um organismo vivo, ele só pode ser contraído de uma pessoa que seja a fonte da infecção. E não é necessário que ela apresente todos os sintomas da doença; a infecção pode estar latente, disfarçada de fadiga comum. Por exemplo, a síndrome da fadiga crônica está, na maioria dos casos, associada ao vírus Epstein-Barr.

Vírions individuais podem ser encontrados no sangue, saliva, esperma, secreções vaginais e tecidos de vários órgãos. Partículas virais, juntamente com saliva e sangue, podem penetrar em objetos ao nosso redor, onde permanecerão inativas até que, de alguma forma, entrem no corpo humano. Na grande maioria dos casos, a infecção ocorre por gotículas transportadas pelo ar ou por contato (através do beijo). Mas a transmissão intrauterina do vírus da mãe para o feto, a infecção durante uma transfusão de sangue (se o sangue do doador contiver vírions virais) e o contato sexual também são possíveis.

Após entrar no corpo e penetrar nas estruturas celulares, a doença pode levar de 5 a 50 dias para se manifestar. Mas ela pode não se manifestar, prosseguindo de forma latente, como ocorre na maioria dos casos.

Sim, de acordo com pesquisas, cerca de 90% da população adulta já teve uma infecção por herpes associada ao VEB pelo menos uma vez na vida. A maioria das pessoas nem sabe, pois seu corpo é capaz de combater o ataque viral. Mas nem sempre é esse o caso.

Como o vírus Epstein-Barr se manifesta?

Na maioria das vezes, os médicos precisam lidar com os seguintes tipos de infecção por herpesvírus tipo 4 em sua prática:

• Forma crônica (ocorre após a fase aguda da doença, apresenta alguns sintomas gerais de problemas de saúde),
• Forma latente ou oculta (não há sintomas, mas o vírus permanece ativo e é liberado no ambiente),
• Forma lenta (menos comum, os sintomas ocorrem um de cada vez durante um longo período, terminando na morte do paciente).

As pessoas são infectadas pela primeira vez com o vírus Epstein-Barr, principalmente na infância e na adolescência. O pico de incidência ocorre entre os 14 e os 18 anos.

A infecção viral primária tem 3 formas diferentes:

• assintomático (sem manifestações clínicas),
• respiratório (sintomas de infecção respiratória: febre, secreção nasal, fraqueza geral, etc.),
• Mononucleose infecciosa com uma tríade de sintomas principais: febre alta, sinais de dor de garganta com crostas amareladas nas amígdalas, aumento de órgãos como fígado e baço; há aumento do nível de leucócitos e aumento dos gânglios linfáticos.

Existem várias opções para sair da fase aguda da doença:

• recuperação total,
• os sintomas da doença desaparecem, mas o vírus permanece no corpo e se desenvolve, embora não leve mais a alterações perceptíveis nas células (estado de portador),
• não há sintomas da doença, o vírus não sai do corpo, mas também apresenta pouca atividade (forma latente),
• reativação do vírus a partir de uma forma latente,
• curso crônico da infecção (com recidivas da doença, forma ativa crônica, generalizada com danos aos órgãos e sistemas do corpo).

O resultado de uma longa permanência do vírus no corpo pode ser:

• Forma crônica de mononucleose infecciosa.
• Síndrome hematofagocítica: febre estável, diminuição dos componentes sanguíneos (aumento da coagulabilidade), aumento do fígado e do baço, sangramento das mucosas, icterícia (devido à disfunção hepática), aumento dos gânglios linfáticos, sintomas neurológicos.
• Forma latente com desenvolvimento de imunodeficiência secundária: hipertermia por longo período, fraqueza geral, aumento e dor dos gânglios linfáticos, dores musculares e articulares, doenças infecciosas frequentes.
• Desenvolvimento de patologias autoimunes na forma de lúpus eritematoso, artrite reumatoide, etc.
• Manifestações da síndrome da fadiga crônica com deterioração do bem-estar geral e do desempenho.
• Forma generalizada de infecção crônica com danos ao sistema nervoso central, miocárdio cardíaco, rins, fígado e pulmões.
• Desenvolvimento de doenças oncológicas (leucemia linfocítica e linfomas), nas quais se observa um aumento patológico no número de células do sistema linfático. O vírus do herpes tipo 4 não destrói as células portadoras, mas as força a se multiplicarem ativamente, o que resulta na detecção de neoplasias do tecido linfoide.

Como podemos ver, o vírus Epstein-Barr não é tão inofensivo quanto parece à primeira vista, o que significa que não deve ser tratado de forma descuidada. Além disso, o herpesvírus tipo 4 é caracterizado por episódios frequentes de transmissão do vírus e formas latentes, além de várias formas de infecção crônica, nas quais a pessoa permanece como fonte de infecção sem sequer suspeitar.

Nesse caso, a presença de um agente infeccioso no corpo só pode ser determinada por meio de uma análise especial para o vírus Epstein-Barr, cujo biomaterial geralmente é o sangue.

Indicações para o procedimento Teste do vírus Epstein-Barr.

Como a infecção pelo herpesvírus tipo 4 às vezes não é tão fácil de detectar, nem sempre há suspeita. Mas existem certos sinais pelos quais o médico pode suspeitar da presença do vírus no corpo:

• sistema imunológico gravemente enfraquecido (pacientes com infecção pelo HIV e AIDS, pacientes após transplante de órgãos ou quimioterapia estão em risco),
• aumento dos gânglios linfáticos regionais no queixo e na região occipital da cabeça e sua dor, especialmente se isso for observado após uma transfusão de sangue ou transplante de órgão de um doador.
• infecção viral respiratória aguda (ARVI), ocorrendo em um contexto de temperaturas muito altas (38-40 graus),
• o aparecimento de sinais de mononucleose infecciosa, que ocorre mais frequentemente sob a influência do vírus Epstein-Barr.

Mesmo que uma pessoa não apresente os sintomas mencionados acima, um especialista pode suspeitar com base em alguns resultados de exames de rotina (análise geral de sangue e bioquímica), bem como estudos de estado imunológico.

Um hemograma completo para o vírus Epstein-Barr pode mostrar:

• aumento do número de linfócitos,
• baixa hemoglobina, o que indica uma diminuição no nível de glóbulos vermelhos,
• aumento da coagulação sanguínea devido ao grande número de plaquetas,
• o aparecimento de virócitos (linfócitos atípicos semelhantes em estrutura aos monócitos).

Um exame de sangue bioquímico, que fornece informações sobre o estado dos órgãos internos, mostrará alterações no funcionamento do fígado e do baço.

Um imunoensaio para EBV pode mostrar uma alteração no número de linfócitos específicos, uma discrepância no número de imunoglobulinas de diferentes classes (disimunoglobulinemia) e uma deficiência de imunoglobulina G, o que indica um sistema imunológico fraco e sua incapacidade de conter o ataque do vírus.

Esses resultados de análises inespecíficas podem alertar os médicos, mas ainda é impossível dizer exatamente com o que estão lidando. Tudo permanecerá na fase de suposições e diagnóstico preliminar. Na maioria dos casos, os médicos suspeitam de uma forma latente de mononucleose infecciosa, embora outras patologias virais (gripe, hepatite, etc.) possam se manifestar da mesma forma.

Devido à alta prevalência da hepatite tipo 4 e à possibilidade de sua transmissão de mãe para filho, o teste para o vírus Epstein-Barr também será útil no planejamento da gravidez. Se a mãe já teve a infecção, seu corpo desenvolveu anticorpos contra ela. A reinfecção geralmente é excluída devido à formação de uma forte imunidade e, se ocorrer, não terá mais as consequências que são possíveis no primeiro contato com o vírus. A imunidade restringirá a atividade do vírus ao longo da vida, embora o próprio vírus permaneça dentro do corpo, como qualquer um dos vírus do herpes.

Se a gestante contrair o vírus do herpes durante a gravidez, isso pode levar a abortos espontâneos e partos prematuros, ou o vírus afetará negativamente o desenvolvimento intrauterino do bebê.

Um oncologista pode solicitar um teste de EBV se houver suspeita de linfoma de Burkett ou para diagnosticar processos tumorais em pessoas com HIV. Um terapeuta pode usar este teste para diagnosticar infecções por herpes (diagnóstico diferencial para determinar o tipo de vírus). Às vezes, o teste também é usado para avaliar a eficácia do tratamento.

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Preparação

Dependendo do tipo de exame, o biomaterial utilizado pode ser sangue, saliva, urina, escarro, amostra de líquido amniótico, raspado do canal cervical ou da uretra e líquido cefalorraquidiano (LCR). Na maioria das vezes, os médicos recorrem a exames de sangue, considerados os mais informativos.

É claro que alguns fatores podem afetar negativamente a qualidade e a quantidade do biomaterial, por isso vale a pena seguir algumas regras no dia anterior:

• Recomenda-se que todos os exames (especialmente os de sangue) sejam feitos pela manhã, com o estômago vazio. A última refeição deve ser feita no máximo 12 horas antes da coleta de sangue, por isso é melhor beber água no jantar.
• O material mais aceitável para análise do vírus Epstein-Barr é considerado o sangue venoso, e antes de doar sangue de uma veia, é sempre recomendado um repouso de 15 minutos se a pessoa acabou de chegar ao laboratório,
• Para garantir que a coleta de sangue ocorra sem consequências e que os resultados dos testes sejam confiáveis, não é recomendado realizar trabalho físico ativo ou praticar esportes, beber álcool ou fumar nas 12 horas anteriores ao procedimento.
• Os resultados dos exames também podem ser afetados pelos medicamentos que você está tomando. Você deve interromper o uso dos medicamentos pelo menos 2 dias antes do exame. Se isso não for possível, informe o enfermeiro do laboratório sobre os medicamentos que está tomando.
• Durante a gravidez, antes do teste para EBV, um teste para toxoplasmose é realizado para excluir uma reação falso-positiva.
• Se um exame de sangue para o vírus Epstein-Barr for feito em uma criança com menos de 5 anos, meia hora antes do procedimento, a criança deve beber bastante água fervida em porções relativamente pequenas.

Caso outro biomaterial seja levado para análise, você precisa esclarecer com seu médico previamente todas as nuances da preparação para a análise, dependendo do material utilizado.

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Técnica Teste do vírus Epstein-Barr.

Os médicos atribuem um papel importante no diagnóstico do herpes tipo 4 e da mononucleose infecciosa a testes específicos que ajudam a identificar o DNA do vírus ou anticorpos específicos no biomaterial do paciente. Os principais tipos de testes laboratoriais utilizados para detectar o vírus Epstein-Barr no corpo humano incluem o ensaio imunoenzimático (ELISA) e o diagnóstico por PCR. Vamos analisar mais detalhadamente a essência de ambos os métodos e as características de sua implementação.

Ensaio imunoenzimático EBV

ELISA é um estudo (análise) do sangue venoso de pacientes para detecção de anticorpos contra o vírus Epstein-Barr. Como resultado do diagnóstico, imunoglobulinas do tipo IgG ou IgM (há 5 tipos no total) para um dos 3 antígenos do vírus (precoce, capsídeo ou nuclear) são detectadas no sangue de pacientes com VEB.

A análise é realizada em um laboratório imunológico, onde cerca de 10 ml de sangue são coletados da veia do paciente. O biomaterial é então deixado em temperatura ambiente por um quarto de hora, durante o qual o sangue coagula. O coágulo é cuidadosamente separado da parte líquida. O líquido é centrifugado e o soro sanguíneo puro é obtido. Este é submetido a exames mais aprofundados.

A ideia do método surgiu com base em dados de que nosso corpo produz anticorpos específicos para cada tipo de vírus e bactéria que penetram no corpo vindos de fora. O corpo os reconhece como estranhos e os destrói com a ajuda de anticorpos únicos que aderem firmemente ao antígeno.

A essência da análise ELISA baseia-se nesta reação. Anticorpos com marcadores aderidos a eles combinam-se com antígenos. Uma substância é aplicada aos marcadores, alterando a cor da amostra ao reagir com uma enzima específica. Quanto mais "cadeias" houver, mais intensa será a cor do biomaterial.

O imunoensaio enzimático pode ser realizado usando três métodos:

• ELISA direto. O fluido de teste é colocado nos poços e deixado em repouso por cerca de meia hora para que os antígenos possam aderir às paredes dos poços. O líquido com os anticorpos marcados é adicionado aos antígenos sorvidos. Após o tempo necessário (de meia hora a 5 horas), quando os anticorpos forem detectados e se ligarem aos antígenos, o líquido é drenado, os poços são cuidadosamente lavados e a enzima é adicionada a eles. A concentração do vírus em uma unidade de sangue é determinada pelo método de colorização.
• ELISA indireto. Neste método, o soro sanguíneo testado e os anticorpos marcados são adicionados aos antígenos sorvidos na superfície dos poços. Como resultado, são obtidos dois tipos de ligamentos, alguns dos quais marcados. O resultado depende da concentração de antígenos na amostra testada. Quanto mais anticorpos não marcados, menos compostos marcados pela enzima.

Em seguida, um reagente especial é adicionado à composição lavada, que é usado para determinar a atividade enzimática dos complexos antígeno-anticorpo.

• "Sanduíche". Difere do método indireto, pois inicialmente não são os antígenos, mas os anticorpos que são adsorvidos na superfície. A eles é adicionada uma solução contendo os antígenos em estudo. Após a lavagem do suporte, são adicionados anticorpos com marcadores enzimáticos. O excesso de anticorpos é removido novamente e, com peróxido de hidrogênio, obtém-se uma substância colorida, que é estudada por método espectrométrico.

Este tipo de análise permite não só identificar anticorpos específicos e determinar a concentração de antígenos, mas também esclarecer o estágio da doença. A questão é que diferentes antígenos do vírus Epstein-Barr aparecem em diferentes estágios da infecção por herpes, o que significa que os anticorpos contra eles são produzidos em um determinado período da doença.

Assim, os anticorpos IgG contra o antígeno precoce (IgG EA) aparecem no sangue 1 a 2 semanas após a infecção, quando a doença está na fase aguda ou na fase de reativação do vírus. As imunoglobulinas desse tipo desaparecem após 3 a 6 meses. No curso crônico de uma infecção viral, esses anticorpos são especialmente numerosos e, na forma atípica, estão completamente ausentes.

Os anticorpos IgG contra o antígeno do capsídeo (IgG VCA) também aparecem precocemente, durante as primeiras 4 semanas da doença, mas seu maior número é determinado a partir do segundo mês de infecção. Na fase aguda, são encontrados na maioria dos pacientes, mas podem não aparecer em crianças. No curso crônico da doença, especialmente durante os períodos de reativação do vírus, a quantidade de IgG VCA é especialmente alta. Esses anticorpos permanecem no sangue humano para sempre, como o próprio vírus, o que indica a imunidade formada ao agente infeccioso.

Os anticorpos IgM contra o antígeno do capsídeo (IgM VCA) podem aparecer mesmo antes dos primeiros sinais da doença. Sua concentração (títulos) é especialmente alta nas primeiras 6 semanas da doença. Esse tipo de anticorpo é característico de infecção aguda e reativação de infecção crônica. Os IgM VCA desaparecem após 1 a 6 meses.

Anticorpos IgG para o gene nuclear (IgG EBNA) podem indicar que uma pessoa já teve contato direto com uma infecção por herpes. Na fase aguda da doença, são detectados extremamente raramente, geralmente aparecendo durante o período de recuperação (entre o 3º e o 10º mês). Podem ser detectados no sangue vários anos após a infecção.

A detecção de antígenos individuais não fornece um quadro completo da doença, portanto, testes para diferentes anticorpos devem ser realizados em conjunto. Por exemplo, se apenas IgM VCA estiver presente e IgG EBNA não for detectado, trata-se de uma infecção primária.

Infelizmente, o ensaio imunoenzimático frequentemente é insuficiente para detectar infecção primária por herpes ou patologia congênita. Neste último caso, os anticorpos podem não ser detectados. Como teste confirmatório para doença primária, utiliza-se um estudo molecular de sangue ou outro material biológico para o vírus Epstein-Barr.

Análise de PRC para o vírus Epstein-Barr

Esta análise é realizada na fase de infecção primária aguda, caso contrário seu resultado será incorreto.

A essência do método PCR (reação em cadeia polidimensional) é que cada agente infeccioso possui seu próprio conjunto de genes contidos em uma molécula de DNA. O DNA do patógeno está contido no biomaterial coletado para pesquisa em pequenas quantidades (os próprios vírus são microscópicos em tamanho), o que torna muito difícil avaliar a situação. Mas se uma reação específica for realizada, a quantidade de material genético aumentará significativamente, o que permitirá a identificação do patógeno.

Utilizando instrumentos descartáveis, o material é coletado para pesquisa molecular e colocado em um dispositivo especial para análise. O dispositivo é um termostato com um programa específico – um termociclador ou amplificador. O dispositivo executa um ciclo completo de PRC várias dezenas de vezes (cerca de 2 a 3 minutos), com três etapas:

• Desnaturação (a uma temperatura de 95 graus, as fitas de DNA são separadas).
• Recozimento (a uma temperatura de 75 graus, são introduzidos no material em estudo “primers” especialmente preparados para o EBV, que se ligam ao DNA do vírus).
• Extensão ou multiplicação do material genético (uma enzima especial é adicionada à semente a uma temperatura de 72 graus, que recria uma nova cadeia de DNA, dobrando assim a quantidade de material genético).

Se o ciclo completo da reação polidimensional for executado 50 vezes, a quantidade de material aumentará 100 vezes. Isso significa que será muito mais fácil identificar o patógeno.

Teste do vírus Epstein-Barr para uma criança

Como já sabemos, o vírus Epstein-Barr pode causar o desenvolvimento de muitas doenças. Uma vez ingerido, permanece como residente permanente no corpo humano, e somente o trabalho bem coordenado do sistema imunológico o impede de parasitar ativamente o interior das células.

Quase 95% da população adulta mundial vive com o vírus Epstein-Barr, e a maioria deles se familiarizou com o vírus na primeira infância. Alguns o herdaram da mãe, enquanto outros o contraíram de pais e parentes que se aproximaram da criança com beijos, ou por gotículas no ar no jardim de infância ou na escola (doenças infecciosas geralmente adquirem proporções "universais").

Crianças pequenas geralmente tendem a colocar tudo na boca, e a maior quantidade de vírions é encontrada na saliva. E se várias crianças lambem o mesmo brinquedo no jardim de infância enquanto os professores estão ocupados com suas próprias tarefas, não é surpreendente que o vírus se espalhe tão ativamente em grandes grupos de crianças.

O EBV pode ser facilmente considerado uma doença de crianças e jovens, pois na adolescência, metade das crianças já tem o vírus no corpo (e aos 30 anos, cerca de 90% dos adultos). Crianças de diferentes idades adoecem à sua maneira. Até um ano, enquanto a criança não se comunica ativamente com outras pessoas, a probabilidade de adoecer é pequena. Uma criança com mais de um ano, mesmo que não tenha frequentado o jardim de infância, torna-se mais sociável, brinca com os colegas na rua, faz compras com a mãe, etc., e a probabilidade de contrair o vírus aumenta significativamente.

Mas isso não é motivo para trancar a criança entre quatro paredes. Entre 1 e 3 anos de idade, a doença, na grande maioria dos casos, progride sem sintomas, exceto talvez por um leve aumento de temperatura e uma leve coriza, semelhante a um resfriado. Acontece que quanto mais cedo a criança se familiariza com o vírus, mais fácil se torna essa familiarização.

Não é bom que uma criança adoeça sem o aparecimento de anticorpos IgG VCA no sangue, o que pode indicar que a imunidade ao vírus ainda não foi formada, e a reativação do vírus é possível assim que o sistema imunológico enfraquece. O motivo provavelmente é a imperfeição do sistema imunológico de crianças pequenas, que está em processo de formação há vários anos.

A vida escolar oferece ainda mais pré-requisitos para a doença, especialmente na adolescência, quando os jovens praticam ativamente o beijo. Mas em crianças com mais de 3 anos, a doença é menos frequentemente assintomática. Na maioria dos casos, os médicos se deparam com a mononucleose infecciosa com seus sintomas característicos.

Apesar de a patologia poder ter um curso longo (cerca de 2 meses), ela não é tão perigosa e não requer o uso de medicamentos graves. Os médicos prescrevem medicamentos anti-inflamatórios e antivirais; se uma infecção bacteriana se juntar, eles recorrem a antibióticos. A propósito, as penicilinas não são recomendadas neste caso, pois podem provocar o aparecimento de erupções cutâneas.

Não pense que, se uma criança ou adolescente contrair mononucleose infecciosa, isso significa que o vírus Epstein-Barr se instalou em seu corpo. A doença tem outros patógenos menos comuns, como o citomegalovírus (vírus do herpes tipo 5). Para entender com o que estão lidando, os médicos prescrevem um teste para o vírus Epstein-Barr e, se necessário, outros exames laboratoriais.

Também é verdade que a mononucleose infecciosa não é a única manifestação do VEB na infância. Existem outras doenças associadas a esse patógeno, mas em nossa região são raras.

Assim, o linfoma de Burkitt (ao qual o VEB deve sua detecção) é encontrado principalmente em crianças em países africanos, muito raramente nas Américas e ainda mais raramente na Europa (e mesmo assim apenas no contexto da AIDS). Um tumor na mandíbula com danos aos linfonodos, rins e outros órgãos é encontrado em crianças de 3 a 8 anos.

Câncer nasofaríngeo, uma proporção significativa de outros linfomas, leucoplasia pilosa da boca - todas essas são manifestações do EBV em um contexto de imunidade muito reduzida, que ocorre com a infecção pelo HIV e seu estágio posterior, a AIDS.

A imunodeficiência congênita e a adição do vírus Epstein-Barr formam uma mistura perigosa que pode levar ao desenvolvimento da síndrome proliferativa em uma criança. Nesse caso, o aumento do número de linfócitos B leva ao aparecimento de grânulos em muitos órgãos, o que os impede de funcionar normalmente. Esta é uma doença com alta taxa de mortalidade, mas não se desenvolve em um contexto de imunidade normal.

Pode-se dizer que, na infância, o vírus Epstein-Barr é perigoso principalmente em casos de imunodeficiência, devido ao desenvolvimento de diversas complicações. Na maioria dos casos, tudo se limita à mononucleose infecciosa. E embora não exija tratamento especial, os médicos ainda preferem estabelecer a natureza do patógeno, para o qual são prescritos à criança exames de sangue gerais, ensaio imunoenzimático e PCR.

Como a infecção primária ocorre principalmente na infância, é bem possível limitar-se apenas a um hemograma completo e a uma PCR, que são bastante informativos quando a doença é detectada pela primeira vez.

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Desempenho normal

Os resultados da análise de PCR são processados por eletroforese ou utilizando "primers" marcados. Neste último caso, basta adicionar um reagente (cromógeno) e determinar, por coloração, se há vírions na amostra. Um resultado positivo na eletroforese é indicado quando cadeias de DNA de diferentes comprimentos são detectadas na amostra em estudo.

Durante o período de incubação da doença e durante a transmissão assintomática do vírus, a PCR dará um resultado negativo, assim como na ausência absoluta do vírus no organismo. No início do desenvolvimento da infecção primária e em seus estágios iniciais, a PCR em tempo real pode dar resultados positivos e negativos, o que não esclarece a situação de forma alguma.

No entanto, no auge da doença (fase aguda), em seu curso crônico ou reativação do vírus (exacerbação) e no caso de formas atípicas, o teste será positivo. Se uma pessoa estiver doente há muito tempo e o vírus em seu corpo estiver inativo, o teste de PCR dará um resultado negativo, ou seja, realizar esse teste durante esse período também é inadequado, assim como em estágios muito iniciais da doença.

É preciso dizer que resultados precisos desse tipo de pesquisa laboratorial só são possíveis no caso de infecção primária e na ausência de vírions de outros vírus.

Agora, em relação ao ensaio imunoenzimático para o vírus Epstein-Barr, ele tem os mesmos requisitos. A presença de herpesvírus tipos 5 ou 6, toxoplasmose e infecção por HIV no organismo pode distorcer o resultado, assim como uma atitude descuidada na análise ou a má qualidade dos reagentes utilizados. Nesse caso, estudos adicionais podem ser necessários, levando em consideração possíveis patógenos.

Resultados normais de testes, que indicam a ausência do vírus no corpo, são considerados negativos para os quatro testes: IgG EA, IgM VCA, IgG VCA e IgG EBNA. Sim, cada teste é realizado separadamente, pois os antígenos aparecem em diferentes períodos da doença. Às vezes, apenas testes individuais podem ser prescritos, mas na maioria dos casos, todos os quatro testes precisam ser realizados, porém em períodos diferentes da doença.

Por exemplo, durante o período de incubação da doença, bem como na ausência de infecção, nenhum dos quatro tipos de anticorpos é detectado no sangue. Tal resultado não pode ser considerado suficiente, pois não permite diferenciar uma pessoa que adoeceu pela primeira vez de uma pessoa saudável.

No início do desenvolvimento da doença primária, apenas anticorpos IgM VCA aparecem no sangue. Nos estágios iniciais da doença, os anticorpos IgG VCA se juntam a eles.

A fase aguda da infecção primária prossegue com a formação de três tipos de anticorpos: IgG VCA, IgM VCA e IgG EA, com o maior número de anticorpos IgG contra o antígeno do capsídeo detectado. A mesma composição de anticorpos é mantida por seis meses após a fase aguda da doença, mas a quantidade de IgM VCA diminui gradualmente até zero.

Seis meses após a doença, os anticorpos IgG EBNA aparecem no sangue, enquanto as imunoglobulinas IgG EA tornam-se cada vez menos numerosas e as IgM VCA estão completamente ausentes.

Em casos crônicos da doença ou reativação do vírus, podem haver diferentes indicadores. Na maioria das vezes, todos os quatro tipos de anticorpos são encontrados no sangue. Mas pode ser que as imunoglobulinas IgM VCA e IgG EBNA não sejam detectadas.

A complicação da infecção viral por processos tumorais ocorre com a ausência de anticorpos IgM VCA, e as imunoglobulinas IgG EBNA não são detectadas em todos os casos.

Mas o ensaio imunoenzimático determina não apenas a presença de certos anticorpos, mas também sua concentração, o que nos permite avaliar o estágio da patologia e suas possíveis consequências com maior precisão. Não há necessidade de falar sobre números específicos aqui. Afinal, cada laboratório realiza a análise de uma das maneiras possíveis, utilizando reagentes diferentes, portanto, os resultados da análise de diferentes laboratórios podem diferir em formato digital.

O paciente deve receber um formulário com os valores limite (de referência). Se o resultado estiver abaixo do limite, é considerado um indicador normal (negativo). Se o valor determinado estiver acima do valor de referência, tudo indica um resultado positivo, o que significa que o vírus está presente no organismo. O valor determinado indica o estágio da doença e a colonização do organismo com vírions do EBV, ou seja, a gravidade da patologia.

Se o teste ELISA for negativo, significa apenas que a pessoa não teve contato com o VEB no passado. Mas é impossível afirmar com certeza se o vírus está presente no corpo. Um resultado negativo pode ser causado pela incubação do patógeno no corpo e pela presença assintomática do vírus. Às vezes, para garantir que o corpo não esteja infectado pelo vírus, é necessário realizar uma segunda série de testes após algum tempo.

Se o resultado do ELISA para o vírus Epstein-Barr exceder apenas ligeiramente os valores de referência, o resultado é considerado questionável. A causa geralmente é o estágio inicial da doença ou a presença de vírions de outro vírus no organismo. Nesse caso, após 2 semanas, recomenda-se repetir o teste para EBV e, possivelmente, para outros patógenos.

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Quanto à questão de quanto tempo leva para realizar um teste para o vírus Epstein-Barr e quando você pode esperar os resultados, não há dificuldades específicas a serem esperadas. Em um laboratório sério e bem equipado, você não terá que esperar mais de 2 dias após o envio do biomaterial. Em situações que exigem análise urgente, a resposta pode ser obtida mesmo após algumas horas.

O teste para o vírus Epstein-Barr deve ser realizado em um laboratório confiável, onde haja reagentes de alta qualidade e especialistas qualificados. Afinal, o teste custa dinheiro (e não é uma quantia pequena; o teste para um tipo de anticorpo custa cerca de 150-170 UAH), e eu não gostaria de receber um resultado falso e, possivelmente, ter que entrar em contato novamente, mas com um laboratório diferente, para repetir o teste.

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