Marcadores imunohistoquímicos no diagnóstico de lesões pré-cancerosas da mucosa oral e borda vermelha dos lábios

O diagnóstico oportuno e efetivo das lesões neoplásicas da mucosa oral (SIR) e do rebordo labial vermelho (CCG) continua sendo um grave problema de oncostomatologia. O carcinoma de células escamosas da cavidade bucal ocupa o sexto lugar no mundo em freqüência entre os tumores malignos de todas as localizações. Na Federação Russa, a incidência de neoplasias malignas da cavidade oral é de 2-4% do número total de tumores malignos do homem.

Nos últimos anos, a estrutura das doenças da mucosa oral sofreu mudanças significativas, em particular, um aumento na proporção de doenças precancerosas. A este respeito, a detecção não-invasiva eficaz de sinais de malignidade continua a ser uma tarefa urgente de odontologia.

Apesar da aparente simplicidade do indicador de imagem clínica de alterações da mucosa oral e CGC em conexão com localização externa, determinação prcancro nosological, com base apenas na impressão por inspecção e palpação, muitas vezes levar a erros de diagnóstico foram graus de queratinização ou ulceração mesmo elementos markornyh variando A derrota dificulta a diferenciação. Especialmente difícil é o diagnóstico precoce de malignidade, porque seus sinais clínicos aparecem um pouco mais tarde do que a transformação maligna real.

Assim, a pesquisa de V.P. Kharchenko et al. Mostra-se que mais de 2/3 dos pacientes no momento do tratamento na instituição médica e o estabelecimento do diagnóstico têm fases III-IV da doença. Uma das razões para o tratamento tardio é o "borrão" do quadro clínico nos estágios iniciais da doença. Além disso, a necessidade de realizar trabalhos organizacionais e metodológicos e aumentar o nível de conhecimento dos dentistas sobre as manifestações clínicas precoce das doenças precancerosas da mucosa oral foi comprovada. O teste conduzido mostrou que apenas 42,8% dos dentistas diferenciam as manifestações iniciais do câncer bucal, 4,2% dos entrevistados podem realizar corretamente medidas diagnósticas primárias para a detecção de câncer desta localização.

A porcentagem de formas incuráveis de câncer da mucosa oral devido a erros diagnósticos, de acordo com diferentes autores, atinge 58,4-70%. A situação é complicada pelas questões não resolvidas do diagnóstico clínico de precancer, especialmente a dificuldade de diferenciar o início da malignidade, bem como o problema de escolher um método para tratar uma doença pré-tumoral. Não há indicações absolutas e relativas para a biópsia, especialmente nos estágios do tratamento conservador. Até à data, não há um único exemplo na literatura de um critério de diagnóstico do nível clínico ao qual um dentista poderia se referir ao escolher um método apropriado para o tratamento de uma determinada doença pré-tumoral.

Resolução de dificuldades de diagnóstico que a maioria dos autores vê em métodos auxiliares de diagnóstico (citologia, cheilostomatoscopia, biomicroscopia, tomografia de coerência óptica). No entanto, esses métodos são bastante subjetivos, pois possuem apenas a natureza descritiva das mudanças qualitativas nos tecidos afetados. Uma maneira de quantificar mudanças morfológicas é determinar marcadores imuno-histoquímicos.

A introdução na prática moderna de métodos morfológicos modernos de verificação de tumores melhorou significativamente a qualidade do diagnóstico e tratamento de tumores malignos. As possibilidades metodológicas da oncologia molecular moderna expandiram-se, atualmente, com a ajuda da pesquisa imuno-histoquímica, é possível estabelecer não apenas o diagnóstico histológico do tumor, mas também a caracterização morfo-funcional do ponto de vista da agressão e do prognóstico em relação à lesão precancerosa e doença oncológica já desenvolvida.

De acordo com as ideias modernas, a base da transformação maligna das células é a ativação de oncogenes celulares únicos ou múltiplos ou de genes supressores. É observado em 30% dos cânceres de câncer humano e, em muitos casos, pode ser detectado imuno-histoquimicamente. Oncogenes ras p21, HER2 / neu, bcl-2 e genes supressores p53 e Rb em vários tumores foram estudados. Alguns dos oncogenes listados (e genes supressores) são sinais prognósticos e preditivos independentes.

O epitélio da mucosa oral é o locus praedifectionis da formação de tumores cancerosos. Os factores externos (locais de oclusão traumáticas, as arestas de restaurações de design ortopédico insolvente, higiene bucal indivíduo irracional, lesões inflamatórias e destrutivas periodontais), juntamente com factores genéticos (hereditários) podem desempenhar um papel no cancro causando desta localização. No desenvolvimento do carcinoma de células escamosas da mucosa oral, os danos podem estar envolvidos nos mecanismos que controlam os processos de hiperplasia epitelial e metaplasia de células escamosas.

As características morfológicas do epitélio da mucosa oral durante a malignidade estão associadas a uma mudança no conjunto de marcadores de diferenciação (principalmente o fenótipo de citoqueratina da camada epitelial), a expressão de CEA e os marcadores de proliferação de Ki-67.

P53 é um gene supressor de tumor, cujo produto protéico é um fator de transcrição nuclear com muitas funções, incluindo o bloqueio da passagem de células através do ciclo celular e indução da apoptose. A proteína p53 é expressa em todas as células do corpo. Na ausência de danos ao aparelho genético, a proteína p53 está em um estado inativo, e quando o dano do DNA ocorre, o DNA é ativado. A ativação consiste em adquirir a capacidade de se ligar ao DNA e ativar a transcrição de genes que contêm uma seqüência de nucleotídeos na região reguladora, que é denotada pelo elemento de resposta p53. A mutação p53, encontrada em células de cerca de 50% de tumores cancerosos, leva a síntese protéica com a perda de suas funções, mas que é altamente estável e se acumula no núcleo, que é imuno-histoquimicamente expresso em coloração nuclear distinta.

O tipo "selvagem" do gene oncosuppressor de wt-53 e a proteína p53 codificada por ele desempenham um papel central no desenvolvimento da apoptose. Quando o DNA está danificado, ocorre a expressão do gene wt53 e a proteína correspondente. O último bloqueia o ciclo celular na fase G1-S e, assim, inibe a replicação posterior do DNA danificado, que é sintetizado na fase S, e cria condições para a remoção do local danificado e reparação de seu site alterado. Se a reparação ocorrer, a célula continua a dividir e a gerar células saudáveis. No entanto, se a reparação não ocorrer, entende-se outros mecanismos que garantem a destruição dessa célula com DNA danificado (mutagênico), isto é, O programa genético de morte celular está se desenvolvendo - a apoptose.
Nos últimos anos, sugeriu-se que o status p53 pode ser um fator decisivo determinando a sensibilidade de um tumor à quimioterapia e radioterapia. A confirmação desta suposição são numerosos estudos que comprovam que a p53 mutada é um fator de mau prognóstico e ineficácia da terapia adjuvante para várias neoplasias da mucosa oral.

Os marcadores de proliferação também são um valor diagnóstico altamente informativo na predição do curso de tumores malignos. A atividade proliferativa é um fator líder tanto no mecanismo de transformação maligna de células quanto no comportamento biológico de tumores já emergentes. Um marcador promissor da atividade proliferativa é o antígeno Ki-67, que é expresso praticamente em todas as fases do ciclo celular e, consequentemente, reflete a magnitude da associação proliferativa. O gene que codifica Ki-67 está localizado no braço longo do cromossomo 10. Ki-67 refere-se a proteínas reguladoras. A sua aparência coincide com a entrada da célula na mitose, o que torna possível utilizá-la como marcador universal de proliferação na avaliação do crescimento de tumores malignos.

Foram realizados vários estudos que estudam o valor diagnóstico de marcadores imuno-histoquímicos na predição do curso de lesões precancerosas da mucosa oral e na borda vermelha dos lábios. Murti PR et al. Estudou a expressão de p53 com SSRI de taxa fixa vermelha. Quando o método imuno-histoquímico foi determinado, a expressão de p53 não revelou o estado maligno do precancer da mucosa oral. Os autores sugeriram que o pico da sobre-expressão do p53 é próximo ao tempo de transformação do precancer em câncer e não pode ser usado como marcador precoce para predizer a malignidade do precursor da mucosa oral. Outros pesquisadores descobriram que o gene humano TP53 codifica pelo menos 9 diferentes isoformas. Outro membro da família p53, p63, inclui 6 isoformas diferentes e desempenha um papel fundamental no desenvolvimento da mucosa oral, glândulas salivares, dentes e pele. Sugeriu-se que a p63 esteja associada ao desenvolvimento de carcinoma de células escamosas da cabeça e pescoço. No entanto, não foram observadas alterações estatisticamente significativas na expressão de novas isoformas de p53 e p63 no precancer de SSRI em comparação com tecido não modificado. Estudos de De Sousa FA confirmaram o significado prognóstico do marcador p53 na determinação do potencial de transformação maligna do precursor da mucosa oral. Ao mesmo tempo, alguns autores acreditam que o p53 não pode ser usado como um único marcador para prever o desenvolvimento do câncer.

Igualmente promissor plano de detecção imuno-histoquímica de prognóstico é representado na estudado amostras de tecido podoplanina - membrana integral mucoproteína expressa como o inalterado e o endotélio inflamatória e neoplásica de capilares linfáticos alterada. Os investigadores encontraram um podoplanina estatisticamente significativa expressão relação iABCG2 (ATP-ligação G2 subgrupo de proteínas) com o risco de transformao maligna de líquen plano (o risco foi significativamente mais elevada com podoplanina co-express e ABCG2, do que sem podoplanina co-express e ABCG2) e concluíram que podoplanina e ABCG2 pode ser usado como biomarcadores para avaliar o risco de transformação maligna em lesões precancerosas de SAD

Pesquisas de cientistas estrangeiros confirmaram o significado diagnóstico da expressão Fas / FasL como biomarcadores do desenvolvimento do câncer. Fas é a glicoproteína transmembranar de tipo I (sinônimos APO-I, CD95) e induz apoptose na célula após a interação com o ligando Fas (FasL) ou anticorpos monoclonais agonistas contra Fas.

Ao mesmo tempo, sabe-se que o Fas é expresso em praticamente todos os tipos de tecidos. O aumento da expressão de Fas é observado nos rins, fígado, coração e timo. Além disso, este receptor é expresso em muitos tumores, bem como em células infectadas por vírus. O motivo da resistência de diferentes tipos de células à apoptose dependente de Fas pode ser o aumento da produção de Fas solúveis por estas células. O Fas é solúvel e é capaz de inibir a apoptose induzida por anticorpos monoclonais agonistas contra Fas ou FasL.

Assim, a interpretação ambígua dos resultados dos estudos realizados por diferentes autores nos permite concluir que, no estágio atual de desenvolvimento de oncologia molecular, o uso de marcadores imuno-histoquímicos é promissor em combinação com outros métodos de diagnóstico e predição do curso de lesões precancerosas da mucosa oral.

De particular relevância é o problema do ranking de marcadores imuno-histoquímicos para o significado diagnóstico. Acreditamos que, por ordem de importância decrescente, podem ser organizados na seguinte ordem:

1. Marcadores imunohistoquímicos de alto significado diagnóstico: subplanina, ABCG2, bcl-2;
2. Marcadores imuno-histoquímicos de grau médio de significância diagnóstica: Bax, MMP-9;
3. Marcadores imuno-histoquímicos promissores, cujo significado diagnóstico requer estudo adicional: MMP-2, MT1-MMP, Fas / FasL;
4. Os marcadores imuno-histoquímicos, cujo significado diagnóstico para prever o curso das doenças precancerosas não está provado: p53, p63.

Com base na análise dos dados publicados, pode-se concluir que a definição de marcadores imuno-histoquímicos não deve ser considerada como o único método para prever o curso das doenças precancerosas da mucosa oral e detectar o risco de transformação maligna, mas, no entanto, o método possui alto valor diagnóstico quando combinado com outros métodos métodos de previsão do curso das doenças precancerosas.

Pesquisador Sênior Kuznetsova Roza Gilevna. Marcadores imuno-histoquímicos no diagnóstico de lesões precancerosas da mucosa da boca e da borda vermelha dos lábios // Medicina prática. 8 (64) dezembro de 2012 / volume 1

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