Mononucleose infecciosa: anticorpos contra o vírus Epstein-Barr no sangue

A mononucleose infecciosa é uma doença linfoproliferativa sistêmica comum, mais comumente causada pelo vírus Epstein-Barr. Toxoplasma gondii e outros vírus (CMV, vírus da imunodeficiência humana e herpesvírus humano tipo 6, reconhecidos como a causa do exantema repentino) podem causar doenças clinicamente similares. Esses mesmos agentes etiológicos são presumivelmente capazes de causar o desenvolvimento da síndrome da fadiga crônica.

O vírus Epstein-Barr é um vírus do grupo herpes, tem tendência aos linfócitos B, persiste por um longo tempo nas células hospedeiras como uma infecção latente. Está amplamente distribuído em todo o mundo. Por estrutura e tamanho, o vírus Epstein-Barr é indistinguível de outros vírus herpes, mas difere significativamente deles em propriedades antigênicas. O vírus possui um antígeno de membrana (antígeno de membrana MA), um antígeno nuclear (antígeno nucleico de EBNA-Epstein-Barris) e um antígeno de cápside viral (VCA).

A infecção ocorre quando o vírus é transmitido com saliva. O vírus de Epstein-Barr, quando ingerido, infecta o epitélio da faringe, causando inflamação e sinais clínicos típicos da febre do início da mononucleose infecciosa. O vírus é estritamente linfotrópico, unindo o receptor C3a da membrana celular dos linfócitos B, provoca a proliferação de linfócitos B policlonais com aumento correspondente nas tonsilas, linfadenopatia sistêmica e esplenomegalia. Os linfócitos B são transformados (adquirem a capacidade de fissão sem fim) e, na ausência de uma resposta imune celular adequada, este processo pode evoluir para uma síndrome claramente linfática linfática (por exemplo, síndrome linfoproliferativa ligada ao X). Se os fatores de imunidade celular controlarem a replicação do vírus Epstein-Barr no corpo, os sintomas clínicos da mononucleose infecciosa desaparecem gradualmente.

Como outros vírus herpes, o vírus Epstein-Barr pode persistir como uma infecção latente (seu DNA está contido no núcleo de um pequeno número de linfócitos B). A reactivação assintomática episódica da infecção é comum, cerca de 20% dos jovens saudáveis excretam o vírus Epstein-Barr com saliva. Em indivíduos com uma imunidade celular danificado (por exemplo, SIDA, ataxia-telangiectasia, em receptores de transplantes) podem desenvolver uma infecção reactivo clara com leucoplasia pilosa, pneumonite intersticial, ou sob a forma de um linfoma de células B monoclonais. Com o vírus Epstein-Barr, a etiologia do carcinoma nasofaríngeo e do linfoma de Burkitt está ligada.

Uma das manifestações da mononucleose infecciosa é a aparência no sangue periférico de linfócitos atípicos (até 10% do número total de linfócitos). Os linfócitos atípicos são encontrados no sangue desde o início do período de manifestações clínicas de infecção. Seu conteúdo no sangue atinge um pico no final do 2º ou o início da 3ª semana e pode manter-se neste nível até 1,5-2 meses, o desaparecimento completo geralmente ocorre no início do 4º mês desde o início da doença. A presença de linfócitos atípicos é um sinal relativamente insensível de infecção causada pelo vírus Epstein-Barr, mas tem uma especificidade total de cerca de 95%.

A proliferação de linfócitos-B policlonais em infecção causada pelo vírus de Epstein-Barr, gera uma grande variedade de auto-anticorpos no doente, tais como IgM anti-i-(aglutinina a frio), o factor reumatóide, anticorpos antinucleares. A maioria das Igs incomuns que aparecem na mononucleose infecciosa são chamadas de anticorpos heterófilos Paul-Bunnel. Estes anticorpos são classificados como IgM, eles têm uma afinidade para os eritrócitos de carneiro e cavalo, não dirigidos a qualquer antígeno do vírus Epstein-Barr. Os anticorpos heterofílicos são um produto aleatório da proliferação linfoide B (causada pelo vírus Epstein-Barr), eles aparecem na primeira semana de mononucleose infecciosa e desaparecem gradualmente após a recuperação, geralmente não são detectados após 3-6 meses.

À medida que o estágio agudo inicial da infecção se torna latente, os genomas do vírus Epstein-Barr (antígenos únicos) aparecem em grande número em todas as células, e o antígeno nuclear é liberado para o meio ambiente. Em resposta ao antígeno, anticorpos específicos são sintetizados - marcadores valiosos do estágio da doença. Pouco depois da infecção dos linfócitos B, um antígeno precoce (EA) é detectado, uma proteína necessária para a replicação do vírus Epstein-Barr (e não um componente viral estrutural). Para o antígeno precoce no corpo do paciente, os anticorpos das classes IgM e IgG são sintetizados. Juntamente com o vírus completo do vírus Epstein-Barr, aparecem antígenos da cápside viral (VCA) e do antígeno da membrana (MA). À medida que o processo infeccioso diminui, uma pequena porcentagem de linfócitos B infectados com o vírus Epstein-Barr evita a destruição imune e retém o genoma viral de forma latente. O antígeno nuclear (EBNA) do vírus Epstein-Barr é responsável por sua duplicação e sobrevivência.

Testes de laboratório podem detectar anticorpos contra vários antígenos.

A partir dos métodos sorológicos de diagnóstico de mononucleose infecciosa, a reação de Paul-Bunnel (aglutinação) é mais comum, com o objetivo de detectar anticorpos heterófilos no soro. O título de anticorpos heterofílicos 1: 224 e superior no soro do paciente é reconhecido como diagnóstico significativo, confirmando o diagnóstico de mononucleose infecciosa. A aglutinação heterofílica é positiva em 60% dos jovens após 2 semanas e em 90% após 4 semanas após o início das manifestações clínicas da doença. Portanto, vários estudos são necessários para diagnosticar a mononucleose infecciosa: durante a primeira semana da doença (a reação pode ser negativa) e 1-2 semanas depois (a reação pode se tornar positiva). O conteúdo de anticorpos heterofílicos diminui após o término do período agudo do processo infeccioso, mas seu título pode ser determinado dentro de 9 meses após o início dos sintomas clínicos. A reação Paul-Bunnel pode passar do positivo ao negativo, mesmo no contexto de sintomas hematológicos e clínicos residuais no paciente. A sensibilidade do método em adultos é de 98%, a especificidade é de 99%. Em crianças com mononucleose infecciosa antes dos 2 anos de idade, os anticorpos heterofílicos só podem ser detectados em 30% dos pacientes, com idade de 2-4 anos - em 75%, em 4 anos - em mais de 90%. A sensibilidade do método em crianças é inferior a 70%, a especificidade é de 20%. A redução e, em seguida, o re-aumento do título de anticorpos heterofílicos podem ocorrer em resposta a outra infecção (mais frequentemente em infecções virais do trato respiratório superior). A resposta de Paul-Bunnel não é específica para o vírus Epstein-Barr. O título de anticorpos heterofílicos não produz uma reação cruzada e não se correlaciona com anticorpos específicos para o vírus Epstein-Barr, nem se correlaciona com a gravidade do curso da doença. O teste é inútil para diagnosticar a forma crônica de mononucleose infecciosa (positivo em média apenas em 10% dos pacientes).

Os títulos 1:56 ou menos podem ser encontrados em pessoas saudáveis e em pacientes com outras doenças (artrite reumatóide, rubéola). Os resultados dos testes falsos positivos são encontrados muito raramente.

Atualmente, o método de "mancha única" (aglutinação de slide) é usado para determinar anticorpos contra eritrócitos de uma ram, é usado inicialmente como um teste de triagem. Por sensibilidade, é comparável à reação de Paul-Bunnel. Testes de correção falsos positivos podem ser de aproximadamente 2% dos estudos (leucemia, linfoma maligno, malária, rubéola, hepatite viral, carcinoma pancreático) e falso negativo em adultos - em 5-7% dos casos.

Deve notar-se que o espectro de sistemas de teste de diagnóstico produzidos pelas empresas com base na determinação do título de anticorpos é muito amplo, portanto, é necessário focar o título de diagnóstico de anticorpos especificados nas instruções para sistemas de teste.

Se os anticorpos heterófilos não são identificados, e quadro clínico corresponde a mononucleose infecciosa, é necessário examinar o soro de anticorpos específicos de IgM e IgG. Para a detecção de anticorpos específicos para o vírus de Epstein-Barr utilizando métodos de imunofluorescência indirecta (permitir a detecção de anticorpos para antigénios VCA e EA) antialexin-imunofluorescência (detecção de anticorpos contra EA, VCA e antigio EBNA) e IFA.

Anticorpos para o componente D de antigénio EA (anti-EA-D) aparecem mesmo no período latente da infecção primária e desaparecem rapidamente com a recuperação.

Anticorpos para o componente R antigénio EA (anti-EA-R) podem ser detectados 3-4 semanas após as manifestações clínicas da doença. Eles persistem no soro sanguíneo por cerca de um ano, muitas vezes detectados com correntes atípicas ou prolongadas de mononucleose infecciosa. Normalmente, esses anticorpos são encontrados com o linfoma de Burkitt.

Os anticorpos para IgM da classe VCA (IgM anti-VCA) aparecem muito cedo, usualmente para sintomas clínicos, são detectados no início da doença em 100% dos casos. Os títulos elevados ocorrem na 1-6ª semana do início da infecção, começam a diminuir a partir da 3ª semana e geralmente desaparecem após 1 a 6 meses. A IgM anti-VCA está quase sempre presente no soro com infecção ativa, pelo que o método de sua detecção é muito sensível e específico para um episódio agudo de mononucleose infecciosa.

Os anticorpos para a IgG da classe VCA (IgG anti-VCA) podem aparecer cedo (na 1-4ª semana), sua quantidade atinge um pico no 2º mês da doença. No início da doença, eles são encontrados em 100% dos casos. Apenas 20% dos pacientes apresentaram aumento de 4 vezes no título no estudo dos soros pareados. O título diminui na recuperação, mas é encontrado dentro de vários anos após a infecção transferida, portanto, é inútil para o diagnóstico de mononucleose infecciosa. A presença de IgG anti-VCA indica um estado após a infecção e a imunidade.

Os anticorpos para EBNA (anti-EBNA) aparecem mais tarde do que todos, raramente estão presentes na fase aguda da doença. O seu conteúdo aumenta durante o período de recuperação (dentro de 3-12 meses), eles podem persistir no sangue por muitos anos após a doença. A falta de anti-EBNA na presença de IgM anti-VCA e IgM anti-EA indica uma infecção atual. A detecção de anti-EBNA após uma reação anteriormente negativa indica uma infecção existente. Ao usar o método ELISA, é possível detectar simultaneamente a presença de classes anti-EBNA de IgM e IgG. Se a quantidade de IgM anti-EBNA for maior do que a IgG anti-EBNA, uma infecção aguda deve ser considerada, sendo a relação reversa a anterior.

A favor de uma infecção primária aguda, um ou mais dos seguintes sintomas indicam a presença de:

• IgG anti-VCA (detectada antecipadamente, e mais tarde o conteúdo é reduzido);
• Título alto (mais de 1: 320) ou aumento de 4 vezes no título de IgG anti-VCA durante o curso da doença;
• um aumento transitório no título de anti-EA-D (1:10 ou mais);
• IgG anti-VCA precoce sem anti-EBNA, e mais tarde - o surgimento do anti-EBNA.

A infecção aguda ou primária causada pelo vírus Epstein-Barr é excluída se os títulos anti-VCA IgG e anti-EBNA no soro não se alterem quando testados em dinâmica (período agudo e recuperação).

A presença constante de antígeno precoce e IgG anti-VCA em títulos altos indica uma fase crônica da infecção.

A detecção de anticorpos contra o vírus Epstein-Barr é utilizada para diagnosticar a mononucleose infecciosa e as infecções crônicas causadas pelo vírus Epstein-Barr.

Os anticorpos para o vírus de Epstein-Barr podem ser detectadas nas seguintes doenças: imunodeficiência secundária, incluindo a infecção pelo HIV, carcinoma da nasofaringe, do linfoma de Burkitt, a infecção por CMV, sífilis, doença de Lyme, brucelose, e outros.

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