Diagnóstico da doença granulomatosa crónica

Diagnóstico

O diagnóstico da doença granulomatosa crônica baseia-se na avaliação da atividade funcional dos fagócitos. São utilizados os seguintes testes:

1. Teste de redução com nitroazul de tetrazólio (teste NBT). Normalmente, quando os fagócitos absorvem o corante amarelo nitroazul de tetrazólio (NBT), sua atividade metabólica aumenta, enquanto o NBT é oxidado, e os produtos dessa reação adquirem a coloração azul. Se o metabolismo dos fagócitos for interrompido, a intensidade da coloração azul diminui.
2. Quimioluminescência de neutrófilos. A oxidação do substrato é acompanhada por emissão de luz ultravioleta ou fluorescência. A intensidade da emissão pode ser usada para avaliar a atividade funcional dos fagócitos.
3. Avaliação da atividade fagocítica: capacidade dos fagócitos de destruir bactérias catalase-positivas in vitro.
4. Exame genético de pacientes e suas famílias na detecção de distúrbios da atividade funcional dos fagócitos.

Definição de tipos e subtipos de doença granulomatosa crônica

O immunoblotting com anticorpos para todos os quatro componentes da NADPH oxidase é comumente usado para diferenciar os tipos e subtipos de doenças granulomatosas crônicas. Se um dos componentes citosólicos (p47 ^phax ou p67 ^phax ) estiver ausente no blot, isso indica uma mutação no gene correspondente, enquanto se um dos componentes da membrana (gр91 ^phax ou p22 ^phax ) estiver ausente, o outro também não é detectado, uma vez que as subunidades se estabilizam mutuamente para a maturação e expressão completas. Alguns pesquisadores usam citofluxometria com anticorpos anticitocromo p558 para detectar gp91 ^phax /p22 ^phax na superfície de neutrófilos. Em última análise, o diagnóstico é confirmado pela identificação de uma mutação no gene correspondente.

Diagnóstico pré-natal da doença granulomatosa crônica

Antes da disponibilidade das tecnologias genéticas moleculares, o diagnóstico pré-natal da doença granulomatosa crônica era realizado pela mensuração da atividade da NADPH oxidase em neutrófilos fetais e pela coleta de sangue do cordão umbilical por fetoscopia entre 16 e 18 semanas de gestação. A análise de DNA de células do líquido amniótico ou vilosidades coriônicas é atualmente realizada para procurar defeitos genéticos específicos por meio de Southern blotting, reação em cadeia da polimerase e polimorfismo do comprimento do fragmento de restrição, que é mais confiável e permite o diagnóstico precoce na gestação.

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