Agregação de plaquetas com ristocetina (von Willebrand Factor)

Os valores de referência (norma) da atividade do fator von Willebrand são 58-166%.

O fator von Willebrand sintetiza células endoteliais e megacariócitos. É necessário a adesão normal das plaquetas e tem a capacidade de prolongar a meia-vida do fator VIII. O factor VIII de coagulação do plasma - globulina A anti-hemofílica - circula no sangue sob a forma de um complexo de três subunidades, denominado VIII-k (unidade de coagulação), VIII-Ar (o marcador de antígeno principal) e VIII-PV (fator von Willebrand ligado a VIII-Ar ). Acredita-se que o fator de von Willebrand regula a síntese da parte de coagulação da globulina A anti-hemofílica (VIII-k) e participa da hemostasia plaquetária vascular.

A doença de Von Willebrand é uma doença hereditária caracterizada por um aumento na duração do sangramento, uma diminuição da atividade do cofator de ristocetina e uma diminuição na atividade coagulante do fator VIII (em graus variados). As manifestações clínicas da doença são semelhantes às da trombocitopatia. No entanto, em pacientes com uma diminuição significativa na atividade do fator VIII, podem-se observar hematomas e hemartroses.

Com base em estudos de laboratório que permitem determinar a estrutura e a atividade do fator de von Willebrand, as seguintes formas da doença são distinguidas.

• O tipo I (70% de todos os casos) é caracterizado por uma ligeira diminuição no coeficiente de ristocetina (fator von Willebrand) e atividade coagulante (VIII-k) sob a estrutura macromolecular normal do fator von Willebrand.
• Tipo II: a base é o déficit seletivo de polímeros do fator de Willebrand de alto peso molecular devido a distúrbios na estrutura desta proteína.
  • O tipo IIB é devido ao aumento da interação entre o fator de von Willebrand e as plaquetas, e o aumento da depuração dos agregados plaquetários leva à trombocitopenia.
• O tipo III caracteriza-se por um déficit quantitativo grave do fator de von Willebrand, o que leva a uma diminuição clinicamente significativa na atividade do fator VIII (VIII-k).

O conteúdo do fator von Willebrand é determinado nos casos em que o tempo de hemorragia é aumentado, o número de plaquetas está dentro dos valores de referência e não há causas óbvias de disfunção plaquetária. Para avaliar o factor de von Willebrand, a determinação do conteúdo quantitativa de factor de von Willebrand (pesquisa de actividade ristocetina-cofactor), examinado a aglutinação das plaquetas induzida pela ristocetina e estrutura antigénica do factor de von Willebrand ligado ao factor VIII (VIII-vWF).

A determinação da agregação plaquetária com ristocetina no plasma é utilizada para quantificar o fator de von Willebrand. Foi estabelecida uma relação linear entre o grau de agregação ristocetinica e a quantidade de fator de von Willebrand. O método baseia-se na capacidade desse antibiótico (ristocetina) para estimular a interação in vitro do fator de von Willebrand com a glicoproteína Ib de plaquetas. Na maioria dos casos de doença de von Willebrand, há uma violação da agregação de ristocetina com uma resposta normal aos efeitos de ADP, colágeno e adrenalina. A perturbação da ristocetina-agregação também é encontrada na trombotransfisia macrocítica de Bernard-Soulier (ausência de receptores de agregação ristocetinica na membrana plaquetária). Para a diferenciação, é utilizado um teste com adição de plasma normal: com a doença de von Willebrand após a adição de plasma normal, a agregação de ristocetina é normalizada, enquanto na síndrome de Bernard-Soulier isso não acontece.

O estudo também pode ser usado no diagnóstico diferencial de hemofilia A (uma deficiência de fator VIII) e doença de von Willebrand. Na hemofilia, o conteúdo de VIII-k é acentuadamente reduzido e o conteúdo de VIII-PV está dentro do intervalo normal. Clinicamente, essa diferença se manifesta no fato de que a hemofilia causa um hematoma de hemorragia aumentada e, no caso da doença de von Willebrand - um tipo de hematoma petequial.

A aglutinação induzida por ristocetina de plaquetas é reduzida na maioria dos casos de doença de von Willebrand, exceto o tipo IIB.

A estrutura antigênica de vWF relacionada ao fator VIII (VIII-PV) é detectada por vários métodos imunológicos e a distribuição de vWF pelo tamanho das moléculas é determinada por eletroforese em um gel de agarose. Esses testes são usados para estabelecer o tipo de doença de von Willebrand.

O estudo da agregação plaquetária com vários indutores é realizado não só para detectar anormalidades das funções de agregação das plaquetas. Este estudo permite avaliar a eficácia da terapia antiplaquetária, selecionar doses individuais de drogas e realizar o monitoramento de medicamentos.

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