Poxvírus: vírus da varíola humana

A família Poxviridae inclui duas subfamílias: Chordopoxvirinae, que inclui vírus da varíola de vertebrados e Entomopoxvirinae, que une os vírus da varíola de insetos. A subfamília dos vírus da varíola vertebrada, por sua vez, inclui 6 gêneros independentes e vários vírus não classificados. Os representantes de cada gênero possuem antígenos comuns e são capazes de recombinação genética. Os gêneros diferem um do outro na porcentagem de conteúdo e propriedades do DNA, a localização e a forma de estruturas semelhantes ao fio na cova externa do virião, resistência ao éter, propriedades de hemaglutinação e outras características.

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Estrutura Poxvírus: vírus da varíola humana

Representantes do gênero Orthopoxvirus - vírus da varíola, da varíola e vaccinia. O vírus da varíola causa uma infecção particularmente perigosa de uma pessoa, que pelos esforços da comunidade mundial foi eliminada em meados da década de 1970. Século XX. O vírus da varíola é patogênico não apenas para primatas: os casos foram descritos em humanos que são uma reminiscência da varíola no curso da corrente. Dada essa circunstância, é útil ter idéias gerais sobre a microbiologia da varíola.

O representante mais estudado do gênero Orthopoxvirus é o vírus da vacina, que ocorreu a partir do vírus da cowpox ou do vírus da varíola. É adaptado ao corpo humano e durante muito tempo foi usado como a primeira vacina de vírus vivo.

O vírus da vóleola e outros representantes deste gênero são o maior de todos os vírus animais conhecidos. Este é um dos vírus animais mais altamente organizados, abordando a estrutura de algumas estruturas para bactérias. O virião tem a forma de um tijolo com cantos um pouco arredondados e um tamanho de 250-450 nm. Consiste em um núcleo (nucleóide ou núcleo) bem distinguível contendo uma molécula genômica de DNA de cadeia dupla com um peso molecular de 130-200 MD associado a proteínas. Em ambos os lados do nucleóide são estruturas ovais chamadas de corpos protéicos. O núcleo e os corpos laterais são cercados por uma cobertura de superfície distintamente distinta com uma característica estrutura sulcada. A parede do núcleo é constituída por uma membrana interna macia de 5 nm de espessura e uma camada externa de subunidades cilíndricas dispostas regularmente. O vírus possui uma composição química reminiscente de bactérias: contém não só proteína e DNA, mas também gorduras neutras, fosfolípidos, carboidratos.

Os poxvírus são os únicos vírus contendo DNA que se reproduzem no citoplasma da célula hospedeira. O ciclo de reprodução do vírus consiste nos seguintes estágios principais. Após adsorção à superfície de uma célula sensível, o vírus entra no citoplasma por endocitose mediada pelo receptor, e ainda não há um de dois estágios "extracção" do virião, em primeiro lugar sob a acção da protease de membrana exterior celular é destruída, há uma transcrição superearly parcial e síntese de ARNm que codifica a síntese de proteínas é responsável pela remoção adicional. Paralelo a isso, a replicação do vDNA ocorre. As cópias de DNA infantil são transcritas, o mRNA tardio é sintetizado. Em seguida, uma tradução é conduzida, e cerca de 80 proteínas específicas de vírus com um peso molecular de 8 a 240 kD são sintetizadas. Alguns deles (cerca de 30) são proteínas estruturais, o resto são enzimas e antígenos solúveis. Uma peculiaridade da reprodução de poxvírus pode ser considerada a modificação de suas estruturas celulares, que se transformam em "fábricas" especializadas, onde ocorre a maturação gradual de novas partículas de vírus. A progênie do vírus maduro deixa a célula com sua lise ou por brotação. O ciclo de reprodução de vírus da varíola leva cerca de 6-7 horas.

O vírus da varíola possui propriedades hemaglutinantes; A hemaglutinina consiste de três glicoproteínas. Os antígenos mais importantes são: NP-nucleoproteína, comum para toda a família; termolábil (L) e termostável (C), bem como antígenos solúveis.

Os poxvírus resistindo a secagem durante muitos meses à temperatura ambiente são resistentes ao éter, em etanol a 50% à temperatura ambiente são inativados durante 1 hora e em solução de glicerol a 50% a 4 ° C são armazenados por vários anos. Resistente à maioria dos desinfetantes: 1% de fenol ou 2% de formaldeído à temperatura ambiente inativa apenas por 24 horas, 5% de cloramina durante 2 horas.

Um ser humano é suscetível ao vírus da varíola, bem como aos macacos. Quando a infecção experimental no cérebro de camundongos recém nascidos desenvolve uma infecção generalizada que acaba por ser letal; Para ratos adultos, o vírus não é patógeno. Ele se reproduz bem em embriões de pinto quando infectado com a membrana corionellantoica, no amnio, no saco vitelino e na cavidade alantoidea. Na membrana corionalantoica de embriões de pinto de 10 a 12 dias, o vírus da varíola produz pequenas placas brancas; o vírus da vacina causa grandes lesões, com uma cavidade negra no centro causada por necrose. Um sinal diferencial importante do vírus da vóleola é a temperatura máxima da multiplicação de vírus em um embrião de frango a 38,5 ° C.

As culturas de células primárias e transplantáveis derivadas de seres humanos, macacos e outros animais são sensíveis ao vírus da varíola. Na cultura de células de origem tumoral (HeLa, Vero), o vírus da varíola forma pequenos tipos proliferativos de placa, enquanto que quando infectados com o vírus da varíola dos macacos das células Vero, são identificadas placas circulares centradas na lítica. Nas células do rim do embrião de porco, o vírus da varíola pode causar um efeito citopático claro, o que não é o caso quando as células estão infectadas com o vírus da maconha. Nas células HeLa, o vírus da varíola causa degeneração de células arredondadas, enquanto que os vírus da varíola e do cársico causam degeneração com a formação de células multinucleadas.

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Patogênese

As pessoas que se recuperam após a varíola são imunes à vida. A imunidade resistente a longo prazo é formada após a vacinação. 2 basicamente humorais, os anticorpos neutralizadores de vírus aparecem apenas alguns dias após o início da doença, mas não interferem na disseminação progressiva das manifestações da pele: o paciente pode morrer no estágio pustular, possuindo um alto nível de anticorpos no sangue. Os anticorpos que aparecem no 8º-9º dia após a imunização e atingem os títulos máximos após 2-3 semanas também respondem à imunidade artificial criada pela vacinação.

A imunidade celular não desempenha um papel menos importante do que os anticorpos circulantes. Verificou-se que os anticorpos não ocorrem em pessoas com hipogamaglobulinemia de anticorpos, mas se tornam imunes ao vírus da varíola. Esta imunidade celular baseia-se na atividade dos linfócitos citotóxicos T.

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Epidemiologia

A fonte da infecção é uma pessoa doente. A grande maioria dos que não são vacinados contra a varíola ou as pessoas não qualificadas são suscetíveis a essa infecção. A varíola geralmente é transmitida por gotas no ar, mas a infecção não pode ser excluída pelo contato (através de roupas, toalhas, roupa de cama, utensílios domésticos). O paciente é contagioso para os outros durante todo o período de desenvolvimento da erupção cutânea, até o desaparecimento das últimas crostas, mas é mais perigoso nos primeiros 8-10 dias, quando há lesões nas mucosas.

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Sintomas

O portão de entrada da infecção é a mucosa do trato respiratório superior. A multiplicação primária do vírus ocorre no tecido linfóide do anel faríngeo, então, por um curto período de tempo, o vírus penetra no sangue e infecta as células do tecido reticuloendotelial (CMF). O vírus se multiplica, e novamente há viremia, mas mais intensa e prolongada. A ação dermatotrópica do vírus está associada à sua capacidade de penetrar da corrente sangüínea na epiderme, causar a proliferação precoce das células do sublúcido e a degeneração característica das células Malpighianas.

O período de incubação é de 8 a 18 dias. A varíola começa de forma aguda: dores de cabeça, dores musculares, prostração, febre. Após 2-4 dias na mucosa da boca e da pele há uma erupção cutânea característica - todos os elementos quase simultaneamente, estão mais localizados no rosto e nas extremidades. A erupção cutânea passa pelos estágios da mácula, pápulas, vesículas e pústulas, e então uma crosta (casca) é formada, após o que a cicatriz continua a ser uma cicatriz. Com a aparência de uma erupção cutânea, a temperatura diminui e aumenta de novo no estágio das pústulas. Da aparência da erupção cutânea à perda de crosta é de cerca de 3 semanas. Com um curso tão clássico e severo (variola major), a letalidade durante as epidemias pode chegar a 40%: com uma forma mais suave da doença - alastrim (variola menor) - a letalidade não excede 1-2%.

Diagnósticos

O diagnóstico de varíola natural pode ser realizado por métodos virososcópicos, virológicos e sorológicos. O método mais eficaz e mais rápido é a microscopia eletrônica direta do material retirado dos elementos da erupção cutânea até o estágio das pústulas, uma vez que a quantidade de vírus nesta fase é acentuadamente reduzida. Quando microscópio de luz em preparações a partir do conteúdo de vesículas, são encontradas grandes células com corpos de Gvarnieri, que são inclusões citoplasmáticas da forma oval perto do núcleo da célula, geralmente homogêneas e acidófilas, menos granuladas e com contornos irregulares. Tauri Guarnieri são "fábricas" onde o vírus da varíola se multiplica. Em esfregaços preparados a partir do conteúdo de pequenas vesículas e coradas pelo método de M. Morozov, são encontrados viriões de varíola, o corpo de Paschen.

Para o isolamento e identificação de infecção virai utilizando 12-14 dias embriões de pintainhos com um membrana cório-alantóica, onde as formas de vírus finas placas esbranquiçadas, e cultura de células infectadas para a detecção do efeito citopático gemadsorbtsii reacção de endurecimento ou imunofluorescência. Material para infecção - sangue, secreção nasofaríngea, raspagem de elementos de pele da erupção cutânea, crostas, bem como material seccional.

O antígeno específico do vírus da varíola pode ser detectado em cópias de esfregaços de elementos erupções cutâneos e secreção nasofaríngea por imunofluorescência indireta. No material dos elementos da erupção cutânea, o antígeno pode ser determinado por imunodifusão, RSK ou IFM.

Após a primeira semana de doença, é possível detectar anticorpos e hemaglutininas neutralizantes de vírus, anticorpos de ligação ao complemento. A presença de anticorpos de ligação ao complemento é considerada o sinal mais confiável de varíola, uma vez que raramente persistem por mais de 12 meses em pacientes vacinados.

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Tratamento

Para fins de tratamento e prevenção específicos, usa-se metisazona (marborano), uma droga que suprime a reprodução intracelular do vírus da varíola. É especialmente eficaz nos estágios iniciais da doença e no período de incubação.

A história da civilização humana lembra muitas epidemias e pandemias da varíola. Somente na Europa até o final do século XVIII. Da varíola mataram pelo menos 150 milhões de pessoas. Depois de receber a vacina E. Jenner (1796) contra a varíola, iniciou uma luta ativa contra esta doença, o que resultou em sua completa eliminação. A varíola foi erradicada na União Soviética em 1936, mas às custas dos casos importados foi registrada antes de 1960. Em 1958, por iniciativa da delegação da URSS, foi adotada uma resolução na assembléia da OMS para erradicar a varíola em todo o mundo e, em 1967, a OMS aceitou um programa intensificado para erradicar a varíola. A URSS, os EUA e a Suécia prestaram ampla assistência financeira a este programa. A URSS não só prestou assistência a especialistas trabalhando em muitos países endêmicos, como também doou cerca de 1,5 bilhão de doses de vacina contra a varíola. Utilizou-se uma vacina, representada por um vírus da vacina viva, cultivada em um bezerro, depois purificada e seca. Os bons resultados também foram dados pela cultura e vacinas vivas embrionárias (ovovaccina). Para a prevenção e o tratamento de complicações que às vezes ocorrem durante a vacinação, utilizou-se uma imunoglobulina de dador antipoiético (solução de 10% em uma solução fisiológica da fração gama-globulina do sangue de doadores especialmente revacinados contra a varíola) e imunoglobulina humana titulada para o conteúdo de anticorpos anti-inflamatórios.

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