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Mancha do sul
Última revisão: 05.07.2025
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Southern blotting (desenvolvido por E. Southern e R. Davis em 1975) é o principal método atualmente utilizado para identificar genes de uma doença específica. Para isso, o DNA é extraído das células do paciente e tratado com uma ou mais endonucleases de restrição. Os fragmentos resultantes são submetidos à eletroforese, o que permite sua separação por tamanho (fragmentos menores atravessam os poros do gel mais rapidamente). Os fragmentos são então transferidos (reimpressos) para um filtro de nitrocelulose, sobre o qual é aplicada uma sonda radiomarcada. A sonda liga-se apenas à sequência complementar. Em seguida, por meio de autorradiografia, é determinada a posição do fragmento de DNA genômico desejado no eletroferograma.
A hibridização com uma sonda de DNA marcada de preparações de DNA ou RNA aplicadas gota a gota em uma matriz sólida sem restrição preliminar e eletroforese é chamada de hibridização de ponto ou ranhura, dependendo da configuração do ponto de DNA no filtro (redondo ou oblongo, respectivamente).
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