Resistência dos microrganismos aos antibióticos: métodos de determinação

Os antibióticos são uma das maiores conquistas da ciência médica, salvando a vida de dezenas e centenas de milhares de pessoas todos os anos. No entanto, como diz o ditado, até uma mulher idosa pode cometer um erro. O que costumava matar microrganismos patogênicos não funciona mais tão bem quanto antes. Então, qual é a razão: os medicamentos antimicrobianos pioraram ou a culpa é da resistência aos antibióticos?

Determinação da resistência a antibióticos

Os medicamentos antimicrobianos (AMDs), comumente chamados de antibióticos, foram originalmente criados para combater infecções bacterianas. E como diversas doenças podem ser causadas não por um, mas por vários tipos de bactérias, combinados em grupos, foram inicialmente desenvolvidos medicamentos eficazes contra um determinado grupo de agentes infecciosos.

Mas as bactérias, embora as mais simples, são organismos em desenvolvimento ativo, adquirindo cada vez mais novas propriedades ao longo do tempo. O instinto de autopreservação e a capacidade de se adaptar a diversas condições de vida fortalecem os microrganismos patogênicos. Em resposta a uma ameaça à vida, eles começam a desenvolver a capacidade de resistir a ela, secretando um segredo que enfraquece ou neutraliza completamente o efeito da substância ativa dos medicamentos antimicrobianos.

Acontece que antibióticos que antes eram eficazes simplesmente param de exercer sua função. Nesse caso, falamos do desenvolvimento de resistência aos antibióticos. E a questão aqui não está na eficácia da substância ativa do AMP, mas nos mecanismos de desenvolvimento de microrganismos patogênicos, devido aos quais as bactérias se tornam insensíveis aos antibióticos projetados para combatê-las.

Portanto, a resistência aos antibióticos nada mais é do que uma diminuição da suscetibilidade das bactérias aos medicamentos antimicrobianos criados para destruí-las. É por isso que o tratamento com medicamentos aparentemente selecionados corretamente não produz os resultados esperados.

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O problema da resistência aos antibióticos

A falta de efeito da antibioticoterapia, associada à resistência aos antibióticos, faz com que a doença continue a progredir e se torne mais grave, tornando o tratamento ainda mais difícil. Particularmente perigosos são os casos em que a infecção bacteriana afeta órgãos vitais: coração, pulmões, cérebro, rins, etc., pois, neste caso, a demora é como a morte.

O segundo perigo é que algumas doenças podem se tornar crônicas se a antibioticoterapia for insuficiente. Uma pessoa se torna portadora de microrganismos avançados, resistentes a antibióticos de um determinado grupo. Ela se torna uma fonte de infecção, que é inútil combater com métodos antigos.

Tudo isso impulsiona a ciência farmacêutica a inventar novos medicamentos mais eficazes com outras substâncias ativas. Mas o processo volta a andar em círculo com o desenvolvimento de resistência a antibióticos a novos medicamentos da categoria de agentes antimicrobianos.

Se alguém pensa que o problema da resistência aos antibióticos surgiu recentemente, está muito enganado. Este problema é tão antigo quanto o mundo. Bem, talvez não tão antigo, mas ainda assim, já tem 70-75 anos. De acordo com a teoria geralmente aceita, surgiu junto com a introdução dos primeiros antibióticos na prática médica, em algum momento da década de 40 do século XX.

Embora exista um conceito de surgimento anterior do problema da resistência de microrganismos, antes do advento dos antibióticos, esse problema não era particularmente abordado. Afinal, é tão natural que as bactérias, como outros seres vivos, tentassem se adaptar a condições ambientais desfavoráveis, e o fizessem à sua maneira.

O problema da resistência de bactérias patogênicas nos lembrou de si mesmo quando os primeiros antibióticos surgiram. É verdade que a questão não era tão urgente na época. Naquela época, vários grupos de agentes antibacterianos estavam sendo ativamente desenvolvidos, o que se devia, em parte, à situação política desfavorável no mundo e às ações militares, nas quais soldados morriam de ferimentos e sepse apenas porque não podiam receber ajuda eficaz devido à falta de medicamentos necessários. Esses medicamentos simplesmente ainda não existiam.

O maior número de desenvolvimentos ocorreu nas décadas de 50 e 60 do século XX, e seu aprimoramento ocorreu nas duas décadas seguintes. O progresso não parou por aí, mas, desde a década de 80, os desenvolvimentos em relação a agentes antibacterianos diminuíram visivelmente. Seja devido ao alto custo desse empreendimento (o desenvolvimento e o lançamento de um novo medicamento hoje chegam à casa dos 800 milhões de dólares), seja à banal falta de novas ideias sobre substâncias ativas "de mentalidade militante" para medicamentos inovadores, o problema da resistência a antibióticos está atingindo um novo patamar assustador.

Ao desenvolver PAMs promissores e criar novos grupos desses medicamentos, os cientistas esperavam derrotar vários tipos de infecções bacterianas. Mas as coisas não foram tão simples assim, "graças" à resistência a antibióticos, que se desenvolve rapidamente em certas cepas de bactérias. O entusiasmo está diminuindo gradualmente, mas o problema permanece sem solução por muito tempo.

Ainda não está claro como os microrganismos podem desenvolver resistência a medicamentos que supostamente os matam. Precisamos entender que a "morte" de bactérias ocorre apenas quando o medicamento é usado conforme o esperado. Mas o que realmente temos?

Causas da resistência aos antibióticos

Chegamos aqui à questão principal: quem é o culpado pelo fato de as bactérias, quando expostas a agentes antibacterianos, não morrerem, mas renascerem, adquirindo novas propriedades que estão longe de ser benéficas para a humanidade? O que provoca tais mudanças nos microrganismos, causadores de muitas doenças contra as quais a humanidade luta há décadas?

É evidente que a verdadeira razão para o desenvolvimento da resistência aos antibióticos é a capacidade dos organismos vivos de sobreviver em diversas condições, adaptando-se a elas de diferentes maneiras. Mas as bactérias não têm como se esquivar de um projétil mortal na forma de um antibiótico, que, em teoria, deveria levá-las à morte. Então, como é possível que elas não apenas sobrevivam, mas também evoluam paralelamente ao aprimoramento das tecnologias farmacêuticas?

É importante entender que, se há um problema (no nosso caso, o desenvolvimento de resistência a antibióticos em microrganismos patogênicos), também existem fatores desencadeantes que criam condições para isso. É exatamente essa a questão que tentaremos resolver agora.

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Fatores no desenvolvimento da resistência aos antibióticos

Quando uma pessoa vai ao médico com problemas de saúde, espera ajuda qualificada de um especialista. Se se tratar de uma infecção respiratória ou outras infecções bacterianas, a tarefa do médico é prescrever um antibiótico eficaz que impeça a progressão da doença e determinar a dosagem necessária para esse fim.

O médico dispõe de uma vasta seleção de medicamentos, mas como determinar qual o medicamento que realmente o ajudará a lidar com a infeção? Por um lado, para justificar a prescrição de um antimicrobiano, é necessário primeiro determinar o tipo de patógeno, de acordo com o conceito etiotrópico de seleção de medicamentos, que é considerado o mais correto. Por outro lado, isso pode levar até 3 dias ou mais, sendo que a condição mais importante para o sucesso do tratamento é a terapêutica atempada nos estágios iniciais da doença.

O médico não tem escolha a não ser agir praticamente aleatoriamente nos primeiros dias após o diagnóstico, a fim de, de alguma forma, retardar a doença e impedir sua disseminação para outros órgãos (abordagem empírica). Ao prescrever tratamento ambulatorial, o médico em exercício pressupõe que o agente causador de uma determinada doença pode ser um tipo específico de bactéria. Essa é a razão da escolha inicial do medicamento. A prescrição pode sofrer alterações dependendo dos resultados da análise do agente causador.

E é bom que a prescrição médica seja confirmada pelos resultados dos exames. Caso contrário, não só se perderá tempo. O fato é que, para o sucesso do tratamento, há outra condição necessária: a desativação completa (na terminologia médica, existe o conceito de "irradiação") dos microrganismos patogênicos. Se isso não acontecer, os micróbios sobreviventes simplesmente "superarão a doença" e desenvolverão uma espécie de imunidade à substância ativa do antimicrobiano que causou sua "doença". Isso é tão natural quanto a produção de anticorpos no corpo humano.

Acontece que, se o antibiótico for escolhido incorretamente ou a dosagem e o regime de administração do medicamento forem ineficazes, os microrganismos patogênicos podem não morrer, mas podem se transformar ou adquirir capacidades anteriormente incomuns. Ao se reproduzirem, essas bactérias formam populações inteiras de cepas resistentes a antibióticos de um grupo específico, ou seja, bactérias resistentes a antibióticos.

Outro fator que afeta negativamente a suscetibilidade de microrganismos patogênicos aos efeitos de medicamentos antibacterianos é o uso de AMP na pecuária e na medicina veterinária. O uso de antibióticos nessas áreas nem sempre se justifica. Além disso, a identificação do patógeno, na maioria dos casos, não é realizada ou é realizada tardiamente, pois os antibióticos são usados principalmente para tratar animais em condições bastante graves, quando o tempo é essencial e não é possível esperar pelos resultados dos testes. E na aldeia, o veterinário nem sempre tem essa oportunidade, então age "às cegas".

Mas isso não seria nada, exceto pelo fato de haver outro grande problema: a mentalidade humana, em que cada um é seu próprio médico. Além disso, o desenvolvimento da tecnologia da informação e a possibilidade de comprar a maioria dos antibióticos sem receita médica só agravam esse problema. E se considerarmos que temos mais médicos autodidatas sem qualificação do que aqueles que seguem rigorosamente as ordens e recomendações médicas, o problema está se tornando global.

Em nosso país, a situação é agravada pelo fato de a maioria das pessoas permanecer financeiramente insolvente. Elas não têm a oportunidade de comprar medicamentos de nova geração, eficazes, porém caros. Nesse caso, substituem a receita médica por análogos antigos mais baratos ou medicamentos recomendados por seus melhores amigos ou amigos oniscientes.

"Ajudou-me e ajudará você!" — é possível argumentar contra isso se as palavras vierem dos lábios de um vizinho sábio, com vasta experiência de vida e que passou pela guerra? E poucas pessoas pensam que, graças a pessoas cultas e crédulas como nós, os microrganismos patogênicos se adaptaram há muito tempo para sobreviver sob a influência de medicamentos recomendados no passado. E o que ajudou o avô há 50 anos pode se mostrar ineficaz em nossos dias.

E o que dizer da publicidade e do desejo inexplicável de algumas pessoas de experimentar inovações em si mesmas assim que surge uma doença com sintomas adequados? E por que tantos médicos, se existem medicamentos tão maravilhosos que aprendemos em jornais, telas de TV e páginas da internet? Só o texto sobre automedicação se tornou tão chato para todos que agora poucas pessoas prestam atenção a ele. E em vão!

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Mecanismos de resistência a antibióticos

A resistência aos antibióticos tornou-se recentemente o principal problema na indústria farmacêutica, que desenvolve medicamentos antimicrobianos. A questão é que ela é característica de quase todos os tipos conhecidos de bactérias, razão pela qual a antibioticoterapia está se tornando cada vez menos eficaz. Patógenos comuns como estafilococos, E. coli, Pseudomonas aeruginosa e Proteus possuem cepas resistentes que são mais comuns do que seus ancestrais, que são suscetíveis a antibióticos.

A resistência a diferentes grupos de antibióticos, e mesmo a medicamentos individuais, desenvolve-se de forma diferente. As boas e velhas penicilinas e tetraciclinas, bem como os desenvolvimentos mais recentes na forma de cefalosporinas e aminoglicosídeos, caracterizam-se por um desenvolvimento lento de resistência aos antibióticos, e seu efeito terapêutico diminui paralelamente. O mesmo não se pode dizer desses medicamentos, cujos ingredientes ativos são estreptomicina, eritromicina, rimfampicina e lincomicina. A resistência a esses medicamentos desenvolve-se rapidamente, o que obriga a alterar a prescrição mesmo durante o tratamento, sem aguardar o seu término. O mesmo se aplica à oleandomicina e à fusidina.

Tudo isso nos leva a supor que os mecanismos de desenvolvimento de resistência a antibióticos diferem significativamente entre si. Vamos tentar descobrir quais propriedades das bactérias (naturais ou adquiridas) impedem que os antibióticos produzam sua irradiação, como originalmente pretendido.

Primeiro, vamos definir que a resistência em bactérias pode ser natural (funções protetoras inicialmente atribuídas a elas) e adquirida, como discutimos acima. Até agora, falamos principalmente sobre a verdadeira resistência aos antibióticos, associada às características do microrganismo, e não à escolha ou prescrição incorreta do medicamento (neste caso, estamos falando de falsa resistência aos antibióticos).

Cada ser vivo, incluindo os protozoários, possui uma estrutura única e algumas propriedades que lhe permitem sobreviver. Tudo isso é geneticamente determinado e transmitido de geração em geração. A resistência natural a substâncias ativas específicas de antibióticos também é geneticamente determinada. Além disso, em diferentes tipos de bactérias, a resistência é direcionada a um determinado tipo de medicamento, razão pela qual são desenvolvidos vários grupos de antibióticos que afetam um tipo específico de bactéria.

Os fatores que determinam a resistência natural podem ser diferentes. Por exemplo, a estrutura da camada proteica de um microrganismo pode ser tal que um antibiótico seja incapaz de lidar com ela. Mas os antibióticos só podem afetar a molécula de proteína, destruindo-a e causando a morte do microrganismo. O desenvolvimento de antibióticos eficazes envolve levar em consideração a estrutura das proteínas da bactéria contra a qual o medicamento se destina.

Por exemplo, a resistência dos estafilococos aos aminoglicosídeos se deve ao fato de que estes últimos não conseguem penetrar a membrana microbiana.

Toda a superfície do micróbio é coberta por receptores, aos quais certos tipos de AMPs se ligam. Um pequeno número de receptores adequados ou sua ausência completa levam à ausência de ligação e, portanto, ao efeito antibacteriano.

Entre outros receptores, existem aqueles que servem como uma espécie de farol para o antibiótico, sinalizando a localização da bactéria. A ausência desses receptores permite que o microrganismo se esconda do perigo na forma de AMP, que é uma espécie de disfarce.

Alguns microrganismos têm a capacidade natural de remover ativamente o AMP da célula. Essa capacidade é chamada de efluxo e caracteriza a resistência da Pseudomonas aeruginosa aos carbapenêmicos.

Mecanismo bioquímico de resistência a antibióticos

Além dos mecanismos naturais acima mencionados para o desenvolvimento de resistência aos antibióticos, há outro que está associado não à estrutura da célula bacteriana, mas à sua funcionalidade.

O fato é que as bactérias no corpo podem produzir enzimas que podem ter um efeito negativo nas moléculas da substância ativa do AMP e reduzir sua eficácia. As bactérias também sofrem ao interagir com esse antibiótico; seu efeito é visivelmente enfraquecido, o que cria a aparência de recuperação da infecção. No entanto, o paciente permanece portador da infecção bacteriana por algum tempo após a chamada "recuperação".

Neste caso, estamos lidando com uma modificação do antibiótico, que o torna inativo contra esse tipo de bactéria. As enzimas produzidas por diferentes tipos de bactérias podem ser diferentes. Os estafilococos são caracterizados pela síntese de beta-lactamase, que provoca a quebra do anel lactêmico dos antibióticos penicilina. A produção de acetiltransferase pode explicar a resistência de bactérias gram-negativas ao cloranfenicol, etc.

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Resistência adquirida a antibióticos

As bactérias, assim como outros organismos, não são imunes à evolução. Em resposta a ações "militares" contra elas, os microrganismos podem alterar sua estrutura ou começar a sintetizar uma quantidade de substância enzimática capaz não apenas de reduzir a eficácia do medicamento, mas também de destruí-lo completamente. Por exemplo, a produção ativa de alanina transferase torna a "Cicloserina" ineficaz contra bactérias que a produzem em grandes quantidades.

A resistência aos antibióticos também pode se desenvolver como resultado da modificação da estrutura celular de uma proteína que também é seu receptor, à qual o AMP deve se ligar. Ou seja, esse tipo de proteína pode estar ausente do cromossomo bacteriano ou alterar suas propriedades, impossibilitando a conexão entre a bactéria e o antibiótico. Por exemplo, a perda ou modificação da proteína de ligação à penicilina causa insensibilidade às penicilinas e cefalosporinas.

Como resultado do desenvolvimento e ativação de funções protetoras em bactérias previamente expostas à ação destrutiva de um determinado tipo de antibiótico, a permeabilidade da membrana celular se altera. Isso pode ser alcançado pela redução dos canais pelos quais as substâncias ativas do AMP podem penetrar na célula. É essa propriedade que causa a insensibilidade dos estreptococos aos antibióticos beta-lactâmicos.

Os antibióticos são capazes de influenciar o metabolismo celular das bactérias. Em resposta a isso, alguns microrganismos aprenderam a prescindir das reações químicas afetadas pelos antibióticos, o que também é um mecanismo distinto para o desenvolvimento de resistência aos antibióticos, que requer monitoramento constante.

Às vezes, as bactérias recorrem a um truque específico. Ao se ligarem a uma substância densa, elas se unem em comunidades chamadas biofilmes. Dentro da comunidade, elas são menos sensíveis a antibióticos e podem tolerar facilmente doses letais para uma única bactéria que viva fora do "coletivo".

Outra opção é a unificação dos microrganismos em grupos na superfície de um meio semilíquido. Mesmo após a divisão celular, parte da "família" bacteriana permanece dentro do "grupo", não sendo afetada pelos antibióticos.

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Genes de resistência a antibióticos

Existem conceitos de resistência genética e não genética a medicamentos. Lidamos com esta última quando consideramos bactérias com metabolismo inativo, pouco propensas à reprodução em condições normais. Essas bactérias podem desenvolver resistência a antibióticos a certos tipos de medicamentos; no entanto, essa capacidade não é transmitida aos seus descendentes, uma vez que não é geneticamente determinada.

Isso é típico dos microrganismos patogênicos que causam a tuberculose. Uma pessoa pode se infectar e não suspeitar da doença por muitos anos, até que sua imunidade falhe por algum motivo. Isso impulsiona a reprodução das micobactérias e a progressão da doença. Mas os mesmos medicamentos são usados para tratar a tuberculose, porque a bactéria que a origina permanece sensível a eles.

O mesmo se aplica à perda de proteínas na parede celular dos microrganismos. Recordemos, novamente, as bactérias sensíveis à penicilina. As penicilinas inibem a síntese da proteína utilizada na construção da membrana celular. Sob a influência de AMPs do tipo penicilina, os microrganismos podem perder a parede celular, cujo material de construção é a proteína de ligação à penicilina. Essas bactérias tornam-se resistentes às penicilinas e cefalosporinas, que agora não têm mais com que se ligar. Este é um fenômeno temporário, não associado à mutação genética e à transmissão do gene modificado por herança. Com o surgimento da parede celular característica de populações anteriores, a resistência a antibióticos nessas bactérias desaparece.

Diz-se que a resistência genética a antibióticos ocorre quando alterações nas células e no metabolismo dentro delas ocorrem em nível genético. Mutações genéticas podem causar alterações na estrutura da membrana celular, provocar a produção de enzimas que protegem as bactérias dos antibióticos e também alterar o número e as propriedades dos receptores celulares bacterianos.

Existem duas formas de desenvolvimento dos eventos: cromossômica e extracromossômica. Se ocorrer uma mutação genética na região cromossômica responsável pela sensibilidade aos antibióticos, ela é chamada de resistência cromossômica aos antibióticos. Essa mutação em si ocorre extremamente raramente, geralmente causada pela ação de medicamentos, mas, novamente, nem sempre. É muito difícil controlar esse processo.

Mutações cromossômicas podem ser transmitidas de geração para geração, formando gradualmente certas cepas (variedades) de bactérias resistentes a um antibiótico específico.

A resistência extracromossômica a antibióticos é causada por elementos genéticos que existem fora dos cromossomos e são chamados plasmídeos. Esses elementos contêm genes responsáveis pela produção de enzimas e pela permeabilidade da parede bacteriana.

A resistência a antibióticos é frequentemente o resultado da transferência horizontal de genes, quando uma bactéria transmite alguns genes para outras que não são suas descendentes. Às vezes, porém, mutações pontuais não relacionadas podem ser observadas no genoma do patógeno (tamanho 1 em 108 por processo de cópia do DNA da célula-mãe, observado durante a replicação cromossômica).

Assim, no outono de 2015, cientistas chineses descreveram o gene MCR-1, encontrado em carne suína e intestinos de suínos. A peculiaridade desse gene é a possibilidade de sua transmissão para outros organismos. Depois de algum tempo, o mesmo gene foi encontrado não apenas na China, mas também em outros países (EUA, Inglaterra, Malásia e países europeus).

Genes de resistência a antibióticos podem estimular a produção de enzimas que não eram produzidas anteriormente no corpo de bactérias. Por exemplo, a enzima NDM-1 (metalo-beta-lactamase 1), descoberta na bactéria Klebsiella pneumoniae em 2008, foi descoberta pela primeira vez em bactérias da Índia. Mas, nos anos seguintes, a enzima que confere resistência a antibióticos à maioria dos AMPs também foi encontrada em microrganismos de outros países (Grã-Bretanha, Paquistão, EUA, Japão e Canadá).

Microrganismos patogênicos podem apresentar resistência tanto a certos medicamentos ou grupos de antibióticos quanto a diferentes grupos de medicamentos. Existe a chamada resistência cruzada a antibióticos, quando os microrganismos se tornam insensíveis a medicamentos com estrutura química ou mecanismo de ação semelhante sobre bactérias.

Resistência dos estafilococos aos antibióticos

A infecção estafilocócica é considerada uma das mais comuns entre as infecções adquiridas na comunidade. No entanto, mesmo em ambientes hospitalares, cerca de 45 cepas diferentes de estafilococos podem ser encontradas na superfície de diversos objetos. Isso significa que o combate a essa infecção é quase a principal tarefa dos profissionais de saúde.

A dificuldade dessa tarefa reside no fato de que a maioria das cepas dos estafilococos mais patogênicos, Staphylococcus epidermidis e Staphylococcus aureus, são resistentes a muitos tipos de antibióticos. E o número dessas cepas cresce a cada ano.

A capacidade dos estafilococos de sofrer múltiplas mutações genéticas, dependendo do seu habitat, torna-os virtualmente invulneráveis. As mutações são transmitidas aos seus descendentes, e gerações inteiras de agentes infecciosos resistentes a antimicrobianos do gênero estafilococos surgem em curtos períodos de tempo.

O maior problema são as cepas resistentes à meticilina, que são resistentes não apenas aos beta-lactâmicos (antibióticos β-lactâmicos: certos subgrupos de penicilinas, cefalosporinas, carbapenêmicos e monobactamas), mas também a outros tipos de AMP: tetraciclinas, macrolídeos, lincosamidas, aminoglicosídeos, fluoroquinolonas, cloranfenicol.

Por muito tempo, a infecção só podia ser destruída com a ajuda de glicopeptídeos. Atualmente, o problema da resistência a antibióticos dessas cepas de estafilococos é resolvido por um novo tipo de AMP - as oxazolidinonas, cujo representante proeminente é a linezolida.

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Métodos para determinar a resistência aos antibióticos

Ao criar novos medicamentos antibacterianos, é muito importante definir claramente suas propriedades: como agem e contra quais bactérias são eficazes. Isso só pode ser determinado por meio de pesquisas laboratoriais.

O teste de resistência a antibióticos pode ser realizado usando uma variedade de métodos, os mais populares dos quais são:

• O método do disco, ou difusão de AMP em ágar segundo Kirby-Bayer
• Método de diluição serial
• Identificação genética de mutações que causam resistência a medicamentos.

O primeiro método é atualmente considerado o mais comum devido ao seu baixo custo e facilidade de implementação. A essência do método do disco é que as cepas bacterianas isoladas como resultado da pesquisa são colocadas em um meio nutriente de densidade suficiente e cobertas com discos de papel embebidos em uma solução de AMP. A concentração do antibiótico nos discos é diferente, portanto, quando o fármaco se difunde no ambiente bacteriano, um gradiente de concentração pode ser observado. O tamanho da zona sem crescimento de microrganismos pode ser usado para avaliar a atividade do fármaco e calcular a dosagem efetiva.

Uma variante do método do disco é o E-teste. Neste caso, em vez de discos, são utilizadas placas de polímero, nas quais é aplicada uma determinada concentração de antibiótico.

As desvantagens desses métodos incluem a imprecisão dos cálculos associados à dependência do gradiente de concentração em várias condições (densidade do meio, temperatura, acidez, teor de cálcio e magnésio, etc.).

O método de diluição em série baseia-se na criação de diversas variantes de um meio líquido ou sólido contendo diferentes concentrações do fármaco em estudo. Cada variante é preenchida com uma determinada quantidade do material bacteriano em estudo. Ao final do período de incubação, avalia-se o crescimento bacteriano ou sua ausência. Este método permite determinar a dose mínima eficaz do fármaco.

O método pode ser simplificado tomando como amostra apenas 2 meios, cuja concentração será a mais próxima possível do mínimo necessário para inativar as bactérias.

O método de diluição em série é considerado o padrão ouro para determinar a resistência a antibióticos. No entanto, devido ao seu alto custo e à complexidade do trabalho, nem sempre é aplicável na farmacologia doméstica.

O método de identificação de mutações fornece informações sobre a presença de genes modificados em uma determinada cepa bacteriana que contribuem para o desenvolvimento de resistência a antibióticos a medicamentos específicos e, nesse sentido, sistematizar situações emergentes levando em consideração a similaridade das manifestações fenotípicas.

Este método é caracterizado pelo alto custo dos sistemas de teste para sua implementação; entretanto, seu valor para prever mutações genéticas em bactérias é inegável.

Por mais eficazes que sejam os métodos acima para estudar a resistência a antibióticos, eles não conseguem refletir completamente o quadro que se desenvolverá em um organismo vivo. E se também levarmos em conta o fato de que o corpo de cada pessoa é individual e os processos de distribuição e metabolismo dos medicamentos podem ocorrer de forma diferente nele, o quadro experimental pode estar muito distante do real.

Maneiras de superar a resistência aos antibióticos

Por melhor que seja um medicamento, dada a nossa postura atual em relação ao tratamento, não podemos descartar a possibilidade de que, em algum momento, a sensibilidade dos microrganismos patogênicos a ele possa mudar. A criação de novos medicamentos com os mesmos princípios ativos também não resolve o problema da resistência aos antibióticos. E a sensibilidade dos microrganismos a novas gerações de medicamentos diminui gradualmente com a frequência de prescrições injustificadas ou incorretas.

Um avanço nesse sentido é a invenção de fármacos combinados, chamados de protegidos. Seu uso se justifica em relação a bactérias que produzem enzimas destrutivas aos antibióticos convencionais. A proteção de antibióticos populares é alcançada pela inclusão de agentes especiais na composição do novo fármaco (por exemplo, inibidores de enzimas perigosas para um determinado tipo de AMP), que interrompem a produção dessas enzimas pelas bactérias e impedem a remoção do fármaco da célula por meio de uma bomba de membrana.

Ácido clavulânico ou sulbactam são comumente usados como inibidores de beta-lactamase. São adicionados a antibióticos beta-lactâmicos, aumentando assim a eficácia destes últimos.

Atualmente, estão sendo desenvolvidos medicamentos que podem afetar não apenas bactérias individuais, mas também aquelas que se uniram em grupos. O combate às bactérias em um biofilme só pode ser realizado após sua destruição e a liberação de organismos previamente ligados entre si por sinais químicos. Em termos da possibilidade de destruir um biofilme, os cientistas estão considerando um tipo de medicamento, como os bacteriófagos.

O combate a outros “grupos” bacterianos é feito transferindo-os para um meio líquido, onde os microrganismos passam a existir separadamente, e agora podem ser combatidos com medicamentos convencionais.

Diante do fenômeno de resistência durante o tratamento com o medicamento, os médicos resolvem o problema prescrevendo diversos medicamentos eficazes contra as bactérias isoladas, mas com diferentes mecanismos de ação na microflora patogênica. Por exemplo, utilizam simultaneamente medicamentos com ação bactericida e bacteriostática ou substituem um medicamento por outro de um grupo diferente.

Prevenção da resistência aos antibióticos

O principal objetivo da antibioticoterapia é a destruição completa da população de bactérias patogênicas no organismo. Essa tarefa só pode ser resolvida com a prescrição de medicamentos antimicrobianos eficazes.

A eficácia do medicamento é determinada pelo seu espectro de atividade (se o patógeno identificado está incluído nesse espectro), pela capacidade de superar os mecanismos de resistência aos antibióticos e pelo regime de dosagem idealmente selecionado que elimina a microflora patogênica. Além disso, ao prescrever um medicamento, deve-se levar em consideração a probabilidade de efeitos colaterais e a disponibilidade de tratamento para cada paciente.

Não é possível levar todos esses aspectos em consideração em uma abordagem empírica para o tratamento de infecções bacterianas. É necessário alto profissionalismo do médico e monitoramento constante de informações sobre infecções e medicamentos eficazes para combatê-las, para que a prescrição não seja injustificada e não leve ao desenvolvimento de resistência aos antibióticos.

A criação de centros médicos equipados com equipamentos de alta tecnologia possibilita a prática do tratamento etiotrópico, quando o patógeno é identificado pela primeira vez em um período menor de tempo e, em seguida, um medicamento eficaz é prescrito.

A prevenção da resistência aos antibióticos também pode ser considerada um controle sobre a prescrição de medicamentos. Por exemplo, no caso da SARS, a prescrição de antibióticos não se justifica de forma alguma, mas contribui para o desenvolvimento de resistência a antibióticos em microrganismos que estão em estado "adormecido" por enquanto. A questão é que os antibióticos podem provocar um enfraquecimento do sistema imunológico, o que, por sua vez, causará a proliferação de uma infecção bacteriana oculta dentro do corpo ou que o invada de fora.

É muito importante que os medicamentos prescritos correspondam ao objetivo a ser alcançado. Mesmo um medicamento prescrito para fins preventivos deve ter todas as propriedades necessárias para destruir a microflora patogênica. A escolha aleatória de um medicamento pode não só não produzir o efeito esperado, como também agravar a situação, desenvolvendo resistência de um determinado tipo de bactéria ao medicamento.

Atenção especial deve ser dada à dosagem. Pequenas doses, ineficazes no combate à infecção, levam novamente ao desenvolvimento de resistência a antibióticos em microrganismos patogênicos. Mas também não se deve exagerar, pois a antibioticoterapia tem grande probabilidade de causar efeitos tóxicos e reações anafiláticas perigosas para a vida do paciente. Principalmente se o tratamento for realizado em regime ambulatorial, sem supervisão médica.

A mídia deve conscientizar as pessoas sobre os perigos da automedicação com antibióticos, bem como sobre o tratamento incompleto, quando as bactérias não morrem, mas apenas se tornam menos ativas com o desenvolvimento de um mecanismo de resistência aos antibióticos. Medicamentos baratos e sem licença, que as empresas farmacêuticas ilegais comercializam como análogos baratos de medicamentos existentes, têm o mesmo efeito.

Uma medida altamente eficaz para prevenir a resistência aos antibióticos é considerada o monitoramento constante dos agentes infecciosos existentes e do desenvolvimento de resistência aos antibióticos neles, não apenas em nível distrital ou regional, mas também em escala nacional (e até global). Infelizmente, só podemos sonhar com isso.

Na Ucrânia, não existe um sistema de controle de infecções propriamente dito. Apenas disposições individuais foram adotadas, uma das quais (em 2007!), referente a hospitais obstétricos, prevê a introdução de vários métodos de monitoramento de infecções hospitalares. Mas, novamente, tudo se resume a questões financeiras, e esses estudos geralmente não são realizados localmente, muito menos por médicos de outras áreas da medicina.

Na Federação Russa, o problema da resistência aos antibióticos foi tratado com maior responsabilidade, e o projeto "Mapa da Resistência Antimicrobiana da Rússia" é prova disso. Grandes organizações como o Instituto de Pesquisa em Quimioterapia Antimicrobiana, a Associação Inter-regional de Microbiologia e Quimioterapia Antimicrobiana, bem como o Centro Científico e Metodológico para Monitoramento da Resistência Antimicrobiana, criado por iniciativa da Agência Federal de Saúde e Desenvolvimento Social, dedicaram-se a pesquisas nessa área, coletando informações e sistematizando-as para o preenchimento do mapa de resistência aos antibióticos.

As informações fornecidas pelo projeto são constantemente atualizadas e estão disponíveis a todos os usuários que precisam de informações sobre questões de resistência a antibióticos e tratamento eficaz de doenças infecciosas.

A compreensão da relevância da questão da redução da sensibilidade de microrganismos patogênicos e a busca por uma solução para esse problema vêm ocorrendo gradualmente hoje em dia. Mas este já é o primeiro passo para combater eficazmente o problema chamado "resistência aos antibióticos". E este passo é extremamente importante.