PCR da hepatite C

O HCV no material está normalmente ausente.

Ao contrário dos métodos sorológicos para o diagnóstico de hepatite C viral, onde os anticorpos para HCV são detectados, a PCR pode detectar a presença de ARN de HCV diretamente e quantificar sua concentração no material de teste. O teste tem especificidade específica e alta sensibilidade: dez moléculas de ARN do HCV no material de teste são suficientes para a sua detecção. A detecção de anticorpos para HCV confirma apenas o fato de infecção do paciente, mas não permite julgar a atividade do processo infeccioso (sobre a replicação do vírus) e o prognóstico da doença. Além disso, os anticorpos contra o VHC são detectados no sangue de pacientes com hepatite aguda e crônica e nos pacientes doentes e recuperados e, muitas vezes, anticorpos no sangue aparecem apenas alguns meses após o aparecimento do quadro clínico da doença, dificultando o diagnóstico. A detecção de HCV no sangue usando PCR é um método de diagnóstico mais informativo. A detecção de ARN de HCV na PCR atesta a viremia, permite julgar a replicação do vírus no organismo e serve como um dos critérios para a eficácia da terapia antiviral. A detecção de ARN de HCV por PCR nos estádios iniciais do desenvolvimento de uma infecção viral no contexto da ausência completa de marcadores serológicos pode ser a primeira evidência de infecção. No entanto, a detecção isolada de ARN de HCV no contexto da ausência completa de outros marcadores sorológicos não pode eliminar completamente o resultado falso positivo da PCR. Nesses casos, é necessária uma avaliação abrangente de estudos clínicos, bioquímicos e morfológicos, com reiterada confirmação repetida da presença de infecção por PCR.

De grande importância é o uso do método de PCR em pacientes com hepatite C crônica viral, como na maioria deles não há correlação entre a presença de replicação viral ea atividade de enzimas hepáticas. Nesses casos, apenas PCR permite avaliar a presença de replicação viral, especialmente se o resultado final for expresso quantitativamente. Na maioria dos casos, o desaparecimento do ARN do HCV do soro sanguíneo ocorre mais tarde do que a normalização das enzimas hepáticas, portanto sua normalização não pode servir como base para a interrupção do tratamento antiviral.

É praticamente importante para a detecção de ARN de HCV investigar por método de PCR não apenas soro, mas também linfócitos, hepatobiobaptam. Os vírus podem ser detectados 2-3 vezes mais frequentemente no tecido do fígado do que no soro. Ao avaliar os resultados do estudo do soro sanguíneo para o ARN do HCV, deve-se lembrar que a viremia pode ser de natureza flutuante (como a mudança na atividade enzimática). Portanto, após resultados positivos do estudo de PCR, um resultado negativo pode ser obtido e vice-versa. Nesses casos, para resolver as dúvidas que surgem, é melhor investigar os hepatobiobaths.

A detecção de ARN de HCV num material que utiliza PCR é utilizada para os seguintes fins:

• resolução de resultados questionáveis de estudos sorológicos;
• diferenciação da hepatite C viral de outras formas de hepatite;
• a detecção da fase aguda da doença em comparação com a infecção ou contato transferido; o estágio de infecção de recém-nascidos de mães sorotipos de HCV;
• monitorando a eficácia do tratamento antiviral.

Pacientes com suspeita de hepatite C viral:

• doadores;
• pessoas com fatores de risco;
• pessoas com maior atividade de ALT;
• pacientes com hepatite aguda

Todas as características acima da avaliação de resultados e abordagens para o diagnóstico de HCV usando PCR também se aplicam a outras infecções.

O método de PCR permite não só detectar ARN de HCV no material de teste, mas também estabelecer seu genótipo. A determinação do genótipo do vírus é de grande importância para a seleção de pacientes com hepatite C crônica viral para realizar o tratamento com interferão alfa e ribavirina. As indicações laboratoriais para o tratamento da hepatite C crônica viral com interferão alfa são as seguintes:

• aumento da atividade das transaminases;
• presença de ARN de HCV no sangue;
• genótipo 1 HCV;
• viremia alta no sangue (mais de 8 × 10 ⁵ cópias / ml).

Atualmente, o conteúdo de ARN do VHC no soro sanguíneo pode ser quantificado por PCR, o que é de grande importância para o controle do tratamento com interferão alfa. O nível de viremia é avaliado da seguinte forma: para ARN de HCV de 10 ² a 10 ⁴ cópias / ml - fraco; de 10 ⁵ a 10 ⁷ cópias / ml - médio, acima de 10 ⁸ cópias / ml - alto. Com um tratamento eficaz, o nível de viremia diminui.

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