Vitamina A no sangue

Os valores de referência (norma) da concentração de vitamina A (retinol) no soro sanguíneo: em crianças de 1-6 anos - 0,7-1,5 μmol / l, 7-12 anos - 0,91-1,71 μmol / l, 13 -19 anos - 0,91-2,51 μmol / l; em adultos é de 1,05-2,09 μmol / l.

A vitamina A refere-se a lipossolúvel e existe em duas formas - na verdade vitamina A, ou retinol (encontrado apenas em produtos de origem animal) e provitamina A, conhecida como caroteno (derivado de produtos animais e vegetais) que pode ser convertida em retinol nas paredes o aparelho digestivo. Aproximadamente 50-90% do retinol tomado com alimentos é absorvido no intestino delgado e transportado no complexo ligado aos quilomícrons no fígado, que é armazenado na forma de palmitato de retinol. Se necessário, é liberado na corrente sangüínea na forma de retinol, que está em combinação com a proteína de ligação à vitamina A. No soro, a proteína de ligação à vitamina A + o complexo de retinol se liga à transtireitina. Do soro, o retinol é capturado por células alvo, como fotorreceptores da retina e epitélio.

Quando a vitamina A entra no corpo em excesso de requisitos (180-430 μg de retinol por dia, dependendo da idade, sexo e estado fisiológico), seu excesso é depositado no fígado formando o depósito dessa vitamina. Com uma ingestão reduzida de retinol a partir de alimentos, suas reservas de fígado são liberadas na corrente sanguínea, mantendo a concentração sérica de retinol a um nível normal (acima de 0,7 μmol / L). Outras formas biologicamente ativas de vitamina A (ácido retinal e retinoico) estão presentes no sangue em concentrações muito baixas (abaixo de 0,35 μmol / L); sobre os ésteres do retinol é responsável por aproximadamente 5% da vitamina A total (0,1-0,1 μmol / l).

A vitamina A tem um papel importante nos processos de oxidação-redução. Retinol promove a formação de glicogênio no fígado e nos músculos, promove o aumento do colesterol no sangue, faz parte da síntese de esteróides e hormônios sexuais. É necessário o crescimento e a formação do esqueleto ósseo, a resíntese da rodopsina e também contribui para o funcionamento normal das mucosas e para o epitélio tegumentar da pele, prevenindo sua metaplasia, hiperqueratose e destruição excessiva. A vitamina A ajuda a fortalecer o cabelo, os dentes e as gengivas. Nos últimos anos, o papel múltiplo da vitamina A na prevenção do câncer e da imunidade reguladora tem sido demonstrado (necessário para completar a fagocitose, aumentar a síntese de Ig, estimular a formação de T-killers, estimular o T helper tipo II, etc.). Vitamina A - um antioxidante ativo, atuando principalmente na presença de vitamina E; ele protege a vitamina C da oxidação. A deficiência de vitamina A é considerada um fator de risco para neoplasias malignas. Em estudos experimentais, mostrou-se que um aumento no conteúdo de vitamina A na dieta aumenta a duração média da vida em 17,5%. O zinco é um cofator essencial do metabolismo da vitamina A (necessário para a síntese da proteína de ligação à vitamina A).

O requerimento médio diário para retinol para adultos (20-50 anos) é de 1,2 mg (4000 UI, 1 IU é equivalente a 0,3 μg de retinol), para mulheres grávidas - 1,5 mg (5000 UI), para amamentação - 1, 8 mg (6000 UI), para pessoas com mais de 60 anos - 2,5 mg (10 000 UI). Pelo menos um terço do requisito diário de retinol deve ser entregue ao corpo em forma pré-fabricada; o resto pode ser absorvido pelo uso de carotenóides, dos quais o retinol se forma no corpo. Deve-se ter em mente que aproximadamente 30% do retinol nos alimentos são destruídos pelo tratamento térmico. A atividade do retinol é 2 vezes maior do que o caroteno, além disso, o último é apenas 30-40% absorvido no intestino. Portanto, ao avaliar a ingestão dietética, considera-se que 1 mg de retinol corresponde aproximadamente a 6 mg de carotenóides.

Determinação de retinol (vitamina A) e carotenóides no soro de acordo com Bessey na modificação de LA Anisimova

Princípio do método

A determinação de vitamina A e carotenóides baseia-se na sua hidrólise em uma solução de álcool alcalino, seguida de extração com uma mistura de solventes orgânicos.

Reagentes

• Solução 11 M de hidróxido de potássio (KOH).
• 96% de álcool etílico.
• Solução 1 M de hidróxido de potássio (KOH) em álcool etílico a 96%: 1 volume de solução de KOH 11 M é misturado com 10 volumes de álcool etílico a 96%. O reagente é preparado no dia do estudo. Se a coloração ocorrer durante a mistura, o álcool deve ser limpo por destilação antes da utilização.
• Xylol, hp.
• Oktan, h.ch.
• Mistura de xileno-octano: preparada misturando volumes iguais de xileno e octano.

As investigações são realizadas em um espectrofotômetro.

O curso da determinação da vitamina A

O sangue retirado do dedo (cerca de 1 ml) é introduzido no marcador da centrífuga e colocado em copo de vidro com água morna (temperatura 40-45 ° C) durante 20 a 30 minutos. Para separar o soro, um coágulo de sangue é cuidadosamente enrolado em torno da borda do tubo com uma vara de vidro fino e centrifugado a 3000 rpm durante 10 minutos.

Selecione 0.12 ml de soro e transfira-o para um tubo de aglutinação, em seguida, adicione 0,12 ml de uma solução de hidróxido de potássio com 1 M de álcool. O conteúdo é agitado cuidadosamente.

Os tubos de ensaio com sondas são colocados num banho de água durante 20 minutos a uma temperatura de 60 ° C para hidrólise.

As amostras são arrefecidas e 0,12 ml de uma mistura de xileno-octano são adicionados a elas, agitados vigorosamente por 10-15 segundos. Refrigere novamente e centrifugue.

Retire cuidadosamente a camada superior contendo vitamina A e carotenóides com uma pipeta Pasteur com uma lata de borracha e transfira para microcuvetas.

As amostras são espectrofotométricas a um comprimento de onda de 328 nm - para determinar a vitamina A, e a um comprimento de onda de 460 nm - para determinar os carotenóides.

Depois de espectrofotometria a amostra estudada é submetido à radiação ultravioleta para a destruição da vitamina A. Para este propósito, a uma distância de 15-20 cm a partir da (bactericida) microcuvetas lâmpada de quartzo definido de modo que a irradiação exposta porção da cuvete, cheia com líquido; o tempo de exposição de 45-60 minutos.

As amostras são repetidamente espectrofotométricas a um comprimento de onda de 328 nm. O conteúdo da vitamina A é determinado a partir da diferença nos valores de extinção (densidade óptica), levando em consideração o coeficiente (fator) 637, calculado por Bessey para a vitamina A.

O cálculo é realizado de acordo com a fórmula:

X = 637 × (Е328 (1) - Е328 (2)),

Onde X é o conteúdo de vitamina A, μg / dL; 637 é o coeficiente calculado por Bessey para a determinação da vitamina A; Е328 (1) - a densidade óptica da solução antes da irradiação; E328 (2) é a densidade óptica da solução após a irradiação.

O coeficiente para transferir a concentração de vitamina A de μg / dL em μmol / l é 0,035.

O conteúdo de carotenóides é calculado pela fórmula:

X = 480-Е480,

Onde X é o conteúdo de carotenóides, μg / dL; 480 é o coeficiente calculado por Bessey para determinar carotenóides; E480 é a densidade óptica da solução de teste.

Nota:

De acordo com Bessey, podem ser tomados volumes de soro maiores ou menores durante os estudos, mas sua relação com o volume da solução de álcool deve ser constante com qualquer alteração no volume (quantidade) da mistura de xileno-octano.

A norma no teor de vitamina A no soro sanguíneo é: em recém-nascidos e lactentes - 160-270 μg / l; em adultos, 1,05-2,45 μmol / l (300-700 μg / l). O conteúdo de carotenóides no soro adulto é 800-2300 μg / l.