Vírus da gripe A

O vírus da gripe A é um virião com uma forma esférica e um diâmetro de 80-120 nm, seu peso molecular é de 250 MD. O genoma do vírus é representado por um fragmento simples (8 fragmentos) de ARN negativo com uma massa total de 5 MD. O tipo de simetria da nucleocápside é espiral. O vírus da gripe possui uma supercapsid (membrana) contendo duas glicoproteínas - hemaglutinina e neuraminidase, que se sobressaem acima da membrana na forma de várias espinhas. A hemaglutinina possui uma estrutura de trímero com uma massa de 225 kD; m de cada monómero de 75 kD. O monómero consiste em uma subunidade menor com uma massa de 25 kD (HA2) e uma subunidade maior com uma massa de 50 kD (HA1).

As principais funções da hemaglutinina:

• reconhece o receptor celular - mukopeptídeo, que possui N-acetilneuram - um novo ácido (sialico);
• assegura a fusão da membrana do virião com a membrana da célula e as membranas dos seus lisosomas, ou seja, é responsável pela penetração do virião na célula;
• determina a natureza pandêmica do vírus (alteração da hemaglutinina - a causa das pandemias, sua variabilidade - epidemias de gripe);
• tem as maiores propriedades protetoras, responsáveis pela formação da imunidade.

Nos vírus da gripe A humanos, humanos e mamíferos, foram detectados 13 tipos de hemaglutinina diferenciadores de antígenos, que foram atribuídos a numeração de ponta a ponta (dH1dHlO3).

Neuraminidase (N) é um tetrâmero com uma massa de 200-250 kD, cada monómero tem uma massa de 50-60 kD. Suas funções são:

• garantindo a disseminação de viriões por clivagem de ácido neuramínico de viriões recém-sintetizados e membrana celular;
• juntamente com a hemaglutinina, a definição de propriedades pandêmicas e epidêmicas do vírus.

O vírus da gripe A detectou 10 variantes diferentes da neuraminidase (N1-N10).

A nucleocápside do virião consiste em 8 fragmentos de proteínas de vRNA e cápside que formam uma cadeia espiral. Nas extremidades 3 'de todos os 8 fragmentos de ARNv, existem sequências idênticas de 12 nucleótidos. As extremidades 5 'de cada fragmento também têm a mesma sequência de 13 nucleótidos. As extremidades 5 'e 3' são parcialmente complementares entre si. Esta circunstância, obviamente, permite regular a transcrição e a replicação de fragmentos. Cada um dos fragmentos é transcritos e replicados de forma independente. Com cada um deles, quatro proteínas da cápside estão firmemente ligadas: a nucleoproteína (NP), ela desempenha um papel estrutural e regulatório; proteína PB1 - transcriptase; PB2 - endonuclease e RA - replicase. As proteínas PB1 e PB2 possuem propriedades básicas (alcalinas) e propriedades PA-ácidas. As proteínas PB1, PB2 e PA formam um polímero. Nucleocapsid é cercado por uma proteína de matriz (proteína M1), que desempenha um papel de liderança na morfogênese do virião e protege o ARN do virião. Proteínas M2 (codifica uma das grelhas de leitura 7 fragmento), NS1 e NS2 (ARNv codificado oitavo fragmento que tem, como o sétimo fragmento ARNv duas grelhas de leitura) são sintetizados no decurso da replicação virai, mas a sua estrutura não está incluído.

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O ciclo de vida do vírus influenza A

O vírus da gripe é absorvido na membrana celular devido à interação de sua hemaglutinina com o mucopeptídeo. Então o vírus entra na célula usando um dos dois mecanismos:

• fusão da membrana do virião com a membrana celular ou
• ao longo do caminho frango fósforo - vesícula bordada - endossoma - lisossoma - fusão da membrana do virião com a membrana do lisossoma - o rendimento da nucleocápside no citosol da célula.

O segundo estágio de "stripping" do virião (destruição da proteína da matriz) ocorre no caminho para o núcleo. A peculiaridade do ciclo de vida do vírus da gripe reside no fato de que a transcrição do seu ARNv requer a semeadura. O fato é que o vírus não pode sintetizar a tampa em si, ou tampão, um site especial na extremidade 5 'do mRNA, consistindo em guanina metilada e 10-13 nucleótidos contíguos, o que é necessário para o reconhecimento do ARNm do ribossoma. Portanto, ele usa sua proteína PB2 para morder a tampa do mRNA celular e, como a síntese de mRNA nas células ocorre apenas no núcleo, o ARN viral deve necessariamente penetrar primeiro no núcleo. Ele penetra nele sob a forma de uma ribonucleoproteína constituída por 8 fragmentos de RNA ligados às proteínas NP, PB1, PB2 e PA. Agora a vida da célula está completamente sujeita aos interesses do vírus, suas reproduções.

Característica de transcrição

Três tipos de ARNs específicos de vírus são sintetizados no núcleo para vRNA: 1) RNAs complementares positivos (mRNAs) usados como matrizes para a síntese de proteínas virais; eles contêm na extremidade 5 'uma tampa clivada da extremidade 5' do mRNA celular e na extremidade 3 ', uma sequência poli-A; 2) ARN complementar completo (ARNc), que serve como um modelo para a síntese de ARNs do virião (vRNAs); No extremo 5 'do cRNA a tampa está ausente, não há uma sequência poli-A na extremidade 3'; 3) ARN de virião negativo (ARNv), que é um genoma para viriões recém-sintetizados.

Imediatamente, mesmo antes da síntese ser concluída, o vRNA e o cRNA entram em associação com proteínas da cápside, que entram no núcleo do citosol. No entanto, apenas as ribonucleoproteínas associadas com vRNA estão incluídas nos viriões. As ribonucleoproteínas contendo cRNA não só não entram na composição dos viriões, mas nem deixam o núcleo da célula. Os mRNAs virais entram no citosol, onde são traduzidos. As moléculas de ARNv recém-sintetizadas, após associação com proteínas da cápside, migram do núcleo para o citosol.

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Características da tradução de proteínas virais

As proteínas NP, PB1, PB2, RA e M são sintetizadas em polibossomas livres. As proteínas NP, PB1, PB2 e RA após a síntese do retorno do citosol ao núcleo, onde se ligam ao vRNA recém-sintetizado e depois retornam ao citosol como nucleocápside. A proteína matricial após a síntese se move para a superfície interna da membrana celular, deslocando-a nessa área de proteínas celulares. As proteínas H e N são sintetizadas em ribossomos ligados a membranas do retículo endoplasmático, transportados ao longo deles, passando por glicosilação e instalados na superfície externa da membrana celular, formando espinhas logo opostas à proteína M localizada na sua superfície interna. A proteína H é processada durante o processamento cortando em HA1 e HA2.

O estágio final da morfogênese do virião é controlado pela proteína M. Nucleocapsid interage com ele; que passa através da membrana celular, ele é coberto com a primeira proteína-M, e a camada lipídica, em seguida, celular e glicoproteínas superkapsidnymi H e N. O ciclo de vida do vírus leva 6-8 horas e é brotamento completa de virião sintetizada de novo, que são capazes de atacar as células de outros tecidos.

A estabilidade do vírus no ambiente externo é baixa. É facilmente destruído por aquecimento (a 56 ° C por 5-10 minutos), sob a influência da luz solar e UV e é facilmente neutralizado por desinfetantes.

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Patogênese e sintomas da gripe A

O período de incubação para a gripe é curto - 1-2 dias. O vírus se multiplica nas células epiteliais da mucosa do trato respiratório com a localização predominante na traqueia, que manifesta-se clinicamente como tosse seca e dolorosa com dor ao longo da traquéia. Os produtos de degradação das células afetadas entram na corrente sanguínea, causam intoxicação grave e aumentam a temperatura corporal a 38-39 ° C. O aumento da permeabilidade vascular, causada por dano às células endoteliais, pode causar alterações patológicas em vários órgãos: hemorragias na traqueia, brônquios e, às vezes, edema cerebral com desfecho fatal. O vírus da gripe tem um efeito deprimente no sangue e no sistema imunológico. Tudo isso pode levar a infecções virais e bacterianas secundárias, o que complica o curso da doença.

Imunidade pós-infecciosa

As crenças anteriores de que, após o vírus da gripe, permanecem fracas e a imunidade a curto prazo são refutadas após o retorno do vírus H1N1 em 1977. Este vírus causou a doença principalmente em pessoas com menos de 20 anos, ou seja, aquelas que não haviam estado doentes antes, até 1957. Conseqüentemente, a imunidade pós-infecciosa é bastante intensa e prolongada, mas tem um caractere pronunciado de tipo específico.

O papel principal na formação da imunidade adquirida pertence a anticorpos neutralizantes de vírus que bloqueiam hemaglutinina e neuraminidase, bem como imunoglobulinas secretoras de IgA.

Epidemiologia da gripe A

A fonte de infecção é uma pessoa, um doente ou um portador, raramente animais (aves domésticas e selvagens, porcos). A infecção de pessoas ocorre por gotas no ar, o período de incubação é muito curto (1-2 dias), então a epidemia se espalha muito rapidamente e pode se transformar em uma pandemia na ausência de imunidade coletiva. A imunidade é o principal regulador das epidemias de gripe. À medida que a imunidade coletiva se acumula, a epidemia está em declínio. Ao mesmo tempo, devido à formação da imunidade, são selecionadas as cepas do vírus com uma estrutura antigênica modificada, principalmente hemaglutinina e neuraminidase; estes vírus continuam a causar surtos até aparecerem anticorpos. Essa deriva antigênica e mantém a continuidade da epidemia. No entanto, no vírus influenza A, outra forma de variabilidade foi descoberta, chamada mudança, ou cisalhamento. Está associado a uma mudança completa de um tipo de hemaglutinina (menos frequentemente - e neuraminidase) para outra.

Todas as pandemias de gripe foram causadas por vírus influenza A submetidos à esquiltose. A pandemia de 1918 foi causada por um vírus com o fenótipo H1N1 (cerca de 20 milhões de pessoas morreram), a pandemia de 1957 - o vírus h3N2 (mais de metade da população mundial estava doente), 1968 - o vírus H3N2.

Para explicar os motivos da mudança acentuada nos tipos de vírus influenza A, duas hipóteses principais foram propostas. De acordo com a hipótese de A. A. Smorodintsev, o vírus que esgotou suas possibilidades de epidemia não desaparece, mas continua a circular no time sem surtos visíveis ou persiste no corpo humano durante muito tempo. Em 10-20 anos, quando haverá uma nova geração de pessoas que não têm imunidade a este vírus, isso se torna a causa de novas epidemias. Esta hipótese é apoiada pelo fato de que o vírus da gripe A com o fenótipo H1N1, que desapareceu em 1957 quando foi substituído pelo vírus H3N2, reapareceu após uma ausência de 20 anos em 1977

De acordo com outra hipótese, desenvolvida e apoiada por muitos autores, novos tipos de vírus da gripe A surgem da reassociação de genomas entre vírus da gripe humana e aviária, entre vírus da gripe aviária, entre vírus aviários e de mamíferos (suínos), facilitados pela estrutura segmentar do genoma viral (8 fragmentos ).

Assim, o vírus da gripe A tem duas maneiras de mudar o genoma.

Mutações de ponto causando deriva antigênica. Em primeiro lugar, os genes da hemaglutinina e neuraminidase, especialmente no vírus H3N2, são suscetíveis a eles. Graças a isso, o vírus H3N2 causou 8 epidemias durante o período de 1982 a 1998 e permanece epidêmico até agora.

Reassociação de genes entre vírus da gripe humana e vírus da gripe aviária e suína. Acredita-se que a reassociação dos genomas dos vírus da gripe A com os genomas do vírus da gripe aviária e suína é a principal razão para o surgimento de variantes pandémicas deste vírus. A deriva antigênica permite que o vírus vença a imunidade existente em seres humanos. A mudança antigênica cria uma nova situação epidêmica: a maioria das pessoas não tem imunidade ao novo vírus e ocorre uma pandemia de gripe. A possibilidade de tal reassociação dos genomas dos vírus da gripe A provou experimentalmente.

Foi estabelecido que as epidemias de gripe em seres humanos são causadas por vírus tipo A de apenas 3 ou 4 fenótipos: H1N1 (H0N1); h3N2; H3N2.

No entanto, um vírus de frango (aviário) também é uma ameaça significativa para os seres humanos. Os surtos de gripe de frango foram observados repetidamente, em particular o vírus H5N1 de frango causou uma epidemia de milho entre aves domésticas e selvagens com 80-90% de mortalidade. As pessoas ficaram infectadas com galinhas; então, em 1997, de galinhas, 18 pessoas ficaram infectadas, um terço deles morreu. Foi observado um surto particularmente grande em janeiro-março de 2004. Isso afetou quase todos os países do Sudeste Asiático e um dos estados dos EUA e causou enormes danos econômicos. 22 galinhas foram infectadas e mortas. Para eliminar este surto, foram tomadas as medidas mais severas e decisivas: quarentena rigorosa, eliminação de todo o número de aves em todos os surtos, hospitalização e isolamento de pacientes e todas as pessoas com febre, bem como pessoas em contato com os pacientes, proibindo a importação de carne de frango a partir desses acima dos países, rigorosa supervisão médica e veterinária de todos os passageiros e veículos que chegam desses países. A ampla disseminação da gripe entre as pessoas não ocorreu porque não houve reassociação do genoma do vírus da gripe de frango com o genoma do vírus da gripe humana. No entanto, o perigo de tal reassociação permanece real. Isso pode levar ao surgimento de um novo e perigoso vírus pandémico da gripe humana.

Em nome das cepas detectadas de vírus da gripe, o sorotipo do vírus (A, B, C), a espécie hospedeira (se não for humano), o local de isolamento, o número da estirpe, o ano de isolamento (2 últimos dígitos) eo fenótipo (entre parênteses). Por exemplo: "A / Singapura / 1/57 (h3N2), A / Pato / URSS / 695/76 (H3N2)".

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Diagnóstico laboratorial de influenza A

O material utilizado para o estudo é uma nasofaringe destacável, que é obtida por lavagem, ou com tampões de algodão e sangue. Os métodos de diagnóstico aplicam o seguinte:

• Virológica - infecção de embriões de pintos, culturas de células de rim de macacos verdes (Vero) e cães (MDSK). As culturas de células são particularmente eficazes para o isolamento de vírus A (H3N2) e B.
• Serológico - a detecção de anticorpos específicos e o aumento do seu título (em soros emparelhados) com a ajuda de RTGA, RSK, método de imunoensaio.
• Como diagnóstico acelerado, utiliza-se o método de imunofluorescência, que permite detectar rapidamente o antígeno viral em esfregaços da mucosa nasal ou nas lavagens da nasofaringe dos pacientes.
• Para detectar e identificar o vírus (antígenos virais) sugeriu métodos de sonda de ARN e PCR.

Tratamento da gripe A

Tratamento da Influenza A, que deve ser iniciado o mais cedo possível, bem como a prevenção da gripe e outras IRA viral é baseado no uso de dibazola, interferon e seus indutores amiksina e Arbidol em regimes especiais, e para o tratamento e prevenção da gripe em crianças com mais de 1 ano - Alguire (rimantadine ) por regimes especiais.

Prevenção específica da gripe A

Todos os anos no mundo, centenas de milhões de pessoas sofrem de gripe, o que causa um enorme dano à saúde da população e à economia de cada país. O único meio confiável de combater é a criação de imunidade coletiva. Para este fim, os seguintes tipos de vacinas são propostos e utilizados:

1. viva de um vírus atenuado;
2. matou todo o virion;
3. Vacina Subvirion (de viriões divididos);
4. subunidade-vacina, contendo apenas hemaglutinina e neuraminidase.

Em nosso país, é criada e aplicada uma vacina de subunidade de polímero trivalente ("gripe") em que um conjugado estéril das proteínas de superfície dos vírus A e B está ligado a um copolímero de polioxidônio (imunoestimulante).

Crianças de 6 meses. Até 12 anos, de acordo com as recomendações da OMS, deve ser vacinado apenas a vacina da subunidade como o menos reativo e tóxico.

O principal problema no aumento da eficácia das vacinas contra a gripe é assegurar sua especificidade contra o vírus real, ou seja, a variante do vírus que causou a epidemia. Em outras palavras, a vacina deve conter antígenos específicos do vírus real. A principal maneira de melhorar a qualidade da vacina é usar o mais conservado e comum para todas as variantes antigênicas dos epítopos do vírus A que possuem a imunogenicidade máxima.