Radiometria clínica

A radiometria clínica é a medição da radioatividade de todo o corpo ou de parte dele após a introdução de um radiofármaco no corpo. Normalmente, radionuclídeos emissores de raios gama são usados na prática clínica. Após a introdução de um radiofármaco contendo tal radionuclídeo no corpo, sua radiação é capturada por um detector de cintilação localizado acima da parte correspondente do corpo do paciente. Os resultados do estudo são geralmente apresentados em um quadro de luz como o número de pulsos registrados durante um determinado período de tempo, ou como uma taxa de contagem (em pulsos por minuto). Na prática clínica, este método não é de grande importância. Geralmente é usado em casos em que é necessário identificar e avaliar a incorporação de radionuclídeos quando eles entram acidentalmente no corpo humano - por descuido, em desastres.

Um método mais interessante é a radiometria de corpo inteiro. Durante este método, uma pessoa é colocada em uma câmara especial de baixa radiação de fundo contendo vários detectores de cintilação especialmente orientados. Isso permite o registro da radiação radioativa de todo o corpo e sob condições de influência mínima do fundo radioativo natural, que, como se sabe, pode ser bastante alto em algumas áreas da superfície da Terra. Se, durante a radiometria, qualquer parte do corpo (órgão) for coberta com uma placa de chumbo, a contribuição dessa parte do corpo (ou do órgão localizado sob a placa) para a radioatividade geral do corpo pode ser avaliada. Dessa forma, é possível estudar o metabolismo de proteínas, vitaminas, ferro e determinar o volume de água extracelular. Este método também é usado no exame de pessoas com incorporação acidental de radionuclídeos (em vez da radiometria clínica convencional).

Radiômetros automatizados são utilizados para radiometria laboratorial. Eles possuem tubos de ensaio com material radioativo em uma esteira transportadora. Sob o controle de um microprocessador, os tubos de ensaio são alimentados automaticamente na janela do contador de poços; após a conclusão da radiometria, os tubos de ensaio são trocados automaticamente. Os resultados das medições são calculados em um computador e, após processamento adequado, são enviados para uma impressora. Os radiômetros modernos realizam cálculos complexos automaticamente, e o médico recebe informações imediatas, por exemplo, sobre a concentração de hormônios e enzimas no sangue, indicando a precisão das medições realizadas. Se o volume de trabalho em radiometria laboratorial for pequeno, radiômetros mais simples são usados com movimentação manual dos tubos de ensaio e radiometria manual, em modo não automático.

O diagnóstico in vitro de radionuclídeos (do latim vitrum - vidro, já que todos os estudos são realizados em tubos de ensaio) refere-se à microanálise e ocupa uma posição limítrofe entre a radiologia e a bioquímica clínica. Permite detectar a presença de diversas substâncias de origem endógena e exógena em fluidos biológicos (sangue, urina), que se encontram em concentrações insignificantes ou, como dizem os químicos, em concentrações que desaparecem. Essas substâncias incluem hormônios, enzimas, medicamentos introduzidos no corpo para fins terapêuticos, etc.

Em diversas doenças, como câncer ou infarto do miocárdio, substâncias específicas para essas doenças aparecem no corpo. Elas são chamadas de marcadores (do inglês "mark"). A concentração de marcadores é tão insignificante quanto a de hormônios: literalmente, moléculas individuais em 1 ml de sangue.

Todos esses estudos, únicos em sua precisão, podem ser realizados utilizando a análise radioimunológica, desenvolvida em 1960 pelos pesquisadores americanos S. Berson e R. Yalow, que posteriormente receberam o Prêmio Nobel por este trabalho. Sua ampla implementação na prática clínica marcou um salto revolucionário na microanálise e no diagnóstico por radionuclídeos. Pela primeira vez, os médicos tiveram a oportunidade, e uma oportunidade muito real, de decifrar os mecanismos de desenvolvimento de muitas doenças e diagnosticá-las em seus estágios iniciais. Endocrinologistas, terapeutas, obstetras e pediatras sentiram a importância do novo método de forma mais visível.

O princípio do método radioimunológico consiste na ligação competitiva das substâncias desejadas, estáveis e similares, marcadas com um sistema receptor específico.

Para realizar essa análise, são produzidos conjuntos padrão de reagentes, cada um projetado para determinar a concentração de uma substância específica.

Como pode ser visto na figura, o sistema de ligação (geralmente anticorpos específicos ou antissoro) interage simultaneamente com dois antígenos, um dos quais é o desejado e o outro é seu análogo marcado. São utilizadas soluções nas quais o antígeno marcado sempre contém mais do que anticorpos. Nesse caso, ocorre uma verdadeira luta entre os antígenos marcados e não marcados pela ligação com os anticorpos. Estes últimos pertencem às imunoglobulinas da classe G.

Eles devem ser altamente específicos, ou seja, reagir apenas com o antígeno em estudo. Os anticorpos aceitam apenas antígenos específicos em seus sítios de ligação abertos e em quantidades proporcionais ao número de antígenos. Esse mecanismo é descrito figurativamente como o fenômeno da "chave e fechadura": quanto maior o conteúdo inicial do antígeno desejado nas soluções reagentes, menos análogo radioativo do antígeno será capturado pelo sistema de ligação e maior será a sua porção não ligada.

Simultaneamente à determinação da concentração da substância desejada no sangue do paciente, nas mesmas condições e com os mesmos reagentes, é realizado um estudo de soros padrão com uma concentração precisamente determinada do antígeno desejado. Com base na relação entre as radioatividades dos componentes reagidos, é construída uma curva de calibração que reflete a dependência da radioatividade da amostra em relação à concentração da substância em estudo. Em seguida, comparando a radioatividade das amostras de material obtidas do paciente com a curva de calibração, é determinada a concentração da substância desejada na amostra.

A análise in vitro de radionuclídeos passou a ser chamada de radioimunológica, pois se baseia no uso de reações imunológicas antígeno-anticorpo. No entanto, outros tipos de estudos in vitro foram criados posteriormente, semelhantes em propósito e metodologia, mas diferindo em detalhes. Assim, se um anticorpo for usado como substância marcada, e não um antígeno, a análise é chamada de imunorradiométrica; se receptores teciduais forem usados como sistema de ligação, fala-se em análise de radiorreceptores.

O estudo in vitro de radionuclídeos consiste em 4 etapas.

• A primeira etapa consiste na mistura da amostra biológica analisada com reagentes do kit contendo antissoro (anticorpos) e um sistema de ligação. Todas as manipulações com soluções são realizadas com micropipetas semiautomáticas especiais; em alguns laboratórios, são realizadas com máquinas.
• A segunda etapa é a incubação da mistura. Ela continua até que o equilíbrio dinâmico seja alcançado: dependendo da especificidade do antígeno, sua duração varia de vários minutos a várias horas e até dias.
• A terceira etapa é a separação de substâncias radioativas livres e ligadas. Para isso, são utilizados os sorventes disponíveis no kit (resinas de troca iônica, carbono, etc.), precipitando complexos antígeno-anticorpo mais pesados.
• A quarta etapa é a radiometria das amostras, a construção das curvas de calibração e a determinação da concentração da substância desejada. Todos esses trabalhos são realizados automaticamente por meio de um radiômetro equipado com microprocessador e impressora.

Como se pode observar acima, a análise radioimunológica baseia-se no uso de um marcador de antígeno radioativo. No entanto, em princípio, outras substâncias podem ser utilizadas como marcadores de antígeno ou anticorpo, em particular enzimas, luminóforos ou moléculas altamente fluorescentes. Esta é a base para novos métodos de microanálise: imunoenzimáticos, imunoluminescentes e imunofluorescentes. Alguns deles são muito promissores e competem com a pesquisa radioimunológica.

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