Peste de patógenos

Peste (pestis) - uma doença infecciosa aguda , procedendo de acordo com o tipo de septicemia hemorrágica. No passado, a praga era um flagelo formidável para a humanidade. São conhecidas três pragas pandêmicas, que reivindicaram milhões de vidas humanas.

A primeira pandemia estava no VI. N. E. A partir dele morreu de 531 a 580, cerca de 100 milhões de pessoas - metade da população do Império Romano Oriental (praga "Justiniana").

A segunda pandemia entrou em erupção no século XIV. Começou na China e atingiu muitos países na Ásia e na Europa. Na Ásia, 40 milhões de pessoas morreram, e na Europa, 25 milhões deles morreram. Aqui é como NM Karamzin descreve esta pandemia na "História do Estado russo": "A doença foi detectada por glândulas nos corpúsculos moles do corpo, a pessoa cuspiu sangue e no segundo ou terceiro dia em que ele morreu. Você não pode dizer os cronistas, imaginar um espetáculo mais terrível ... De Pequim para as margens do Eufrates e as entranhas Ladoga da terra cheia de milhões de cadáveres, eo estado estavam vazios ... Não havia um cidadão ... E esta praga cruel veio várias vezes em Glukhov e Belozersk e estava voltando. Em Smolensk, enfureceu três vezes e, finalmente, em 1387, apenas 5 pessoas permaneceram nele, o que, de acordo com a crónica, deixou e fechou a cidade cheia de cadáveres ".

A terceira pandemia da praga começou em 1894 e terminou em 1938, matando 13 a 15 milhões de pessoas.

O agente causador da peste foi descoberto em 1894 pelo cientista francês A. Iersen, a quem chamou Yersinia Pestis. O gênero Yersinia pertence à família Enterobacteriaceae e inclui 11 espécies, das quais três são patogênicas para humanos: Yersinia pestis, Yersinia pseudotuberculosis e Yersinia enterocolitica; A patogenicidade dos outros ainda não está clara.

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Morfologia do agente causador da praga

Yersinia pestis tem um comprimento de 1-2 μm e uma espessura de 0.3-0.7 μm. Em manchas do corpo do paciente e dos cadáveres de pessoas e roedores que morreram de praga, parece uma vara curta ovoide (em forma de ovo) com uma cor bipolar. Em esfregaços de caldo de cultivo de caldo é uma corrente, em esfregaços de culturas de ágar - aleatoriamente. A coloração bipolar em ambos os casos é preservada, mas em esfregaços de culturas de ágar um tanto mais fracos. O agente causador da peste de acordo com Gram é colorido negativamente, é melhor pintado com corantes alcalinos e carbolos (azul Leffler), não forma esporo, não possui flagelos. O conteúdo de G + C no DNA é 45,8-46,0% molar (para todo o gênero). A uma temperatura de 37 ° C, forma uma cápsula suave de natureza protéica, que é detectada em meios nutritivos úmidos e ligeiramente ácidos.

Propriedades bioquímicas do agente causador da peste

Yersinia pestis - aeróbica, dá um bom crescimento em meios nutrientes normais. A temperatura ideal para o crescimento é 27-28 ° С (intervalo - de 0 a 45 ° С), РН = 6,9-7,1. Coli característica suína dá origem a meios de cultura sólidos e líquidos: caldo é manifestada forma de filme solto, a partir do qual descem como fios de pingentes que se assemelham estalactitas na parte inferior - solto caldo precipitado permanece transparente. O desenvolvimento de colônias em meios densos passa por três estágios: em 10 a 12 horas sob um microscópio de crescimento na forma de placas incolores (o estágio de "vidro quebrado"); após 18-24 horas - o estágio de "lenços de renda", quando a zona de lace leve com visibilidade microscópica, localizada em torno da parte central saliente, com uma cor amarelada ou ligeiramente acastanhada. Após 40-48 horas, começa o estágio "colônia de adultos" - um centro delimitado por acastanhado com uma zona periférica pronunciada. Yersinia pseudotuberculosis e Yersinia enterocolitica não têm o estágio de "vidro quebrado". Nas mídias com sangue, as colônias de Yersinia pestis são granulares com uma zona periférica expressa fraca. Para obter o crescimento mais rápido em mídia em Yersinia pestis, recomenda-se adicionar estimulantes de crescimento para eles: sulfito de sódio, sangue (ou suas preparações) ou lisado da cultura de sarcina. A placa possui um polimorfismo pronunciado, especialmente em mídias com alta concentração de NaCl, em culturas antigas, nos órgãos de cadáveres de peste decomposto.

A haste da peste não tem oxidase, não forma indol e H2S, tem atividade catalase e fermenta glicose, maltose, galactose, manitol para formar um ácido sem gás.

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Composição antigénica do agente causador da peste

Yersinia pestis, Yersinia pseudotuberculosis e Yersinia enterocolitica detectaram até 18 antígenos somáticos similares. Yersinia pestis é caracterizada pela presença de antígenos capsulares (fração I), antígenos T, VW, proteínas plasmacoagulase, fibrinolisina, proteínas da membrana externa e antígeno pHb. No entanto, em contraste com Yersinia pseudotuberculosis e Yersinia enterocolitica, Yersinia pestis é antigénicamente mais homogênea; Não existe uma classificação sorológica desta espécie.

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Resistência do agente causador da peste

No escarro, uma placa pode persistir por até 10 dias; em roupas e roupas, sujas com descarga do paciente, permanecem por semanas (proteína e muco protegem do efeito nocivo da secagem). Nos corpos de pessoas e animais que pereceram da peste sobrevive desde o início do outono até o inverno; Baixa temperatura, congelamento e descongelação não o matam. Sol, secagem, alta temperatura é fatal para Yersinia pestis. O aquecimento a 60 ° C mata após 1 hora, a uma temperatura de 100 ° C perece em alguns minutos; 70% de álcool, 5% de solução de fenol, 5% de solução de lisol e alguns outros desinfetantes químicos matam durante 5-10-20 minutos.

Fatores de patogenicidade do agente causador da peste

Yersinia pestis é a mais patogênica e agressiva entre as bactérias e, portanto, causa a doença mais grave. Em todos os animais sensíveis a ele e em seres humanos, o agente causador da praga suprime a função protetora do sistema fagocítico. Ele penetra nos fagócitos, suprime neles uma "explosão oxidativa" e se multiplica sem obstáculos. A incapacidade dos fagócitos para desempenhar sua função assassina contra Yersinia pestis é a principal causa de susceptibilidade à peste. A alta invasividade, agressividade, toxicidade, toxicidade, alergenicidade e a capacidade de suprimir a fagocitose são devidos à presença de um arsenal completo de fatores de patogenicidade em U. Pestis, que estão listados abaixo.

A capacidade das células de absorver corantes exógenos e hemin. Está associado à função do sistema de transporte de ferro e fornece a Yersinia pestis a capacidade de se multiplicar nos tecidos do corpo.

• Dependência de crescimento a uma temperatura de 37 ° C na presença de íons Ca no meio.
• Síntese de antígenos VW. O antígeno W está localizado na membrana externa e V - no citoplasma. Esses antígenos garantem a reprodução de U. Pestis nos macrófagos.
• Síntese de toxina "mouse". A toxina bloqueia o processo de transferência de elétrons nas mitocôndrias do coração e fígado de animais sensíveis, afeta plaquetas e vasos (trombocitopenia) e interrompe suas funções.
• Síntese da cápsula (frações I - Fral). A cápsula inibe a atividade dos macrófagos.
• A síntese de pesticidas é uma característica específica da Yersinia pestis.
• Síntese de fibrinolissina.
• Síntese de plasmocoagulase. Ambas estas proteínas estão localizadas na membrana externa e fornecem altas propriedades invasivas de Yersinia pestis.
• Síntese de purinas endógenas.
• Síntese de proteínas termo-induzidas da membrana externa - Yop-proteínas (proteínas externas de Yersinia inglesa). Proteínas YopA, YopD, YopE, YopH, YopK, YopM, YopN suprimem a atividade de fagócitos.
• Síntese de neuraminidase. Promove a adesão (liberta receptores para Yersinia pestis).
• Síntese de adenilato ciclase. Supõe-se que ele suprime a "explosão oxidativa", ou seja, bloqueia o efeito assassino dos macrófagos.
• Síntese de pilares de adesão. Eles inibem a fagocitose e asseguram a introdução de Yersinia pestis, como parasita intracelular, em macrófagos.
• Síntese de aminopeptidases com um amplo espectro de ação.
• Endotoxina (LPS) e outros componentes da parede celular, que têm um efeito tóxico e alergênico.
• antigénio pHb. É sintetizado a uma temperatura de 37 ° C e pH baixo, suprime a fagocitose e tem um efeito citotóxico nos macrófagos.

Uma parte significativa dos fatores de patogenicidade de Yersinia pestis é controlada por genes, cujos portadores são as seguintes 3 classes de plasmídeos, geralmente encontrados em todas as cepas patogênicas:

• pYP (9,5 pf) é o plasmídeo de patogenicidade. Carrega 3 genes:
  • pst - codifica a síntese de pesticina;
  • pim - determina a imunidade ao pesticida;
  • pla - determina o fibrinolítico (ativador do plasminogênio) e a atividade plasma-coagulase.
• pYT (65 MD) é um plasmídeo de toxigenicidade. Produz os genes que determinam a síntese da toxina do "mouse" (uma proteína complexa constituída por dois fragmentos A e B, com 240 e 120 kD, respectivamente) e genes que controlam a proteína e os componentes das lipoproteínas da cápsula. O terceiro componente controla os genes do cromossomo. Anteriormente, o plasmídeo era chamado pFra.
• pYV (110 mA) - plasmídeo virulência.

Ele determina a dependência do crescimento de Y. Pestis a 37 ° C sobre a presença de íons Ca2 + no meio, portanto tem outro nome - LCR-plasmid (resposta ingles baixa em cálcio). Os genes deste plasmídeo, especialmente importante, também codificam a síntese de antígenos V e W e proteínas Y induzíveis por termo. A sua síntese é realizada sob controle genético complexo a uma temperatura de 37 ° C e na ausência de Ca2 + no meio. Todos os tipos de proteínas Yop, diferentes de YopM e YopN, são hidrolisados pela atividade do ativador de plasminogênio (gene pla de plasmídeo pYP). As proteínas Yop determinam em grande parte a virulência de Yersinia pestis. A proteína YopE tem um efeito antifagocítico e citotóxico. YopD fornece a penetração de YopE na célula alvo; YopH tem atividade antifagocítica e proteína-tirosina-fosfatase; proteína YopN - as propriedades do sensor de cálcio; YopM liga-se a atrombina humana.

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Imunidade pós-infecciosa

A imunidade pós-infecciosa é forte, ao longo da vida. As doenças repetidas da praga são extremamente raras. A natureza da imunidade é celular. Embora os anticorpos apareçam e desempenhem um papel na imunidade adquirida, é mediada principalmente por linfócitos T e macrófagos. Em pessoas que foram infectadas com a praga ou vacinadas, a fagocitose possui um personagem completo. Ele determina a imunidade adquirida.

Epidemiologia da praga

O círculo de portadores de sangue quente do micróbio da peste é extremamente extensivo e inclui mais de 200 espécies de 8 ordens de mamíferos. A principal fonte de praga na natureza são roedores e lagiformes. A contaminação natural é estabelecida em mais de 180 de suas espécies, mais de 40 delas fazem parte da Fauna da Rússia e territórios adjacentes (dentro da antiga URSS). Das 60 espécies de pulgas para as quais a possibilidade de transferência de um agente patogénico foi estabelecida em condições experimentais, 36 vivem neste território.

O germe da praga se replica no lúmen do tubo digestivo das pulgas. Na sua parte anterior é formada uma cortiça ("bloco de peste"), contendo um grande número de micróbios. Quando mordido por mamíferos com um fluxo de sangue reverso para a ferida do plugue, alguns dos micróbios são lavados, o que leva à infecção. Além disso, a excreta liberada pela pulga quando alimentada na ferida também pode levar à infecção.

As principais principais transportadoras de Y. Pestis no território da Rússia e da Ásia Central são esquilos terrestres, gerbils e marmotas, em alguns focos também existem poços e poços. A existência dos seguintes focos de praga está associada a eles.

• 5 focos em que o principal transportador do micróbio da peste é um pequeno suslik (interfassa Pre-Caspian do Norte-Oeste, Tersko-Sunzhensky, Prielbruskiy, focos semi-desérticos Volga-Ural e Zauralsky).
• 5 focos em que os transportadores são esquilos terrestres e groundhogs (em Altai-pikas): Zabaikalsky, Gorno-Altai, Tuva e os focos Tien-Shan e Pamir-Alai de alta montanha.
• Volga-Ural, Transcaucasianas e focos do deserto da Ásia Central, onde os principais portadores são gerbils.
• Focos Transcaucasianas e Gissar de alta montanha com os principais transportadores - camponeses.

Diferentes classificações de Yersinia pestis baseiam-se em diferentes grupos de características - características bioquímicas (variantes glicerina-positivas e glicerina-negativas), áreas de distribuição (variantes oceânicas e continentais), espécies de principais portadores (variedades de ratos e gopher). De acordo com uma das classificações mais comuns propostas em 1951 pelo investigador francês P. Devignat, dependendo da distribuição geográfica do patógeno e suas propriedades bioquímicas, distinguem-se três formas intraspecíficas (biovar) de Yersinia pestis.

De acordo com a classificação dos cientistas domésticos (Saratov, 1985), a espécie Yersinia pestis é dividida em 5 subespécies: Yersinia pestis subsp. Pestis (principal subespécie, inclui os três biovars da classificação de R. Devigny), Y. Pestis subsp. Altaica (subespécies altaicas), Yersinia pestis subsp. Caucasica (subespécies caucasianas), Y. Pestis subsp. Hissarica (subespécies Hissarian) e Yersinia pestis subsp. Ulegeica (subespécie Udege).

A infecção de uma pessoa ocorre através da picada de pulgas, com contato direto com material infeccioso, aéreo, raramente por via alimentar (por exemplo, ao comer carne de camelos, pacientes com praga). Em 1998-1999 anos. Praga no mundo, havia 30.534 pessoas, dos quais 2.234 morreram.

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Sintomas da praga

Dependendo do modo de infecção, a forma bubônica, pulmonar, intestinal da peste é distinguida; raramente séptico e cutâneo (vesículas purulentas no local da mordida de pulga). O período de incubação da praga varia de algumas horas a 9 dias. (em pessoas sujeitas a seroprevenção, até 12 dias). A praga dos patógenos penetra através do menor dano à pele (uma picada de pulga), às vezes através da mucosa ou gotículas no ar, atinge os linfonodos regionais, em que começa a se multiplicar rapidamente. A doença começa de repente: dor de cabeça severa, febre com calafrios, rosto hiperêmico, depois fica escuro, sob os olhos círculos escuros ("morte negra"). Bubon (ganglio inflamado inflamado aumentado) aparece no segundo dia. Às vezes, a praga se desenvolve tão rapidamente que o paciente morre antes do bubão aparecerá. Especialmente difícil é a peste pneumônica. Pode surgir como resultado da complicação da peste bubônica e durante a infecção por gotas no ar. A doença também se desenvolve muito grosseiramente: calafrios, febre alta e já nas primeiras horas dores no lado, tosse, primeiro seco e depois com escarro sangrento, junte-se; há delírios, cianose, colapso e morte. Um paciente com uma praga pulmonar representa um perigo excepcional para os outros, pois ele expõe um grande número de agentes patogênicos com escarro. No desenvolvimento da doença, o papel principal é desempenhado pela supressão da atividade de fagócitos: leucócitos neutrófilos e macrófagos. A reprodução e propagação sem restrições do patógeno através do sangue em todo o corpo suprime completamente o sistema imunológico e leva (na ausência de tratamento efetivo) à morte do paciente.

Diagnóstico laboratorial de peste

São utilizados métodos bacterioscópicos, bacteriológicos, serológicos e biológicos, bem como um teste alérgico com praga (para diagnóstico retrospectivo). O material para o estudo é: ponta do bubão (ou é destacável), escarro, sangue, com forma intestinal - fezes. Yersinia pestis é identificada com base em características morfológicas, culturais, bioquímicas, amostras com fago de praga e utilizando um teste biológico.

Um método simples e confiável para a determinação de antígenos de peste no material de teste é o uso de RPGA, especialmente com o uso de eritrócitos de diagnóstico, sensibilizados com anticorpos monoclonais contra antígeno capsul e IPM. Estas mesmas reações podem ser usadas para detectar anticorpos no soro de pacientes.

O método biológico de diagnóstico consiste em contaminação com o material de teste (quando está muito contaminado com a microflora que acompanha) da pele de cobaia, subcutânea ou raramente intraperitonealmente.

Ao trabalhar com material que contenha o agente causador da praga, é necessário um cumprimento rigoroso, portanto, todos os estudos são realizados apenas por pessoal bem treinado em instalações especiais anti-peste.

Prophylaxis of plague

O controle constante sobre os focos naturais da praga e a organização de medidas para prevenir doenças das pessoas no país são realizadas por um serviço especial anti-peste. Inclui cinco institutos anti-peste e dezenas de estações e escritórios anti-peste.

Apesar da presença de focos naturais, desde 1930 não houve um único caso de peste na Rússia no território da Rússia. Para a prevenção específica da praga, é utilizada a vacinação contra a peste - uma vacina viva atenuada da estirpe EV. É injetado dermicamente, por via intradérmica ou subcutânea. Além disso, foi proposta uma vacina de comprimido seco para administração oral. A imunidade pós-vacinação é formada pelo 5º-6º dia após a vacinação e persiste por 11 a 12 meses. Para sua avaliação e diagnóstico retrospectivo de praga, foi sugerido um teste alérgico intradérmico com uma praga. A reação é considerada positiva se for formada uma vedação de pelo menos 10 mm de diâmetro no local de injeção da praga após 24-48 h e aparece vermelhidão. Um teste alérgico é positivo em pessoas que possuem imunidade pós-infecciosa.

Grande contribuição para o estudo da peste e da organização de luta contra ele feita por cientistas russos :. Samoylovich DS (o primeiro não só na Rússia, mas também no século XVIII em "caçador" Europa para o micróbio praga, é oferecida pela primeira vez para vacinar contra a cinomose ), DK Zabolotny, NP Klodnitsky, IA Deminsky (estudo dos focos naturais da praga, portadores de seu agente causador nos focos, etc.), etc.