Microscopia confocal

A microscopia confocal é atualmente considerada um dos métodos mais promissores para imagens de pele in vivo, e é por isso que o interesse por ela é extraordinariamente alto entre médicos e representantes de institutos de pesquisa.

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Capacidades de Microscopia Confocal

Em dermatologia, a microscopia confocal a laser é usada para:

• estudo da penetração de compostos na pele (vias de penetração, cinética, distribuição na pele);
• observação do funcionamento das glândulas (determinação do estado ativo e passivo);
• estudos do leito microcirculatório (inclusive em tempo real);
• diagnóstico de neoplasias.

Sem discutir as vantagens e desvantagens dos tipos de microscopia confocal mencionados acima, notamos que, nos últimos anos, a microscopia confocal a laser de fluorescência se tornou cada vez mais popular.

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Microscopia confocal para exame de pele

O microscópio confocal oferece duas oportunidades inestimáveis: o estudo de tecidos em nível celular em estado de atividade vital fisiológica e a demonstração dos resultados do estudo (ou seja, atividade celular) em quatro dimensões: altura, largura, profundidade e tempo. Para a qualidade da imagem e a profundidade do estudo, o papel mais importante é desempenhado pela capacidade do tecido de transmitir luz, ou seja, sua transparência. O método de microscopia confocal é sem contato, o feixe de luz não causa nenhum dano ou desconforto ao paciente examinado ou ao animal experimental.

A microscopia confocal de varredura a laser (CSLM) é utilizada para examinar a pele. O método permite visualizar a epiderme e a camada papilar da derme com uma resolução próxima à histológica. Todos os resultados do exame são exibidos no monitor e salvos como um pacote de arquivos de imagem (como microfilme (dinâmico) ou microfotografias).

Existem dois tipos do método:

• reflexiva (refletância CSLM) - baseada no fato de que várias estruturas intracelulares e intercelulares têm diferentes índices de refração de luz, o que permite obter uma imagem de contraste.
• fluorescência (fluorescência CSLM) - usa luz laser que penetra na pele e excita exo ou endocromóforos nela, que em resposta começam a emitir fótons (ou seja, fluorescem).

Resolução lateral é a distância mínima entre pontos localizados em um plano horizontal, ou seja, um plano paralelo à superfície da pele. Resolução axial é a distância mínima entre pontos localizados em um plano perpendicular à superfície da pele.

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História da microscopia confocal

A ideia de criar um microscópio capaz de mostrar uma seção de tecido vivo no nível celular foi desenvolvida ativamente há 130 anos. O principal elemento dos microscópios modernos foi projetado no final do século XIX e era um disco giratório com pequenos orifícios dispostos em espiral. Este disco foi inventado em 1883 por um estudante alemão Paul Nipkow, de quem recebeu o nome - o disco de Nipkow (ou disco de Nipkow). A invenção baseou-se na capacidade da luz, passando por pequenos orifícios no disco e uma lente de aumento, de penetrar profundamente no tecido e iluminar um fragmento celular a uma certa distância da superfície. Quando o disco gira rapidamente, os fragmentos formam uma única imagem. Ao mover a estrutura para mais perto ou para mais longe do objeto, é possível variar a profundidade da seção óptica do tecido em estudo.

Foi somente com o advento dos gravadores de vídeo na década de 1980 e dos computadores capazes de processar imagens no início da década de 1990 que se tornou possível criar e usar efetivamente os microscópios modernos usados hoje.