Novos dados sobre os mecanismos de combate ao câncer bucal pelo cogumelo chaga

Em um estudo recente publicado na Scientific Reports, os pesquisadores examinaram os mecanismos de atividade antitumoral de extratos de cogumelo chaga em células HSC-4 de câncer oral humano.

O câncer bucal é um problema de saúde global com opções de tratamento limitadas devido aos seus efeitos colaterais e sequelas. Os principais tratamentos são cirurgia, radioterapia e quimioterapia, embora possam causar danos aos tecidos saudáveis, afetar a fala e reduzir a qualidade de vida.

Compreender e direcionar as vias metabólicas nas células tumorais fornece um caminho possível para o desenvolvimento de novos agentes terapêuticos. O cogumelo Chaga tem propriedades anticancerígenas contra vários tipos de câncer; no entanto, o mecanismo não está claro.

Neste estudo, os pesquisadores testaram se o cogumelo chaga afeta o desenvolvimento e o metabolismo do câncer bucal.

Após o tratamento com o extrato de cogumelo, os pesquisadores estudaram a sobrevivência celular, a capacidade de proliferação, as vias glicolíticas, a apoptose e os mecanismos de respiração mitocondrial.

Eles trataram células HSC-4 com extrato fúngico em doses de 0 μg/ml, 160 μg/ml, 200 μg/ml, 400 μg/ml e 800,0 μg/ml por um dia para avaliar seu efeito no comportamento celular oral. Tumor maligno, incluindo ciclo celular, proliferação, viabilidade, respiração mitocondrial, apoptose e glicólise.

A equipe analisou as células tratadas em termos de seu ciclo celular, usando ensaios Cell Counting Kit-8 (CCK-8) para determinar a viabilidade celular.

Para investigar se os efeitos supressores do cogumelo chaga na proliferação e sobrevivência tumoral nas células tratadas envolvem o transdutor de sinal e o ativador da transcrição 3 (STAT3), eles mediram a ativação do STAT3 após o tratamento com uma dose de 200,0 μg/ml de extrato. p>

Eles também realizaram citometria de fluxo para analisar a distribuição celular e Western blotting para extrair proteínas celulares totais.

Os pesquisadores usaram cromatografia líquida seguida de espectrometria de massa em tandem (LC-MS) para identificar os componentes responsáveis pelas propriedades anticancerígenas do extrato de cogumelo chaga.

As concentrações dos compostos candidatos foram determinadas usando cromatografia líquida de alta eficiência com detector de fotodiodo (HPLC-DAD).

Eles examinaram a regulação da glicólise por extratos entre células tratadas usando um ensaio de taxa de acidificação extracelular (ECAR). Eles registraram medições de ECAR em tempo real em células tratadas após administração de glicose, oligomicina e 2-desoxi-D-glicose (2-DG).

A equipe examinou a ativação de um sensor de energia chamado proteína quinase ativada por adenosina monofosfato (AMPK) e a taxa de consumo de oxigênio celular (OCR).

Eles também avaliaram o efeito da deficiência crônica de energia na autofagia associada à morte celular por apoptose nas células tratadas.

Eles estudaram se uma concentração de extrato de chaga de 200,0 μg/ml afetava a apoptose estimulada por proteínas quinases ativadas por mitógeno p38 (MAPKs) e fator nuclear kappa B (NF-κB) em células tratadas.

O extrato retardou o crescimento das células HSC-4, inibindo o ciclo celular e a proliferação, reduzindo o consumo de energia das células cancerígenas e aumentando a morte celular por meio de autofagia e apoptose.

O extrato aumentou significativamente as fases de crescimento das células do câncer oral (G0/G1), ao mesmo tempo que diminuiu a fase de síntese (S). Em um estudo de Western blot, descobriu-se que o extrato reduziu significativamente a expressão de fosfo-STAT3 após 15 minutos e a manteve por 120 minutos.

LC-MS identificou três possíveis substâncias anticancerígenas: ácido 2-hidroxi-3,4-dimetoxibenzóico, ácido siríngico e ácido protocatecuico. O extrato inibiu a glicólise, a capacidade glicolítica e as reservas glicolíticas nas células tratadas.

Também ativou a AMPK, promovendo a autofagia e inibindo as vias glicolíticas nas células tratadas. A indução de autofagia pelo extrato mostrou um aumento dependente da dose nas taxas respiratórias mitocondriais basais e na renovação do trifosfato de adenosina (ATP).

No entanto, não foram observadas alterações significativas nas taxas respiratórias máximas mitocondriais, exceto nos casos com maior concentração de extrato. Além disso, os pesquisadores observaram uma diminuição significativa, dependente da dose, na capacidade de reserva respiratória mitocondrial.

Os resultados mostraram que os cogumelos chaga reduziram os potenciais de membrana mitocondrial nas células tratadas através de autofagia persistente impulsionada pela inibição da glicólise, implicando que a disfunção mitocondrial causa apoptose.

A ativação de NF-κB e p38 MAPK pelo extrato aumentou a apoptose. O extrato aumentou a apoptose precoce das células tratadas de maneira dependente da dose.

No entanto, não foram observadas diferenças significativas na apoptose tardia em concentrações de extrato de 0 a 400 μg/ml. Altas doses de extrato de chaga podem afetar outras fisiologias celulares e reduzir a capacidade respiratória mitocondrial máxima.

Os pesquisadores descobriram que o extrato de chaga suprimiu os potenciais de membrana mitocondrial e a atividade glicolítica na linhagem celular HSC-4, resultando na diminuição dos níveis de ATP e na autofagia.

A ativação da AMPK teve efeitos ao induzir a autofagia. A desfosforilação de STAT3 inibe o ciclo celular, estimulando vias apoptóticas através da ativação de NF-κB e p38 MAPK.

Vários mecanismos de sinalização celular mediaram os efeitos inibitórios do extrato. O extrato continha três compostos anticancerígenos: ácido 2-hidroxi-3,4-dimetoxibenzóico, ácido seringico e ácido protocatecuico.

Embora sejam necessários mais estudos pré-clínicos para determinar se o extrato inibe o crescimento do tumor, os resultados do estudo sugerem que o extrato de cogumelo pode ser um potencial agente terapêutico complementar para o tratamento de pacientes com câncer oral.