O uso de tecnologias celulares para melhorar a aparência de cicatrizes

A ciência moderna é caracterizada pelo rápido desenvolvimento de uma série de disciplinas relacionadas, unidas sob o nome comum de "biotecnologia". Esta seção de ciência, baseada em avanços recentes em biologia, citologia, genética molecular, engenharia genética, transplantologia, visa usar o enorme potencial inerente às células vegetais e animais - as unidades estruturais básicas de todos os seres vivos. "Uma célula viva é um reator biotecnológico pronto, no qual não só os processos que conduzem à formação do produto final são realizados, mas também alguns outros que contribuem para manter a atividade catalítica do sistema em um nível alto", John Woodward, 1992. O início da ciência da célula foi posta em 1665, quando o físico inglês R. Hooke criou o primeiro microscópio e no plug encontrou células - cellulae ("células"). Em 1829, M. Schleiden e T. Schwann fundamentaram a "teoria celular", que provou que todos os seres vivos consistem em células. R.Virkhov, em 1858, provou que, em uma base de todas as doenças, a violação da organização estrutural e o metabolismo das células se colocam. Ele se tornou o fundador da "patologia celular". O contributo fundamental para a ciência da célula foi feito em 1907-1911. R. Garrison e AA Maksimov, provando a possibilidade de cultivar células fora do corpo. Seu trabalho mostrou que, para o cultivo de células, os tecidos animais e partes de plantas devem ser mecanicamente desconectados de pequenos pedaços. Para isolar as células, os tecidos são cortados com uma faca afiada ou microtomo em secções finas, aproximadamente 0,5-1,0 mm. A divisão física das células é chamada de imobilização. As células isoladas são obtidas por dispersão enzimática de pedaços de plantas ou tecidos. Após esmagamento com tesoura afiada, as peças são tratadas com tripsina ou colagenase para obter uma suspensão - suspensão de células individuais ou seus microagregados em um meio especial. Os géis de alginato (alginato de cálcio) são amplamente utilizados para imobilizar células vegetais. Está provado que as células de plantas e animais imobilizadas mantêm a capacidade de biossíntese. Os produtos da biossíntese celular acumulam-se nas células, a sua expressão ocorre espontaneamente, ou com a ajuda de substâncias especiais que promovem a maior permeabilidade das membranas celulares.

O cultivo de células animais é um processo muito mais complicado do que o cultivo de células de plantas, o que requer equipamentos modernos especiais, tecnologias elevadas, a presença de vários meios de comunicação, fatores de crescimento projetados para preservar a viabilidade das células e mantê-las em um estado de alta atividade funcional. Verificou-se que a maioria das células de tecidos duros, como o rim, o fígado e os tecidos da pele, são dependentes da superfície, então, in vitro, eles só podem ser cultivados sob a forma de camadas finas ou monocapas diretamente ligadas à superfície do substrato. A longevidade, a proliferação ea estabilidade funcional das células obtidas pela dispersão de tecido enzimático dependem em grande parte do substrato em que são cultivadas. Sabe-se que todas as células obtidas a partir de tecidos vertebrados têm uma carga superficial negativa, de modo que os substratos carregados positivamente são adequados para sua imobilização. As células isoladas obtidas diretamente de tecidos inteiros podem ser mantidas na cultura primária em um estado imobilizado, mantendo alta especificidade e sensibilidade por 10 a 14 dias. As células imobilizadas e dependentes da superfície desempenham um papel importante na biologia hoje, especialmente seu papel é importante para os estudos clínicos. Eles são usados para estudar os ciclos de desenvolvimento celular, a regulação do seu crescimento e diferenciação, diferenças funcionais e morfológicas entre células normais e tumorais. As monocapas imobilizadas de células são usadas em biotetos, para a determinação quantitativa de substâncias biologicamente ativas, bem como para estudar os efeitos de várias drogas e toxinas sobre elas. Um grande interesse na célula, como um dispositivo médico, foi demonstrado por médicos de todas as especialidades há várias décadas. Nessa direção, as tecnologias celulares estão se desenvolvendo rapidamente.

Com o início da terapia celular e celular, o nome do famoso cientista russo V.P. Filatova, que em 1913 lançou as bases da doutrina da terapia de tecidos, estudando os resultados de transplantes de córnea de doadores saudáveis para pacientes com catarata. No processo de trabalho com transplante de córnea, ele descobriu que a córnea preservada no frio por 1-3 dias a uma temperatura de -2 -4 graus C fica melhor do que fresco. Assim, verificou-se que a propriedade das células segrega em condições desfavoráveis algumas substâncias que excitam processos vitais em tecidos transplantados e regeneram-se nos tecidos do receptor. O tecido e as células separadas do corpo estão em um estado de experiência, ou seja, uma vida desacelerada. Neles, a circulação sanguínea para, e consequentemente a nutrição. A respiração dos tecidos é extremamente difícil, a inervação e os tróficos estão chateados. Sendo em um novo estado qualitativo, adaptando-se às novas condições de existência da célula, produzem substâncias especiais que possuem propriedades medicinais. Essas substâncias de natureza não protéica foram designadas por V.P. Filatov como estimulantes biogênicos. Ele estabeleceu, junto com o V.V. Skorodinskaya, que o material de animais e plantas pode ser livremente autoclavado a 120 graus C por uma hora após a exposição a condições desfavoráveis, enquanto não só não perderam a atividade, mas antes intensificado, o que foi explicado pelo rendimento estimulantes biológicos de tecidos enlatados. Além disso, eles perderam propriedades antigênicas, o que reduziu significativamente a possibilidade de rejeição. O material estéril em lata foi injetado no corpo por implantação (replantação) sob a pele ou sob a forma de injeções de extratos, obtendo resultados adequados. Verificou-se também que os tecidos fetais contêm significativamente mais substâncias biologicamente ativas do que os tecidos adultos, e alguns fatores são encontrados apenas em embriões. Os tecidos fetais inoculados não são percebidos pelo organismo receptor como estrangeiros devido à ausência de proteínas na estrutura da membrana citoplasmática responsável pela especificidade específica do tecido e individual (proteínas do principal complexo de histocompatibilidade). Como resultado, a inoculação de tecidos fetais humanos no corpo humano não desencadeia os mecanismos de defesa imunológica e a reação de incompatibilidade e rejeição. VP Filatov na prática médica amplamente utilizada na placenta humana e na pele. Os cursos de tratamento consistiram em 30-45 injeções de extratos de tecido e 1-2 implantes de tecidos autoclavados.

Tendo iniciado a pesquisa com tecidos e células humanas e animais, ele transferiu suas generalizações para o mundo das plantas. Fazendo experiências com partes vivas de plantas (aloe, plantain, agave, beterraba, St. John's Wort, etc.), ele criou condições desfavoráveis para elas, colocando as folhas cortadas em um lugar escuro, já que, para toda a vida, a planta precisa de luz. A partir da turfa enlameada e da turfa, eles também receberam estimuladores biogênicos, devido ao fato de que a lama e a turfa são formadas com a participação de microflora e microfauna.

Um novo estágio no desenvolvimento da terapia de tecido foi recebido no final da década de 1970, quando o conhecimento e a experiência acumulados ao longo de décadas permitiram o uso, em um nível qualitativamente novo, de tecidos e células de animais e plantas para tratar uma pessoa e prolongar sua longevidade ativa. Assim, em algumas clínicas domésticas e um número de mulheres estrangeiras em menopausa fisiológica com síndrome climatérica ou no contexto da ovariectomia, terapia tecidual com tecidos fetais da placenta, hipotálamo, fígado, ovários, timo e glândulas tireoideas. Em uma das mais prestigiadas clínicas de geronto-cosmetologia da Europa Ocidental, há vários anos que já foram utilizadas injeções de extratos derivados de tecidos fetais das glândulas sexuais de carneiros para os mesmos fins.

Em nosso país, o tratamento bioestimulante também foi amplamente utilizado. Pacientes com várias doenças até recentemente foram injeções ativamente prescritas de extratos de placenta, aloe, colante, grande (biodosídeo), FBS, peloidodistilado, peloidina, turfa, humisol preparado de acordo com o método de VP Filatov. Atualmente, nas farmácias, é praticamente impossível comprar essas preparações de tecido domésticos altamente eficazes e econômicas de origem animal, vegetal e mineral.

Com base na obtenção de várias preparações biogênicas a partir de tecidos e órgãos humanos de produção de importação, como o rumalon (do tecido da cartilagem e da medula óssea), actovegin (do sangue dos bezerros), solcoseryl (extrato de sangue do gado) e também preparações domésticas - vítrea do corpo vítreo do olho do gado), kerakol (da córnea do gado), esplenina (do baço do gado), epitálamo (da região epitelial-epífisária) são também os estudos de VP Filatov. A propriedade comum para todas as preparações de tecidos é o efeito geral sobre todo o organismo. Assim, a "Tissue Therapy" do Academico VP Filatov foi a base da maioria dos desenvolvimentos e direções modernas em cirurgia, imunologia, obstetrícia e ginecologia, gerontologia, combustiologia, dermatologia e cosmetologia associadas à célula e produtos de sua biossíntese.

O problema do transplante de tecidos tem preocupado a humanidade desde a antiguidade. Assim, no papiro de Ebers, datado de 8000 aC, já se menciona o uso do transplante de tecido para compensar defeitos em partes individuais do corpo. No "Livro da Vida" do cientista indiano Sushruta, que viveu por 1.000 litros. BC há uma descrição detalhada da restauração do nariz da pele das bochechas e da testa.

A necessidade de pele do doador cresceu proporcionalmente ao aumento do número de cirurgias plásticas e reconstrutivas. A este respeito, começou a usar a pele cadavérica e fetal. Havia uma necessidade de conservar os recursos dos doadores e encontrar formas de substituir a pele humana por tecidos animais, várias opções de modelagem da pele. E foi nessa direção que os cientistas trabalharam, quando em 1941 P.Medovar mostrou pela primeira vez a principal possibilidade de crescimento de queratinócitos in vitro. O próximo passo importante no desenvolvimento de tecnologia celular foi o trabalho de Karasek M. E M. Charlton, que em 1971 realizada a primeira transplante bem sucedido de queratinócitos autólogos a partir de uma cultura primária de feridas de coelho, utilizando-se como substrato para o cultivo de gel de colagénio KC, melhorando, assim, a proliferação celular na cultura. J.Rheinvvald. H Verde. Desenvolveram uma tecnologia para o cultivo em série de grandes quantidades de queratinócitos humanos. Em 1979, verde e colegas de trabalho descobriram as perspectivas de aplicação médica de cultura de células de queratinócitos na reconstrução da pele com queimaduras extensas, após o que esta técnica está constantemente a ser melhoradas, começou a ser utilizado por cirurgiões centros de queimadura no exterior e em nosso país.

No processo de estudar células vivas revelou que as células produzem não só estimuladores biogênicas de origem não-proteína, mas também uma série de citocinas, neurotransmissores, fatores de crescimento, polipeptídeos, que desempenham um papel importante na regulação da homeostase de todo o organismo. Verificou-se que, em várias células e tecidos, os bioreguladores de péptidos estão contidos. Que possuem uma ampla gama de efeitos biológicos e coordenam o desenvolvimento e o funcionamento de sistemas multicelulares. A era da aplicação da cultura celular como agente terapêutico começou. Em nosso país, a implantação de uma suspensão de fibroblastos e costuras de queratinócitos celulares em camadas múltiplas nas últimas décadas foi adotada em combobustologia. Tal interesse ativo no transplante de células da pele queimou devido à necessidade de fechamento rápido de grandes superfícies de queimadura e falta de pele doadora. A capacidade de um pequeno pedaço de pele para isolar células capazes de cobrir a superfície da ferida em 1000 e até 10.000 vezes maior do que a área da pele doadora resultou ser muito atraente e importante para a combustiologia e queimar pacientes. A percentagem de enxerto de costuras de queratinócitos varia de acordo com a área de queimadura, idade e estado de saúde do paciente de 71,5 a 93,6%. O interesse no transplante de queratinócitos e fibroblastos associada não só com a capacidade de fechar rapidamente o defeito na pele, mas também para o facto de que estes transplantes tem potencial bioactivo potente para melhorar a aparência de tecidos derivados de transplantes. Tumores de vasos sanguíneos, a remoção de hipoxia, melhoria do trofismo, maturação acelerada de tecido imaturo - que base morfo-funcional destas alterações positivas que ocorrem devido à libertação das células transplantadas, factores de crescimento e citocinas. Assim, graças à introdução na prática clínica de tecnologias de celular transplante camadas multicelulares avançados de queratinócitos e fibroblastos autólogos e alogênicos em superfícies extensas ferida, Combustiology teve a oportunidade não só para reduzir a taxa de mortalidade disparou com uma grande percentagem de lesões de pele, mas também para melhorar o tecido da cicatriz de qualidade, o que inevitavelmente ocorre no local das queimaduras IIb e IIIa e 6 graus. Combustiologists experiência obtidos no tratamento de superfícies de feridas em pacientes com queimaduras sugeriu a ideia de usar já é um método modificado de verde em dermatologia e prática cirúrgica em vários pele e patologia estética (úlceras, vitiligo, nevo, epidermólise bolhosa, remoção de tatuagens, relacionadas com a idade alterações cutâneas tróficos, bem como para melhorar o aparecimento de cicatrizes).

O uso de queratinócitos alogênicos em cirurgia, combustiologia e dermatocosmetologia tem várias vantagens sobre o uso de queratinócitos autólogos, uma vez que o material celular pode ser preparado antecipadamente em quantidades ilimitadas, enlatadas e aplicadas, se necessário. Sabe-se também que as KCs alogênicas têm uma atividade antigênica reduzida, uma vez que as células de Langerhans, portadores de antígenos do complexo HLA, estão perdendo o cultivo in vitro. A favor do uso de KC alogênico, também é dito que eles são substituídos por autólogos após o transplante, de acordo com os dados de diferentes autores em termos de 10 dias a 3 meses. Em conexão com isso, os bancos de células foram criados em muitos países, graças aos quais os transplantes celulares podem ser produzidos na quantidade certa e no momento certo. Esses bancos estão na Alemanha, nos EUA, no Japão.

O interesse no uso de tecnologias celulares em dermatocosmetologia é devido ao fato de que as "composições celulares" possuem um poderoso potencial bioenergético e de informação, graças ao qual é possível obter novos resultados qualitativamente novos. As autocinas liberadas pelas células transplantadas (fatores de crescimento, citocinas, óxido nítrico, etc.) atuam principalmente em seus próprios fibroblastos, aumentando sua atividade sintética e proliferativa. Este fato é especialmente atraente para os pesquisadores, uma vez que o fibroblasto é a célula-chave da derme, cujo estado funcional depende do estado de todas as camadas da pele. Sabe-se também que, após Cauter lesão da pele, laser, de agulhas e outras ferramentas, a partir da medula óssea, tecido adiposo e pericyte capilar é reabastecido com precursores tronco de fibroblastos da pele frescos que promove "rejuvenescimento" células própria piscina. Eles começam ativamente a sintetizar colágeno, elastina, enzimas, glicosaminoglicanos, fatores de crescimento e outras moléculas biologicamente ativas, o que leva a um aumento da hidratação e vascularização da derme, melhora sua força,