Equivalente dérmico. A história e os resultados dos ensaios clínicos

No final dos anos oitenta, uma forma líquida de colágeno bovino foi desenvolvida na Universidade de Stanford, que à temperatura corporal foi transformada em um substrato elástico macio. A droga foi registrada e aprovada para uso em vários países europeus como um medicamento implantável chamado Zyderm Collagen Implantant. Esta droga foi o primeiro implante. Mais tarde, outros agentes para a plastia de contorno apareceram, como restylane, perlene, gel farmacológico, artekol, gel biopolímero e outros. Essas drogas começaram a ser usadas não só para modelagem de contorno e correção de alterações relacionadas à idade na pele, mas também para tratamento, ou melhor, para igualar o alívio de cicatrizes. Todos foram injetados no fundo do rúmen.

A busca de melhores métodos de tratamento de cicatrizes hipotróficas levou-nos à idéia de usar para este propósito um análogo de pele criado artificialmente - o "equivalente dérmico" (DE), no qual o colágeno líquido também foi usado. Houve muitas opções para substitutos artificiais da pele, mas a idéia é criar um tecido semelhante à pele dos componentes estruturais da derme, o que não seria rejeitado no caso de transplantes e seria um bom substrato para germinação pela derme e epiderme. Sabe-se que os principais componentes estruturais da derme são elementos celulares, fibrosos e substância intersticial. Elementos fibrosos são principalmente fibras de colágeno e elastina, substâncias intersticiais - glicoproteínas, proteoglicanos e glicosaminoglicanos. O principal elemento celular funcional da derme é fibroblasto, a população celular de fibroblastos é a fonte de quase todos os componentes estruturais da derme. Portanto, ao criar um "substituto da pele", a maioria dos cientistas usa um substrato de colágeno misturado com fibroblastos e glicosaminoglicanos. Acima, de uma forma ou de outra, uma camada de queratinócitos se sobrepõe a criar uma pele de camada completa e uma recuperação mais rápida da vitalidade do equivalente de pele transplantada, facilitada por vários fatores de crescimento derivados de queratinócitos. Uma das primeiras variantes do "equivalente vivo da pele" foi proposta em 1983 por E.Bell e co-autores. Os fibroblastos da pele foram misturados com colágeno, plasma e meio de crescimento, o que levou à formação de um gel na superfície do qual os queratinócitos foram cultivados. Tudo isso foi cultivado durante 1 -2 semanas em vilro, após o qual o equivalente dérmico foi considerado maduro e foi um tecido viável na forma de uma massa elástica translúcida. Os autores propuseram transferir a estrutura de camada completa da pele para as superfícies de feridas de pacientes queimados. Como base para o equivalente dérmico, alguns autores usaram uma esponja de colágeno ou uma matriz de colágeno revestida com proteoglicanos e colonizada com fibroblastos, em cima dos quais os queratinócitos autólogos foram cultivados. Como resultado, o chamado modelo de pele tridimensional foi criado. Para o cultivo de queratinócitos com o propósito de transferência posterior para as superfícies da ferida, alguns autores também usaram como matrizes artificiais de colágeno, glicosaminoglicanos e quitosana, pele de cadáver, pele de porco. 7-14 dias após o início da cultura, um enxerto completo contendo a derme e epiderme foi transplantado para feridas de pacientes ou animais.

O substituto artificial da pele foi utilizado não só para restaurar a pele de queimadas, mas também para testar drogas para a citotoxicidade, para estudar fatores de crescimento in vitro.

Insuficiente, em nossa opinião, a eficácia da dermabrasão operatória de cicatrizes hipotróficas profundas em combinação com o transplante de IPC deu uma ocasião para tentar nivelar o alívio da pele inoculando o aprofundamento do análogo do rúmen hipotrófico do equivalente dérmico. O substrato para a criação de um equivalente dérmico foi o colágeno líquido, obtido por via laboratorial, onde foi introduzida uma suspensão de fibroblastos. O equivalente dérmico, bem como o IPC, foi criado em um laboratório especializado certificado para esta atividade e no dia e hora da operação foi entregue em um frasco de vidro em um recipiente de gelo para a clínica.

A moagem cirúrgica das cicatrizes foi realizada de acordo com o procedimento usual após tratamento anti-séptico da pele e anestesia local com lidocaína a 2% ou novocaína ou ultracaína. Por moagem, a superfície do rúmen foi nivelada e, ao mesmo tempo, foram criadas condições para ingerir células cultivadas ou composições celulares. Depois disso, o gel de colágeno líquido no estado resfriado com fibroblastos inoculados foi aplicado com uma espátula estéril na superfície do solo das cicatrizes hipotróficas (na indentação da cicatriz), onde, sob a influência da temperatura corporal, ocorreu a polimerização.

Como resultado, após 5-10 minutos, do colágeno de estado líquido com fibroblastos polimerizados em um estado de gel espesso. Após o espessamento de DE, uma bandagem com uma suspensão ou IPC no substrato foi aplicada a partir de cima.

Um curativo estéril de várias camadas foi fixado como no transplante do IPC. Dependendo da superfície da cicatriz, a cobertura da ferida, na qual os queratinócitos foram localizados e o tipo de moagem, a bandagem foi arrancada dentro de 7 a 12 dias.

O método de tratamento combinado de cicatrizes hipotróficas com a ajuda da dermoabrasão operatória com posterior transplante para a indentação da cicatriz do equivalente dérmico e queratinócitos sob a forma de uma camada multicamada cultivada em revestimentos de feridas especiais ou sob a forma de suspensão permite alcançar resultados significativamente melhores e cosmeticamente aceitáveis com redução ou desaparecimento completo -) pano. O equivalente dérmico forma seu próprio tecido (derme), o tecido cicatricial permanece abaixo do tecido recém formado. O IPC cria uma espessura normal e atividade funcional da epiderme, devido ao qual a aparência geral da cicatriz em alguns meses tende a uma melhoria significativa.

Tais táticas de tratamento de cicatrizes hipotróficas no momento podem ser chamadas de ótimas para resolver esse problema. No entanto, a versão DE utilizada por nós na forma de um gel de colágeno com fibroblastos inoculados nele não é muito conveniente no trabalho. O DE para o trabalho com cicatrizes hipotróficas deve ser inicialmente mais espesso, de modo que ele possa ser colocado no aprofundamento da cicatriz, distribuí-lo. Após o que a ferida superior ferida com queratinócitos. Assim, pode-se dizer que esta direção no trabalho com cicatrizes hipotróficas é planejada apenas, mas as previsões para seu desenvolvimento e estudo ainda são muito otimistas.

A complexidade eo alto custo de obtenção de camadas multicamadas de queratinócitos, como material terapêutico, estimularam a necessidade de procurar outras variantes de composições celulares. Os pesquisadores estão interessados no cultivo de fibroblastos, que, quando transplantados para as superfícies da ferida, têm um efeito semelhante em muitos aspectos aos resultados do transplante de queratinócitos, mas são materiais celulares muito mais simples e mais baratos. Em nossos estudos, realizamos vários pacientes com cicatrizes hipotróficas por mesoterapia usando uma suspensão de fibroblastos para cicatrizes.

Suspensão de fibroblastos em meio de crescimento com 1,5-2 milhões de células por ml. Foi administrado sob as cicatrizes por técnicas de mesoterapia (micropapulmonar, infiltrativo). O número de sessões de tratamento de 4 a 10, dependendo do período de limitação do rúmen, da idade do paciente e da profundidade do defeito. O intervalo entre sessões é de 7 a 10 dias. Em regra geral, a introdução de uma suspensão de fibroblastos autólogos e alogênicos foi acompanhada por uma leve e vascular reação rápida.

Como resultado de estudos clínicos, verificou-se que sob a influência do IPC transplantado, a duração da reação inflamatória na pele e cicatrizes após a dermabrasão operatória diminui e a epitelização das superfícies da ferida acelera em média 3-4 dias.

Ao trabalhar com cicatrizes normotróficas e hipertróficas, a aceleração da cicatrização das erosões pós-operatórias é de maior importância, pois nisso se encontra a possibilidade de obter o efeito terapêutico ótimo.

O transplante do equivalente dérmico resultou no preenchimento de (-) tecido de cicatrizes hipotróficas, alinhamento do alívio, alisamento com a pele circundante, o que tornou a área das cicatrizes muito menor.

A introdução de uma suspensão de fibroblastos em cicatrizes hipotróficas também levou a uma compensação do alívio da pele e uma redução na área das cicatrizes.

Em todos os casos de transplante de material celular, observou-se o efeito do pós-efeito, quando durante vários meses ocorreu uma melhora na aparência estética das cicatrizes, que tendem a se tornar uma estrutura semelhante a uma dermóide.

Todos os efeitos observados por nós estão relacionados à realização do potencial de bioestimulação por células transplantadas. Não é menos o papel, como nos parece, ter o fato de que o número de camadas celulares em enxertos, como regra, é 10-30% maior. Conseqüentemente, o potencial celular total por unidade de área já é 10-30% maior do que o normal. Além disso, os melhores resultados no transplante de queratinócitos e fibroblastos foram obtidos através do transplante do material celular de pessoas jovens e saudáveis. Esse fato, por sinal, fala em favor do uso da cultura alogênica obtida de doadores jovens e saudáveis. O potencial bioenergético e informativo de tal cultura é transmitido para suas próprias células, às vezes receptores muito jovens, o que melhora a "qualidade" de seus próprios tecidos e células.

Assim, a aplicação da cultura de queratinócitos e fibroblastos permite:

• Acelere a epitelização das cicatrizes após a dermabrasão.
• Reduzir o aparecimento de cicatrizes, não só devido ao alinhamento da sua superfície com a superfície da pele circundante, mas também devido à formação de uma epiderme completa sobre elas.
• Para melhorar os resultados da dermabrasão operativa devido ao efeito de citoquinas de células transplantadas na cicatriz, que finalmente tende a se transformar em uma estrutura semelhante a uma dérmica.
• Para obter resultados esteticamente muito mais aceitáveis do tratamento de pacientes com cicatrizes e estrias normotróficas, hipotróficas, hipertróficas, atróficas e atróficas.

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